夏季高温作业者保健知识

在高温环境下,人的生理功能,尤其是体温调节.水盐代谢、血液循环等功能都会出现异常改变,如大量出汗,心血管负担加重等.若高温超过人体的耐受力,轻则降低工作效力,重则引起中暑所以做好高温工作者的保健十分重要.     

高粱KNOX基因家族鉴定及SbKNOX22基因表达分析

KNOX基因家族是植物生长发育过程中所特有的一类转录因子,其在植物的形态建成方面发挥着重要的作用。为研究高粱KNOX基因家族特征及SbKNOX22的表达特性,本研究利用生物信息学和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的分析方法,对高粱KNOX基因家族进行了鉴定和表达分析。结果表明,在高粱中共鉴定到23个KNOX基因(SbKNOX1~SbKNOX23),亚细胞定位显示均定位于细胞核中,氨基酸序列长度介于184~802 aa之间,分子量大小介于20.23~86.14 kDa之间,理论等电点介于7.28~4.76之间,高粱KNOX基因家族蛋白均属亲水性蛋白,分布在8条染色体上。系统进化结果显示,高粱KNOX基因家族分为Class Ⅰ和Class Ⅱ两类;基因结构分析表明,Class Ⅱ类中各亚类家族成员之间的外显子和内含子数量存在较大差异;Motif分析显示,Homeobox KN结构域最为保守。qRT-PCR分析表明,SbKNOX22在高粱叶片中表达,水杨酸处理6 h时表达量最高,PEG 6000和甘露醇模拟干旱胁迫处理0.5 h后表达量开始降低,NaCl胁迫处理9 h时表达量最高。本研究结果为进一步探索KNOX家族在调节高粱生长发育、信号转导和植物激素调控等过程中的作用提供了基础。     

低乙醛啤酒酵母风味优势菌株的选育

啤酒发酵过程中的乙醛主要由啤酒酵母代谢产生,其含量极大地影响啤酒的风味和品质.目前已有大量研究通过选育啤酒酵母来降低啤酒中乙醛含量,但由于大部分采用了分子手段或不符合食品安全条件的方式,尚未真正投入到啤酒的实际生产应用中去.本研究中,以啤酒企业提供的啤酒酵母YJ为出发菌株,经过常压室温等离子体诱变(Atmospheric and room temperature plasma,ARTP)处理,双硫仑平板初筛,摇瓶发酵复筛,获得了遗传稳定性和发酵稳定性良好的低产乙醛诱变菌株S48,进而在啤酒工厂进行100 L小试的发酵验证.结果发现,与出发菌株相比,诱变菌发酵的啤酒样品中乙醛含量降低了 23.69％,其酒精度有所提高,苦味质、总酸和双乙酰含量更低,主要风味物质无较大差异,醇酯比及感官分析结果更加协调.     

硫磺与水杨酸配施对韭菜硝酸盐累积及氮代谢的影响

以3年生韭菜为试验材料,研究了不同浓度的硫磺（S,土施）和3 mmol/L水杨酸（SA,叶面喷施）配施对韭菜硝酸盐含量、氮代谢关键酶活性和叶绿素荧光参数的影响。结果表明,韭菜鲜重、硝酸盐含量、硝酸还原酶活性（NRA）、PSII 最大光化学量子产量（Fv/Fm）、电子传递速率（ETR）和可溶性蛋白含量均与硫磺和水杨酸的配施浓度有密切关系,与对照相比,7.2 kg/hm2的硫和 3 mmol/L 的水杨酸配施处理韭菜叶片的硝酸盐含量明显降低,降幅为16.6%;鲜重、NRA、Fv/Fm、ETR和可溶性蛋白含量分别提高了10.7%、12.3%、10.1%、21.2% 和 4.2%;谷氨酸丙酮酸转氨酶（GOT）和谷氨酸草酰乙酸转氨酶（GPT）活性却随着硫浓度的增加呈现出逐渐增加的趋势,当硫浓度为 54 kg/hm2 时,GOT和GPT的活性达到最高,分别比对照增加了13.6% 和 9.4%。由此可以看出,适宜浓度的硫磺和水杨酸配施可促进韭菜叶片氮代谢中硝酸盐的还原与同化,同时调动转氨作用的积极协同配合,促进了硝态氮转化为游离氨基酸和可溶性蛋白,这可能是硫磺和水杨酸配施降低韭菜硝酸盐累积的一个重要原因。     

菟丝子寄生后紫茎泽兰的叶绿素及酶类活性变化研究

为寻找防治紫茎泽兰的新方法,利用菟丝子对紫茎泽兰的寄生作用,对寄生后紫茎泽兰的叶绿素、POD、SOD和PAL酶的OD值及其MDA含量的变化进行了测定,结果表明:紫茎泽兰被菟丝子寄生后其叶绿素含量下降,POD和SOD酶活性下降,PAL酶活性则上升,菟丝子防控紫茎泽兰具有一定的可行性.     

