甜蛋白thaumatin基因高效植物表达载体的构建

根据thaumatin氨基酸序列及植物蛋白质表达密码子的偏爱性,设计了thaumatinⅠ的全基因序列引物,采用重叠延伸PCR法,人工合成了thaumatinⅠ全长基因,克隆至载体pMD19-T上,序列测序表明,克隆的DNA序列与原设计序列完全相同,利用表达载体pRI101-ON,构建了高效植物表达载体pRI101-thaumatin。     

农杆菌介导蝴蝶兰的遗传转化研究

采用根癌农杆菌介导法,将ACC合成酶反义基因导入蝴蝶兰原球茎中,比较不同PPT筛选压力、Mer浓度和侵染时间等对蝴蝶兰转化的影响,优化蝴蝶兰的遗传转化体系.结果表明,在OD600值为0.2～0.3的农杆菌菌液中侵染120 min后,放入含有20mg· L-1Mer和2.0 mg·L-PPT的筛选培养基中的原球茎,遗传转化效率最高.     

蝴蝶兰新品种‘郑师朝霞’

‘郑师朝霞’是以内山姑娘（Phalaenopsis Ney Shan Gu Niang）为母本，火鸟（Phalaenopsis Sogo Beach）为父本，进行人工杂交选育出的大花型蝴蝶兰优良品种。花色深紫红，花径11.35 cm，单枝花朵数10.82，花朵排列整齐，花序自然弯曲。适宜温室大棚设施栽培。     

黄瓜新品种‘优NT603’

‘优NT603’黄瓜是利用华北型母本C306-3和华北型父本C406-5，采用传统杂交技术育成的新品种。植株生长势强，果皮墨绿色，瓜码密，畸形瓜少，主蔓结瓜，瓜条长37 cm，口感清脆。抗病强，产量高，栽培产量可达117 000 kg·hm-2，适宜在河南省春季大拱棚和越冬温室栽培。     

甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立

为了快速进行甘薯病毒田间检测和脱毒苗诊断,该研究建立了一个能够同时检测SPCSV、SPLV和SPFMV这3种病毒的多重RT-PCR检测方法。根据GenBank公示的甘薯病毒基因序列来设计3种甘薯病毒的引物,分别对模板浓度、退火温度、Mg2+浓度和循环次数进行优化,同时对模板浓度进行10倍梯度稀释,检测多重RT-PCR灵敏度。结果显示,模板浓度为19 ng/μL、退火温度为52℃、Mg2+浓度为0 mmol/L、循环次数为40次时,可以同时扩增出大小为276 bp、570 bp、425 bp三种病毒的基因片段,多重RT-PCR检测灵敏度为10-4,单一RT-PCR检测灵敏度为10-3,多重RT-PCR检测灵敏度是单一RT-PCR的10倍。该研究使用优化的多重RT-PCR检测技术可获得稳定、灵敏、准确、高效地和同时地检测田间复合侵染的3种甘薯病毒。