蛛网膜下腔应用Ro 25-6981对神经病理痛大鼠的镇痛作用及其电生理学机制研究

目的:研究蛛网膜下腔应用Ro 25-6981,一种选择性的NMDA受体NR2B亚基(NR2B)的拮抗剂,对神经病理痛大鼠的镇痛作用及其可能的机制。方法:(1)雄性SD大鼠蛛网膜下腔置管,手术成功后进行L5脊神经结扎(SNL)手术。术后7天用vonFrey纤维丝测定机械痛敏,筛选出造模成功的SNL神经病理痛大鼠,随机分为三组,通过蛛网膜下腔插管分别鞘内给予(i.t.)Ro25-698110.0μg(20μl)、100.0μg(20μl),或等体积的生理盐水作对照。在给药后第30min、60min、90min和120min测定大鼠后爪的50%缩足阈值(PWT)及鞘内给药前后大鼠的运动功能。(2)通过在体细胞外记录的电生理学方法,观察脊髓背表面给予Ro 25-6981100.0μg对大鼠脊髓背角广动力范围(WDR)神经元放电的影响。结果:(1)与生理盐水组相比,鞘内应用Ro 25-698110.0μg对SNL大鼠的50%PWT和机械痛敏翻转百分率(%MPE)没有明显的影响(P>0.05,n=8),而100.0μg却能显著增加SNL大鼠的50%PWT和%MPE,起到明显的镇痛作用(P<0.05,n=8),并且在上述两种剂量下鞘内给药前后,动物的运动功能没有出现显著改变(P>0.05);(2)与生理盐水组相比,脊髓背表面给予Ro 25-6981100.0μg对WDR神经元的Aβ纤维诱发放电没有显著影响(P>0.05,n=6),但是可以显著抑制C纤维诱发放电(P<0.05,n=6)。结论:鞘内应用选择性的NR2B拮抗剂Ro 25-6981100.0μg可以对SNL大鼠产生明显的镇痛作用,而不影响动物的运动功能;这种镇痛作用可能是通过拮抗脊髓背角的NMDA受体NR2B亚基,进而抑制WDR神经元的C纤维诱发放电所产生的。     

血管内皮生长因子对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的　探讨静脉应用血管内皮生长因子 (VEGF)对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白P5 3、Fas、Bax和Bcl 2表达的影响。　方法　 3 3只雄性SD大鼠结扎左冠状动脉后 2 4h随机接受VEGF16 5 肝素 (治疗组 )或肝素 生理盐水 (对照组 )治疗。VEGF16 5(2 μg/1ml)加肝素 (5 0U)或肝素 生理盐水 (5 0U/1ml)每天经尾静脉注射 ,共用 7d(治疗组 8只 ,对照组 10只 )和 14d(治疗组 7只 ,对照组 8只 )。于结扎后第 9天和第 16天测定心肌细胞凋亡指数、心肌组织P5 3、Fas、Bax和Bcl 2蛋白的表达。　结果　治疗组的心肌细胞凋亡数量明显少于对照组〔第 9天 :(10± 2 ) %比 (2 8±2 ) % ,P <0 0 1;第 16天 :(6± 2 ) %比 (12± 2 ) % ,P <0 0 5〕 ,VEGF抑制P5 3、Fas和Bax的表达 ,促进Bcl 2的表达。　结论　每天静脉应用VEGF 14d可减少心肌细胞凋亡 ,抑制P5 3、Fas和Bax的表达 ,促进Bcl 2的表达     

不同体外环境下舌癌干细胞标志CD44及ESA和CXCR4的表达

背景：细胞生存的微环境与蛋白的表达密切相关,在不同的环境中癌干细胞标志的表达可能存在差异。目的：探讨癌干细胞标志CD44、ESA、CXCR4的表达是否会在不同的细胞生存环境中发生改变。方法：选取舌癌TCA8113细胞系,分别建立干细胞培养基、常规标准培养基以及在标准培养基中添加阿霉素的3种体外培养微环境,采用免疫组化及流式细胞术,检测不同培养环境中3种标志在舌癌细胞中的表达。结果与结论：免疫组化法检测显示,在所有培养环境中CD44、ESA强阳性表达,CXCR4在干细胞培养基环境中弱阳性表达,其余为阳性表达;流式细胞术检测CD44与ESA在所有培养环境中均高水平表达;与常规标准培养基环境比较,在干细胞培养基的微环境中CXCR4极低水平表达,将舌癌细胞从干细胞培养基转回常规标准培养基后,CXCR4的表达回升;在阿霉素干预的培养环境中,CXCR4表达水平升高。结果表明舌癌干细胞标志在不同体外微环境下的表达存在差异,需结合体内环境与肿瘤组织的表达情况来寻找癌干细胞标志。并且不同微环境模式可能富集不同性质的癌干细胞。     