蓝莓 Vco-miR_n10 的克隆及对干旱的响应分析

【目的】MicroRNA（miRNA）是一类内源单链非编码的小分子 RNA,在动植物中参与转录后基因表达调控。Vco-miR_n10 是蓝莓中的新型 miRNA,目前尚未见该 miRNA 功能方面的报道。本研究对蓝莓 VcomiR_n10 进行了初步功能分析。【方法】基于前期蓝莓小 RNA 高通量测序结果,对鉴定到的蓝莓新型 miRNA（Vco-miR_n10）的前体序列（224 nt）进行克隆与测序,并利用 mfold 在线软件对其前体序列的二级结构进行预测。采用 Gateway 系统构建了 35Spro:: pre-Vco-miR_n10 表达载体并转入野生型拟南芥中,对其正常生长及 300mmol/L 甘露醇处理条件下的表型进行观察与分析。【结果】克隆获得了 Vco-miR_n10 的前体序列,该序列能够折叠形成较完美的茎环结构且仅有 2 个错配碱基对。Vco-miR_n10 的成熟体序列位于 3'' 茎臂上。观察正常生长条件下的转基因植株并无显著的表型变化。而在 300 mmol/L 甘露醇模拟的干旱条件下,Vco-miR_n10-24 与 VcomiR_n10-52 的发芽率（33.53%、37.69%）和绿苗率均显著低于野生型（发芽率 67.72%、绿苗率 66.33%）。【结论】蓝莓 Vco-miR_n10 能够响应甘露醇模拟的干旱胁迫,并降低拟南芥对干旱的耐受能力,影响发芽率和绿苗率,说明蓝莓 Vco-miR_n10 可能在植物响应干旱胁迫过程中发挥一定的调控功能。     

lncRNA 基因At3NC026490 启动子克隆与功能分析

lncRNAs是一类长度大于200 nt的非编码RNA,它们通过调控基因表达或直接影响蛋白功能,在植物生长发育与胁迫响应过程中发挥重要作用。At3NC026490是拟南芥中的一个lncRNA,目前尚未见该lncRNA功能方面的报道。从启动子角度对At3NC026490的功能进行探索,首先利用生物信息学手段分析At3NC026490启动子的特性,发现该启动子具有响应光、激素、胁迫等作用元件;随后构建At3NC026490启动子驱动GUS基因的表达载体并转入拟南芥中;GUS染色分析表明转基因株系的根、幼苗、叶等营养组织以及花器官的花瓣具有明显的GUS表型,而在不同发育时期的种子中并未观察到GUS表型,说明该启动子具有典型的组织驱动特性,表明At3NC026490基因可能在应答光、激素、胁迫刺激以及特定组织中发挥作用,该研究为后期深入阐释lncRNA的功能提供了重要信息和研究思路。     

高粱SbJAZ1基因克隆与表达分析

JAZ1基因是编码TIFY家族JAZs蛋白的基因之一。为克隆高粱SbJAZ1基因及研究其响应胁迫表达特性,本试验以高粱品种BTx623为研究材料,提取其总RNA,反转录获得cDNA,以cDNA为模板扩增SbJAZ1基因,并对其进行生物信息学、基因表达和原核表达分析。结果显示,SbJAZ1基因全长606 bp,编码201个氨基酸,蛋白质等电点为7.70,分子量大小为21.15 kDa;SbJAZ1与玉米相应同源基因亲缘关系最近,为亲水性蛋白;二级结构中α螺旋占25.37%、延伸链占9.95%、β转角占4.98%,无规则卷曲占59.70%。qRT-PCR分析表明,SbJAZ1在高粱根、茎、芽和叶组织中均有表达,且具有组织表达特异性,在茎中表达量最高;茉莉酸(JA)处理1 h后,SbJAZ1在高粱茎中表达量最高;吲哚乙酸(IAA)和PEG-6000可诱导SbJAZ1的表达。原核表达结果显示,SbJAZ1在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株诱导表达的最佳条件为:温度30℃,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.8 mmol·L^-1。本研究结果为SbJAZ1基因的生物学功...     

高粱抗病基因SbSGT1的克隆及原核表达

为探究高粱抗病基因SbSGT1的功能,以高粱BTx623为材料,利用RNA反转录得cDNA,以cDNA为模板扩增出全长SbSGT1基因,并对其进行生物信息学分析。进一步构建pET-28a-SbSGT1重组质粒进行原核表达,并分别对表达菌株、诱导温度以及异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导浓度进行了优化。结果表明,SbSGT1全长1 095 bp,编码364个氨基酸,蛋白理论分子大小约为40.45 kDa,蛋白质等电点为5.0。进化树分析表明,SbSGT1与玉米和水稻的亲缘性较高;蛋白质序列分析表明,SbSGT1蛋白为亲水性蛋白,定位在细胞质中;二级结构预测发现其α螺旋和无规则卷曲占比最高,分别达到43.41%和45.88%。原核表达结果表明,SbSGT1最佳表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3),最佳诱导温度和IPTG浓度分别为25℃和0.8 mmol·L^-1。本研究为进一步探究SbSGT1基因在高粱抗病机理中所发挥的生物学功能奠定了基础。