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抗蚜虫转基因枸杞的初步研究 总被引:13,自引:0,他引:13
选用对蚜虫具有明显抗性的基因-雪花莲外源凝集素酶基因,用宁杞1号的幼叶、幼茎、幼根与携带质粒的农杆菌共培养后,将其转移到含有6-BA0.5MG/l NAA 1mg/L 60mg/L卡那霉素的MS培养基中诱导愈伤组织,10-15d后将诱导产生的愈伤组织转移到含有6-BA0.5mg/L NAA0.01mg/L 60mg/L卡那霉素的MS分化培养基中,培养20-30d,在侵染外植体的愈伤组织上出现小芽,当芽长到1.5-2cm时将其切下转入6-BA0.01mg/L NAA0.2mg/L 30mg/L卡那霉素的MS生根培养基中进一步筛选并使转化体生根,获得完整的抗蚜虫转基因枸杞。将获得的完整植株进行PCR分析检测,发现雪花莲外源凝集素酶基因已经整合到枸杞植株染色体上,片段大约在500Pb,其转化率为65.1%。 相似文献
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以宁夏枸杞主栽品种“宁杞1号”叶片为外植体,通过农杆菌介导的转化方法,将1个改造后的雪花莲凝集素(GNA)基因转入枸杞,以抗性愈伤组织诱导率作为转化效率的粗略指标,对影响转化效率的因素进行了研究,初步建立了转化频率较高的转化系统。对获得的70个转基因株系进行PCR检测,阳性率为60%。运用Western blot杂交检测了两个转化子叶片和果实中GNA的表达,结果表明其中一个转化株系在维管组织成分较高的叶片、青果得到了GNA的表达,而在维管束成分极少的红果未检测到GNA蛋白的表达。 相似文献
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