大鼠坐骨神经切断后Src抑制的蛋白激酶C的底物的表达变化

目的 探讨大鼠坐骨神经切断后,Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)在神经中的表达变化及其意义.方法 制备成年SD大鼠坐骨神经切断模型.通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经切断后SSeCKS表达的时空变化.结果 Western blotting显示,大鼠坐骨神经切断后,近端SSeCKS的表达逐步升高,伤后2d达到高峰,之后逐渐下降.远端SSeCKS表达于12h达到高峰,之后呈下降趋势.免疫组织化学方法结果表明,SSeCKS在神经断端处高表达,成簇状聚集;在远离断端处表达明显降低,分布亦较为均一.免疫荧光双标记结果显示,SSeCKS与S100、NF200及GAP43有部分共定位.结论 大鼠坐骨神经切断后,可以引起SSeCKS的表达变化,其可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导,并与损伤后神经的再生及功能修复有关.     

培养细胞的冷冻保存和解决复苏的操作方法

细胞培养技术自 190 7年Ｈａｒｒｉｓｏｎ开创以来 ,历经一个世纪现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。在细胞培养技术广泛用于科学研究领域的今天 ,细胞株的收集、培养、保存、分装、冷冻保存和解冻复苏这一基础技术日益得到重视。本文就培养细胞的冷冻保存和解冻复苏技术的工作体会作一介绍。1　培养细胞的保存冷冻保存培养细胞时 ,必须加入保护剂 ,否则细胞内外的水分会很快形成冰晶 ,细胞内冰晶的形成使细胞内部空间结构配布紊乱 ,蛋白质变性 ,溶酶体膜损伤 ,酶被释放破坏细胞内结构成分 ,细胞膜通透性增强 ,细胞内容物丧失 ,…     

基层医院直肠癌腹腔镜下和开腹Miles手术的临床对照研究

作者2004年2月-2006年12月应用腹腔镜Miles手术治疗直肠癌12例,均取得良好效果,同期行开腹Miles手术14例,现对比分析如下。1临床资料腹腔镜组12例,男5例,女7例,年龄35-66岁,平均57岁。其中Duke′s A期4例,Duke′sB期5例;Duke′s C1期2例;Duke′s C2期1例。开腹手术组14例,男8例,女6例,年龄44-68岁,平均58岁。其中Duke′s A期2例,Duke′s B期5例;Duke′s C1期4例;Duke′s C2期3例。术前常规行肛门指检、钡灌肠和结肠镜检查了解肿瘤大小及部位。肿瘤下缘离肛门2-4厘米,均经过病理检查诊断为直肠癌。手术方法:患者取改良截石位,导尿,腹…     

甲状腺微小病变的超声检查及诊断作用研究

目的：探讨超声检查甲状腺微小病变患者的诊断作用与应用价值。方法：筛选2018年6月～2019年6月本院收治的100例甲状腺微小病变患者为研究对象,经手术病理确诊,对患者开展超声检查,观察患者超声诊断结果与显像分级情况,观察影像学资料。结果：100例甲状腺微小病变患者开展超声检查(均已手术病理确诊,其中恶性76例,良性24例),超声检测结果检出恶性患者77例,良性患者23例,1例假良性(漏诊),2例假恶性(误诊),超声诊断诊断符合率97.00%、灵敏度98.68%、特异度91.67%,相比手术病理诊断结果无统计学意义(P>0.05);显示血流情况,良性病变24例(Ⅰ型15例、Ⅱ型6例、Ⅲ型3例),恶性病变76例(Ⅰ型8例、Ⅱ型28例、Ⅲ型40例)。超声诊断甲状腺微小病变患者的影像学资料特征较为明显,可清晰观察患者病灶部位情况,诊断病症。结论：超声诊断甲状腺微小病变价值较高,可获得清晰的影像学资料,对患者的病灶部位、良性恶性类型、病灶大小等情况观察,为患者病症诊断提供准确的参考,临床应用价值较高。     

闭胸法制备急性冬眠心肌动物模型的实验研究

目的探讨闭胸法制备急性冬眠心肌动物模型的可行性及冠状动脉血流动力学特点，为冬眠心肌的研究提供合适模型。方法13只小型中国家猪，以右冠状动脉为靶血管，以冠状动脉内多普勒导丝为导引钢丝，采用闭胸介入法将球囊导入靶血管，通过球囊扩张造成冠状动脉严蕈狭窄（≥90％），观测模型制备前后冠状动脉狭窄程度、心肌梗死溶栓治疗临床试验（thrombolysis in myocardial infarction，TIMI）血流分级、窜擘运动、冠状动脉血流动力学指标的变化情况；处死实验动物，行三硝基四氮唑红（triphenyhetrazolium chloride，TTC）心肌大体染色及光镜检查，观察心肌细胞的病理改变。结要10只动物完成实验研究，冠状动脉狭窄程度均≥90％，TIMI血流分级均≤Ⅱ级，左心室共有55个节段发生节段性室壁运动障碍，狭窄冠状动脉远端的平均峰值流速、舒张收缩流速比值、冠状动脉血流速度储备均明显降低，TTC大体染色未示心肌坏死灶，光镜仅示核周肿胀和毛细血管充血、扩张等改变，表明模型制备成功。结论闭胸法制备急性冬眠心肌模型效果确切，安全可行，动物死亡率低，优于传统的开胸法，有较好的应用前景。模型相关冠状动脉的血流动力学指标明显降低，可作为判断模型成功的标准之一。     

