溶瘤腺病毒修饰间充质干细胞裂解上清对小鼠乳腺癌细胞4T1生物学特性的影响

目的评价溶瘤腺病毒(rAd)修饰间充质干细胞(MSC)裂解上清对小鼠乳腺癌4T1细胞生物学特性的影响。方法采用携带核心蛋白聚糖(DCN)基因的溶瘤腺病毒rAd.DCN和对照病毒rAd.Null感染MSC,命名为MSC.DCN和MSC.Null。感染后48 h,收集MSC.DCN,MSC.Null和MSC的裂解上清,将其与小鼠乳腺癌细胞4T1共培养,同时设4T1细胞对照组,用实时定量PCR法和Western印迹法检测小鼠乳腺癌4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达;通过Dye670标记,用流式细胞术检测4T1细胞增殖;用FITCAnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测4T1细胞凋亡;通过细胞划痕实验检测4T1细胞的迁移能力。结果 MSC.DCN裂解上清处理后,4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达均高于其余2组(P<0.01)。共培养3 d后,与细胞对照组相比,MSC组4T1细胞增殖指数下降(P<0.01);共培养3和5 d后,与MSC组相比,MSC.Null组和MSC.DCN组4T1细胞增殖指数下降(P<0.05),凋亡比例上升(P<0.05);MSC.Null与MSC...     

经筋刺法联合艾灸治疗阳虚型肺癌患者癌性疼痛的临床研究

目的观察经筋刺法联合艾灸治疗阳虚型肺癌患者癌性疼痛的临床疗效。方法将60例中晚期肺癌患者随机分为对照组和治疗组,每组30例。对照组予以三阶梯止痛治疗,治疗组在对照组基础上,予以经筋刺法联合艾灸治疗。两组均以4周为1个治疗周期,观察治疗后两组患者疼痛控制情况、生存质量,并对安全性进行评估。结果与治疗前相比,治疗后两组患者疼痛数字评价量表评分均呈现进行性的下降(P <0. 05)、阳虚证评分均有下降(P <0. 05)、生活质量评分各指标均有上升(P <0. 05);经治疗,治疗组与对照组相比,在疼痛数字评价量表评分、阳虚证评分以及生活质量评分等方面均有显著改善(P <0. 05)。结论经筋刺法联合艾灸能够在一定程度上缓解阳虚型肺癌患者癌性疼痛,并在改善患者阳虚症状以及生存质量方面具有积极作用。     

靶向β-catenin/TCF4相互作用小分子抑制剂荧光偏振高通量筛选模型的建立与应用

基于荧光偏振(fluorescence polarization, FP)原理,建立并应用以β-catenin/TCF4 (T-cell factor 4)相互作用为靶标的小分子抑制剂荧光偏振高通量筛选模型获得苗头化合物。利用大肠杆菌原核表达系统,原核表达和分离纯化重组人β-catenin,以酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)进行生物学活性鉴定。以异硫氰酸荧光素(fluorescence isothiocyanate, FITC)标记的TCF4多肽为荧光探针,通过优化FITC-TCF4与β-catenin反应浓度,建立并应用靶向β-catenin/TCF4相互作用小分子抑制剂荧光偏振高通量筛选模型进行苗头化合物筛选。利用大肠杆菌原核表达系统成功进行了重组人β-catenin原核表达与分离纯化。ELISA实验证实了纯化的重组人β-catenin具有良好的生物学活性。选用20 nmol·L-1FITC-TCF4和100 nmol·L-1β-catenin,成功建立了Z’因子为0.88的荧光偏振高通量筛选模型。应用本筛选模型进...     

术中盐酸利多卡因持续静脉泵注复合氟比洛芬脂对腹腔镜术后疼痛的影响

目的 观察利多卡因术中持续静脉泵注复合氟比洛酚脂对腹腔镜手术的镇痛疗效.方法 80例择期腹腔镜手术患者随机均分为C、F、L、FL组四组.F组予氟比洛芬脂超前镇痛,L组术中利多卡因持续静脉泵注至手术结束拔除气管导管,FL组予复合氟比洛芬脂.利多卡因,剂量、方法同前两组,而C组仅以生理盐水替代.四组均行丙泊酚、雷米芬太尼全凭静脉麻醉维持,术后按需给予哌替啶50 mg肌肉注射镇痛.记录术中血压心率,苏醒即刻、术后0.5、1、2、6和24 h各组VAS评分,及按需哌替啶镇痛次数.结果 四组均术中血压、心率平稳.FL组较C组术后疼痛明显减轻,各时间点VAS评分明显降低;F组、L组较C组,FL组较F组、L组疼痛减轻,多个时间点VAS评分明显降低.结论 静脉注射氟比洛酚脂,术中持续泵注利多卡因在腹腔镜手术中运用均能减轻术后疼痛;两者合用作用更加显著.     

