Aurora激酶A在三阴性乳腺癌中的表达及与临床病理特征的相关性

目的探讨Aurora激酶A在三阴性乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组织化学法检测137例三阴性乳腺癌及132例非三阴性乳腺癌患者Aurora激酶A的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果Aurora激酶A在三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌组织的阳性率分别为73.7%和46.2%,差异有统计学意义,在三阴性乳腺癌中Aurora激酶A表达与组织分级、淋巴结转移状况、5年无病生存有关,而在132例非三阴性乳腺癌中Aurora激酶A表达仅与血管内皮生长因子(VEGF)和淋巴结转移相关。结论在三阴性乳腺癌中,Aurora激酶A呈高表达。Cox多因素分析中,Aurora激酶A高表达与三阴性乳腺癌患者5年无病生存具有相关性。     

黄芪甲苷逆转耐药肝癌细胞株HepG2/GCS多药耐药的研究

目的探讨黄芪甲苷对耐药肝癌细胞株HepG2/GCS多药耐药的逆转作用及可能机制。方法以噻唑蓝(MTT)法测定黄芪甲苷的细胞毒作用和处理前后肝癌细胞对阿霉素的敏感性变化,通过Westernblot法检测细胞GCS蛋白的表达。结果黄芪甲苷在实验浓度范围内对HepG2、HepG2/GCS细胞均无明显毒性;浓度为40μg/ml的黄芪甲苷可逆转HepG2/GCS细胞对阿霉素的耐药性,逆转倍数为1.50,同时细胞内GCS蛋白的表达下降。结论黄芪甲苷具有逆转HepG2/GCS细胞多药耐药的作用,可能与下调细胞内GCS基因表达有关。     

免疫抑制剂FTY720对Hepa1-6肝癌细胞抑制作用的体外研究

目的探讨免疫抑制剂FTY720对小鼠肝癌细胞Hepa1-6的影响。方法培养小鼠Hepa1-6肝癌细胞,将其分为对照组及0．1、1、10、100μg／ml质量浓度组,处理24h及48h。采用MTT法检测细胞增生,流式细胞术测定细胞周期及细胞凋亡。结果小鼠肝癌细胞增生能力在FTY720作用48h后明显受抑,最大抑制率为62．10％;FTY720对肝癌细胞有促进凋亡作用,在1．0～100．0μg／ml质量浓度范围内,凋亡率随药物浓度增加而增加,分别为：4．07％、8．16％、19．84％;FTY720使G1期显著延长。结论FTY720对肝癌细胞的增生有抑制作用,能使G1期阻滞,促进细胞凋亡。     

粘附分子在肝脏保存再灌注损伤中的作用

肝脏保存再灌注损伤 (ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｒｅｐｅｒｆｕｓｏｎｉｎｊｕｒｅ)是肝移植不可避免的病理、生理过程 ,是引起术后原发性移植物无功能 (ｐｒｉｍａｒｙｇｒａｆｔｎｏｎｆｕｎｃｔｉｏｎ) ,导致肝移植失败的重要原因[1,2 ] ;因而一直是肝移植领域的研究难题。近年来 ,对粘附分子(ａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅｓ)的研究表明 ,粘附分子参与和介导了白细胞 (主要是中性粒细胞ＰＭＮ)与肝窦内皮细胞及肝细胞的粘附过程 ,在肝脏保存再灌注损伤中发挥重要作用。现就此领域的研究进展综述如下。1　粘附分子的种类、结构、功能…     