拇指桡背侧筋膜蒂皮瓣修复甲床缺损

目的 探讨拇指桡背侧筋膜蒂皮瓣修复甲床缺损的临床疗效.方法 2010年3月~2012年10月,对拇指甲床损伤采用桡背侧筋膜蒂皮瓣急诊修复8例,延期修复4例.以拇指背侧指间关节及掌指关节中点连线和拇指桡侧中线之间的中线为轴心线,在拇指桡背侧设计皮瓣,切取皮瓣面积2.0 cm×1.8 cm～3.0 cm×2.5 cm.结果 12例皮瓣均成活,其中2例出现静脉危像,经及时处理症状消失.术后随访3～10 个月,拇指外形良好,皮瓣质地软,不臃肿,类似指甲;其中进行了神经吻合的皮瓣两点分辨觉6～10 mm.按中华医学会手外科分会标准评定,手功能达优10例、良2例.结论 应用拇指桡背侧筋膜蒂皮瓣修复甲床缺损,手术成功率高、操作简单、疗效肯定,建议临床推广.     

腹腔镜下回肠直肠侧侧吻合术治疗顽固性结肠慢传输型便秘的效果

目的：观察腹腔镜回肠直肠侧侧吻合术治疗顽固性结肠慢传输型便秘（CSTC）的效果。方法选择符合标准的 CTC 患者15例,行腹腔镜回肠直肠侧侧吻合术。观察指标包括：手术相关指标（手术时间、出血量、首次排气排便时间、术后进食时间、术后并发症）,术前、术后3个月患者排便次数。结果15例患者均成功施行手术,无并发症发生。术后第2天进流食,平均（2.0±0.54）d 排气,（3.1±0.41）d 排便。术后随访3个月,患者便秘症状指标明显改善,均达到治愈标准。结论回肠直肠侧侧吻合术治疗 CSTC 近期效果满意,远期效果尚待观察。     

应用等位基因特异性PCR检测胆固醇酯转运蛋白基因突变

目的:建立检测胆固醇酯转运蛋白(cholesterol ester transfer protein,CETP)基因6种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法:应用针对CETP基因TaqIB(G→A)、I405V(A→G)、D442G(A→G)、R451Q(G→A)、A373P(G→C)和I14A(G→A)这6种常见的突变位点设计的等位基因特异性PCR技术,对海南汉、黎族人群中CETP基因突变类型进行了检测,同时对经上述等位基因特异性PCR检测的样本进行序列测定。结果:在海南汉、黎族人群中,TaqIB(G→A)突变位点可检测出GG、GA、AA3种基因型,I405V(A→G)突变位点可检测出AA、AG、GG3种基因型,D442G(A→G)突变位点可检测出AA、AG2种基因型,但在海南汉、黎族人群中未检测到R451Q(G→A)、A373P(G→C)和I14A(G→A)3种突变类型,用等位基因特异性PCR鉴定的CETP基因突变的基因分型结果与序列测定结果完全符合。结论:等位基因特异性PCR技术操作简便,重复性和稳定性好,可作为鉴定CETP基因突变类型的可行方法。     

尿酸上调心脏成纤维细胞骨桥蛋白表达促使细胞增殖及胶原蛋白分泌

目的 探究不同浓度尿酸刺激对成纤维细胞骨桥蛋白(OPN)表达及细胞增殖、凋亡、胶原蛋白分泌的作用.方法 培养原代人心脏成纤维细胞(HCF);按照不同尿酸刺激浓度对HCF进行分组:尿酸0、5、10和15 mg/dl组;刺激48 h后进行以下实验:定量聚合酶链反应(qPCR)检测OPN、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Co...     

多重定量荧光PCR在21-三体及性染色体多倍体畸变诊断中的应用

目的探讨多重定量荧光PCR(QF-PCR)技术在染色体非整倍体畸变诊断中的应用价值。方法抽取脐血样本16份,羊水样本73份,21、X、Y染色体数目异常患者及其父母外周静脉血71份,针对21号染色体和X、Y染色体上7个基因位点21S1435、D21S11、D21S1411、AMXY、DXS981、DXS6809和X22应用QF-PCR方法进行多重扩增,毛细管电泳法检测并分析结果。所有样本同时进行染色体核型分析。结果染色体核型分析中有129例为正常核型46,XX(XY);26例21-三体(其中1例为易位型,余为标准型);1例45,XO/46,XX;2例47,XXX;1例47,XXY;1例45,XX,der(13,21)。QF-PCR结果中,确诊1例47,XXY,26例21-三体征中23例确诊,2例47,XXX被提示可能存在性染色体数目异常,其余为阴性结果。结论多重定量荧光技术可用于染色体非整倍体畸变的快速诊断。