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以GenBank登录的鹅源副粘病毒GPMV ZJI株基因组全序列为模板,在HN基因开放阅读框上下游设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增得到HN基因,将目的基因克隆至pET32a表达载体上,转化至BL21中,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达。由结果可知,通过RT-PCR法扩增出HN基因,大小与预期一致。SDS-PAGE和Western-blot均得到预期条带,说明pET32a表达载体在BL21中成功表达了HN蛋白,为后续相关免疫学研究奠定基础。 相似文献
45.
根据鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS1基因序列,设计1对特异性引物,利用PCR方法扩增得到完整的NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a和pET32a上,构建出重组表达质粒pET28a-NS1和pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导得到NS1融合蛋白(His-NS1),其分子质量约分别为44,58 kDa,均在诱导后6 h达到表达量高峰。分析显示,2种融合蛋白均以包涵体形式存在,包涵体经过变性和复性后均可获得单一、高表达量的目的蛋白,为进一步开展关于鹅坦布苏病毒NS1蛋白的研究奠定了基础。 相似文献
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【目的】筛选杏鲍菇母种的最优组织分离部位及其菌丝体最适培养基,为杏鲍菇高产栽培奠定基础。【方法】分别从杏鲍菇的菌盖和菌柄相接处、菌柄中部、菌柄基部3个不同部位各切取约0.5 cm2的内部组织块,接种于PDA斜面培养;将生长的菌丝体在10种不同培养基中纯化复壮后,分别接种到麸皮综合固体培养基和黄豆粉液体培养基中,比较菌丝体的生长状况;将生长最好的菌丝体接种于10个不同培养基中,观察菌丝体的生长状况,筛选杏鲍菇母种最适培养基。【结果】在麸皮综合固体和黄豆粉液体培养基中,从菌柄中部生长的菌丝体明显优于从菌盖和菌柄相接处及菌柄基部,且三者菌丝体之间的日长速差异达显著水平。杏鲍菇母种在培养基A(马铃薯)、B(棉籽皮)、C(麸皮)、D(木屑)、E(黄豆)、G(绿豆)上的生长较好,菌丝体较密、整齐一致、颜色均一,但在C(麸皮)培养基上的生长速度最快,其次是培养基A、B。【结论】菌柄中部为杏鲍菇母种的最佳分离部位,以麸皮煮汁配制的综合培养基是生产杏鲍菇母种的较理想培养基。 相似文献
47.
正久星18号是平顶山市园艺科学研究所最新培育的特抗寒型韭菜新品种。母本95-12-7是桂林大叶韭通过60Co辐射处理,从变异单株中系选的优良株系。父本95-23-5是从久星1号韭菜中系选的优良株系。1998-2005年,通过8年4代的组合、测定,筛选出稳定的优良株系,2005年定名为久星18号。2004年以来,已在河南省郑州、平顶山、周口、安阳、南阳,河北省乐亭,辽宁省辽中,山东省济南,山西省运城,江苏省盐城,广东省湛江等地进行了 相似文献
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为了研究中草药超微粉剂与茶多酚配制的复合添加剂对猪生产性能及猪肉品质的影响,试验选用15kg左右的杜洛克、长白、山西白猪的三元杂交猪后代40头进行试验,随机分为5组,每组8头,分别采用A组中草药超微粉0.75%;B组中草药超微粉0.5%+茶多酚0.25%;C组中草药超微粉0.25%十茶多酚0.5%;D组茶多酚0.75%和E组空白对照,并对各组猪生产性能、常规肉质、背最长肌组织学、肌肉化学成分和猪肉中呈味氨基酸含量及占氨基酸总量的百分比、各种脂肪酸占脂肪酸总量的百分比及胆固醇含量进行了测定。试验结果显示,B组日增重最高为743g;料重比最低为3.02:1;肉色鲜红及大理石纹评分最好;肌肉保水力强,剪切力值最低,为(1.56±0.22);肌纤维密度最大为349.90根/mm2;肌纤维直径最细,为(44.68±9.36)μm;肌大束间距最大,为(101.45±18.17)μm;干物质及脂肪含量最高;且呈味氨基酸和谷氨酸含量最高;并能提高必需饱和脂肪酸的含量,明显降低肌肉和脂肪中胆固醇的含量。这表明B组能显著提高生猪生产性能,改善猪肉风味,提高猪肉食用品质。 相似文献
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根据GenBank中H5、H7、H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)编码基因,使用DNAStar软件比较分析筛选出特异的保守片段,设计3对引物H5-P1/H5-P2、H7-P3/P4和H9-P5/P6。在此基础上,建立了H5、H7、H9亚型禽流感的三重RT-PCR检测方法,本方法可同时检测出样品中的H5、H7、H9亚型禽流感病毒。敏感性试验结果表明,该方法检测H5、H7、H9亚型禽流感RNA的敏感性分别达2.80、10.50、5.73 pg/μL,该方法检测其他相关病毒时均为阴性,具有很高的特异性,此外,该方法具有良好的重复性。利用所建立方法对240份禽流感临床样品进行检测,结果与血凝试验和血凝抑制试验结果的符合率为100%。此诊断方法检出时间早,且特异、敏感、经济、快速,可普遍推广,在禽流感诊断和防制中具有重要意义和应用价值。 相似文献
50.
建立测定有机肥中19种磺胺的液相色谱-串联质谱法。有机肥样品用酸化乙腈超声提取,经无水硫酸镁、PSA、C18净化,涡旋离心后定容,液相色谱-串联质谱法分析19种磺胺。结果表明,添加浓度为20.0~250 μg·kg-1时,有机肥中磺胺添加回收率为73.0%~111.0%,相对标准偏差为0.2%~13.0%;磺胺醋酰、磺胺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺氯哒嗪的检出限为6 μg·kg-1,定量限为20 μg·kg-1;其他15种磺胺类药物的检出限为3 μg·kg-1,定量限为10 μg·kg-1。 相似文献