全肠内营养在急性重症胰腺炎胰腺坏死性感染的作用分析

目的 评价全肠内营养在重症胰腺炎胰腺坏死性感染中的作用.方法 选择60例确诊为重症胰腺炎入住ICU的患者作为观察对象,采用随机数表法将患者分为2组,各30例.观察组采用全肠内营养联合抗生素治疗,对照组采用全肠外营养联合抗生素治疗,观察2组患者外科干预情况及胰腺感染坏死类型、病死率等情况.结果 观察组手术干预、再手术患者比例(36.67％)及手术出血量(80±10)mL低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);观察组从发病到手术时间(25.9±2.1)d较对照组长,差异有统计学意义(P＜0.05);2组在手术持续时间方面差异无统计学意义;观察组主要以无菌性坏死为主,对照组以感染性坏死为主,差异有统计学意义(P＜0.05);观察组病死率为13.33％,对照组为36.67％,差异有统计学意义(P＜0.05);观察组并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重症急性胰腺炎坏死性感染患者应优先进行全肠内营养,效果较好.     

低浓度胆酸上调JNK蛋白表达:可促进肝细胞DNA的合成?

背景:胆汁酸在生理情况下对脂类物质的消化吸收和胆固醇代谢发挥着重要作用,超负荷的胆汁酸能够导致肝细胞的凋亡与坏死,而有关低浓度的胆汁酸对肝细胞增殖有何影响研究较少.目的:探索低浓度胆酸对大鼠肝细胞增殖和JNK,p38-MAPK蛋白表达的影响.方法:原代培养Wistar大鼠肝细胞48 h,更换含有0,10,20,40和80 μmol/L胆酸的培养液继续培养12 h,MTT法检测肝细胞存活率;流式细胞仪检测细胞周期,计算肝细胞S期的相对百分比;免疫印迹技术检测JNK和p38-MAPK的蛋白表达.结果与结论:浓度为40 μmol/L以下的胆酸对肝细胞的存活率和肝细胞p38-MAPK蛋白表达无显著影响,但使肝细胞S期细胞比例和肝细胞JNK蛋白表达量显著升高(P<0.05,P<0.01);80 μmol/L的胆酸使肝细胞存活率、肝细胞S期细胞比例、JNK表达量则显著下降(P<0.01),而使p38-MAPK蛋白表达显著上升(P<0.01).因此,认为低浓度的胆酸可促进肝细胞DNA的合成,可能与上调JNK蛋白表达有关.     

GCS基因与MDR1基因在肝癌细胞多药耐药中的相关性研究

目的观察葡萄糖神经酰胺合酶(GCS)基因高表达对肝癌细胞HepG2内多药耐药基因(MDR1)表达的影响,探讨GCS基因参与肝癌多药耐药的作用机制。方法脂质体法将GCS基因真核表达质粒pEGFP-GCS导入肝癌细胞株HepG2中,应用G418筛选培养,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞GCS mRNA和MDR1 mRNA的表达,蛋白印迹法检测细胞GCS蛋白和P-糖蛋白(P-gp)的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测基因转染前后阿霉素对HepG2细胞半数抑制浓度(IC50)的变化。结果转染后HepG2细胞内GCSmRNA和蛋白的表达水平显著提高(P<0.05),而MDR1mRNA及P-gp的表达水平亦显著提高(P<0.05);同时,MTT法检测结果显示GCS基因转染后HepG2细胞对阿霉素的耐药性显著提高(P<0.05),IC50从(6.2±0.4)μg/ml上升到(11.6±1.0)μg/ml。结论高表达GCS可以上调HepG2细胞中MDR1的表达,使HepG2细胞发生多药耐药。     

索拉菲尼对肝癌细胞的抑制作用及其对CDK5表达水平的影响

目的探讨索拉菲尼对体外培养的人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用及其对周期素依赖性蛋白激酶5表达的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞株,采用MTT法检测不同浓度索拉菲尼对HepG2细胞增殖的影响;同时经细胞爬片后,采用免疫细胞化学法检测肝癌细胞内CDK5的表达情况。结果索拉菲尼可使人肝癌细胞增殖率明显下降,且呈明显的时间-剂量依赖效应;药物作用48h后,给药组CDK5的表达较对照组明显减少,其着色程度随药物浓度增高而逐渐变淡。结论索拉菲尼对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用,并能下调肝癌细胞中CDK5的表达,从而起到抗肿瘤的治疗作用。     