江一平运用中药外敷癌瘤方治疗癌性疼痛经验

总结江一平对癌性疼痛病因病机的见解以及运用中药外敷癌瘤方治疗癌性疼痛的经验。江一平认为痰瘀互结、癌毒壅滞是癌痛的基本病机,癌毒壅滞为病机关键,"痰""瘀""毒"三者贯穿疾病始终,故治疗上以祛痰化瘀、解毒散癌为主要原则,祛瘀化痰为治疗根本,解毒散癌为治疗关键。     

Fabrication of an anion exchange membrane with textured structure for enhanced performance of direct borohydride fuel cells

Developing electrolyte membranes with a simple preparation process and high performance is a top priority for the commercialization of fuel cells. Inspired by solar cell texturing to improve its conversion efficiency, this study prepares a textured membrane by increasing the roughness of a glass plate. The structures of the textured membrane and the flat membrane are characterized and compared. The membranes are assembled in fuel cells for performance testing. The surface area of the textured membrane is 1.27 times that of the flat membrane, which increases the size of the three-phase boundary in fuel cells. The maximum power density of the fuel cell using the textured membrane is 1.17 times of the cell using the flat membrane at 60 °C. The excellent performance of the cell using the textured membrane profit from the enlargement of the three-phase boundary. This work offers a simple way to develop outstanding-performance membranes by changing their surface roughness.

A textured membrane is simply prepared with a rough glass plate, and the improved cell performance benefits from the increased three-phase boundary.     

HMGB2对肺腺癌细胞周期和增殖的影响

目的:探讨高迁移率族蛋白B2(HMGB2)对肺腺癌细胞周期和增殖的影响。方法:从Cancer RNA-Seq Nexus (CRN)数据库分析肺腺癌组织HMGB2表达情况;从OncoLnc数据库分析HMGB2与肺腺癌患者预后的相关性;从肿瘤单细胞数据库(CancerSEA)分析HMGB2与肺腺癌细胞14种功能状态的相关性;利用siRNA技术下调人肺腺癌A549细胞中HMGB2表达,通过real-time PCR和Western blot验证沉默效果,CCK8和EdU实验检测细胞的增殖。结果:HMGB2在肺腺癌中高表达;HMGB2高表达组肺腺癌患者的总生存期明显低于HMGB2低表达患者(log-rank检验P=0.017 3);HMGB2表达与肺腺癌细胞周期和增殖呈正相关;敲减HMGB2表达后A549细胞的活力和增殖能力显著降低(P<0.05)。结论:HMGB2的表达与肺腺癌细胞周期和增殖显著正相关,可以作为潜在的评估肺腺癌患者预后的标志物和治疗靶标。     

舒洛地特通过抑制NOX4/NLRP3通路减轻高糖诱导的视网膜血管损伤

目的:观察舒洛地特(SDX)在糖尿病状态下对视网膜微血管内皮细胞的保护作用。方法:(1)采用高脂喂养及腹腔注射链脲佐菌素的方法构建C57BL/6小鼠的2型糖尿病模型,对小鼠腹腔注射SDX或等体积生理盐水治疗12周。用伊文思蓝法检测视网膜微血管渗漏及微血管密度改变;用Western blot、免疫荧光等方法检测各组小鼠视网膜中NLRP3炎症小体成分、紧密连接蛋白1(ZO-1)及NADPH氧化酶4(NOX4)的表达情况。(2)用高糖处理人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs),并与梯度浓度的SDX共处理;用腺病毒感染HRMECs以过表达NOX4或者用siRNA转染HRMECs以敲减NOX4,观察NLRP3炎症小体成分、NOX4、ZO-1和VE-钙黏着蛋白(VE-Cad)的表达情况,以及活性氧簇(ROS)的生成情况。结果:(1)SDX处理增加糖尿病小鼠视网膜中ZO-1蛋白的表达,抑制糖尿病小鼠视网膜微血管渗漏,增加糖尿病小鼠视网膜微血管密度和节细胞数量,并抑制NLRP3炎症小体的活化(P<0. 05)。(2)在高糖刺激的HRMECs中,SDX处理增加ZO-1和VE-Cad蛋白的表达,显著...     

MCU在高糖诱导心肌H9c2细胞凋亡中的作用机制

目的:探讨线粒体钙离子单向转运体(mitochondrial calcium uniporter, MCU)在高糖(high glucose, HG)诱导心肌H9c2细胞凋亡中的作用机制。方法:将心肌H9c2细胞随机分为3组:对照(control)组,5.5 mmol/L葡萄糖处理细胞;HG组,25 mmol/L葡萄糖处理细胞;精胺(spermine,Sp)干预(HG+Sp)组,25 mmol/L葡萄糖和5μmol/L Sp共同处理细胞。Western blot检测H9c2细胞MCU、caspase-9和caspase-3蛋白的表达;RT-qPCR检测H9c2细胞MCU的mRNA水平;Rhod-2 AM探针检测线粒体内Ca²⁺的荧光强度;吸光度法检测丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase, PDH)的活性;萤火虫萤光素酶检测细胞裂解液ATP的浓度;JC-1染色法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,Δψ_m);MitoSOX^TM染色法检测线粒体活性氧簇(re...