CTLA4-Ig对肝细胞移植大鼠免疫耐受的作用及其机制

目的 探讨细胞毒性淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA4-Ig)诱导肝细胞移植大鼠免疫耐受的作用及机制.方法 10%D-氨基半乳糖(D-gal)一次性腹腔注射建立大鼠急性药物性肝衰竭模型;采用肝脏原位灌注法分离纯化肝细胞,经脾脏移植后随机分为两组.实验组腹腔一次性注射CTLA4-Ig,对照组不予处理.两组均分别于术后第1、3、5、7天采外周血观察白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)及肝功能变化;术后1周测两组大鼠外周血T细胞亚群,处死大鼠后取脾脏苏木素-伊红(HE)染色.结果 实验组谷丙转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TBil)于术后第7天分别为(6.5±7.3)IU/ml、(5.1±1.6)mmol/L,低于对照组.术后治疗组IL-2含量明显下降,第7天达到(1. 3138±0.8508)ng/L,两组差异有统计学意义(P＜0.05);术后TNF含量两组之间差异无统计学差异(P＞0.05).外周血CD4+T细胞、CD4+/CD8+T细胞实验组分别为(37.3±7.2)%、(1.5±0.1)%,低于对照组(P＜0.05),CD8+T细胞两组差异无统计学意义(P＞0.05).术后第7天治疗组脾内仍可见肝细胞或肝细胞团,对照组见大量淋巴细胞浸润,但很少见肝细胞.结论 CTLA4-Ig能诱导经脾同种异体肝细胞移植大鼠免疫耐受,使急性肝衰大鼠肝功能得到改善.可能是抑制T淋巴细胞亚群,且主要是抑制CD4+T细胞,使CD4+/CD8+T细胞比值下降;抑制IL-2的分泌.

Abstract：

Objective To investigate the immunosuppressive effect of cytotoxic T Iymphocyte associated antigen 4 Ig fusion protein (CTLA4-Ig) in rat allograft hepatocyte transplantation model and the mechanisms. Methods Acute liver failure (ALF) model was established by intraperitoneal injection of 10% D-gal solution to SD rates. Collagenase perfusion was performed on SD rats to separate liver cells. SD rats with ALF were subjected to intrasplenic hepatocyte transplantation and randomly divided into two groups. The experimental group received intraperitoneal injection of CTLA4-Ig. The concentrations of interleukin (IL)-2 and tumor necrosis factor (TNF), liver function and histologicy were observed at the 1st,3rd, 5th, 7th day after operation and the T lymphocyte subsets were detected by using immunohistochemistry at the 7th day after operation. Results The levels of ALT and TBil were respectively (6. 5 ±7.3) IU/ml and (5.1 ± 1.6) mmol/L at the 7th day after operation and significantly decreased after injection of CTLA4-Ig ( P ＜ 0. 01 ). IL-2 concentration in the experimental group was ( 1.3138 ± 0. 8508 ) ng/L at the 7th day after operation and significantly decreased (P ＜0. 05). TNF had no significant difference between two groups after operation ( P ＞ 0. 05 ). T lymphocyte subsets, mainly CD4 + , in the experimental group was significantly decreased as compared with control group ( P ＜ 0. 05 ), so did the CD4 +/CD8 +. Histological changes: At the 7th day after operation, there were some hepatocytes in the spleen of the experimental group. But in the control group, the changes in the spleen were characterized by severe lymphocyte infiltration. There were no hepatocytes both groups. Conclusion CTLA4-Ig can induce rat allogeneic hepatocytes intrasplenic transplantation immune tolerance. It may improve the liver function of rats with ALF.CTLA4-Ig can decrease T lymphocyte subsets, mainly CD4 + and concentrations of IL-2.