脊神经结扎神经痛大鼠脊髓背角广动力范围神经元的电生理学特性(英文)

目的探讨腰5脊神经结扎(spinal nerve ligation, SNL)后,大鼠脊髓背角的广动力范围(wide dynamic range,WDR)神经元电生理学特性的改变。方法将健康雄性 Sprague-Dawley 大鼠分为正常组和 SNL 组,利用细胞外电生理学方法记录脊髓背角的 WDR 神经元放电。结果与正常大鼠相比,SNL 组大鼠 WDR 神经元兴奋性增加,表现为感受野扩大、有自发放电的神经元比例增加,以及 C 纤维诱发放电的阈值降低、潜伏期缩短、发放时程增加。此外,SNL组大鼠WDR神经元A和C纤维诱发放电数目较正常大鼠降低。结论大鼠腰5脊神经结扎后主要引起WDR神经元的兴奋性增加。WDR神经元的兴奋性增加可能参与神经病理痛的发生。     

人类黑色素细胞瘤永生化细胞系的建立及生物学特性鉴定

目的 建立黑色素细胞瘤细胞系并研究其生物学特性.方法 取脑膜黑色素细胞瘤组织原代与传代培养,建立永生化细胞系并检测生物学特性,采用HE染色法、倒置显微镜与透射电子显微镜观察细胞形态及超微结构,采用细胞计数法绘制生长曲线与计算倍增时间,观察细胞染色体核型(染色体显带法)与动物成瘤性,采用SP免疫组织化学法检测Vimentin、S100、HMB45和CK蛋白表达.结果 临床病理诊断为颅内原发黑色素细胞瘤,建立的黑色素细胞瘤细胞系呈上皮样细胞生长方式,胞内有黑色素颗粒,可见细胞克隆集落;透射电子显微镜见黑色素小体,倍增时间36 h,染色体数量32～110条,细胞系裸鼠皮下移植瘤实验提示未成瘤,且免疫组织化学法染色发现细胞系表达Vimentin为阳性,HMB45、S100、CK为阴性.结论 成功建立了黑色素细胞瘤细胞系,有良性肿瘤生物学行为特征.     

定向与非定向皮肤扩张的临床应用及组织学改变

背景：研究表明皮肤扩张术应用逐渐广泛,但非定向、定向扩张器扩张后皮瓣回缩趋势及对基底压迫影响至今少有报道。目的：通过比较非定向、定向扩张器扩张后皮瓣回缩趋势,观察其疗效,评价定向扩张器临床应用的安全性及有效性。方法：对应用皮肤扩张术治疗面颈部病灶的患者126例进行回顾性分析,比较非定向、定向扩张的临床效果及并发症的差异,观察非定向、定向两种扩张方法的皮肤组织学改变。结果与结论：两种扩张方式使扩张器表面皮肤表皮细胞及纤维包膜组织增殖;部分成纤维细胞在真皮层可转化为具有收缩功能的肌成纤维细胞。定向扩张组相对于非定向扩张组具有扩张时间短、扩张次数少、疗效好等优点。两种扩张术对皮肤软组织的病理组织结构改变相似,未发现定向扩张术因单向扩张对皮肤软组织造成更严重损伤及扩张越快挛缩越严重的病理组织学表现。结果提示,临床中定向扩张器相对于非定向扩张器扩张效率高、对基底压迫小、疗程短,是一种安全、有效的修复面颈部体表病变的治疗方法。     

大鼠牙髓干细胞的分离培养与鉴定

目的:分离培养大鼠牙髓干细胞并对其进行生物学鉴定.方法:采用酶消化法分离获得大鼠牙髓干细胞,有限稀释法纯化细胞,测定细胞克隆形成率,细胞计数法测生长曲线,抗波形丝蛋白及角蛋白、抗STRO-1免疫化学染色.体外分化诱导实验检测细胞的多向分化能力.结果:分离纯化获得的大鼠牙髓干细胞在体外具有一定的克隆形成能力,波形丝蛋白、STRO-1均有表达.诱导条件下部分牙髓干细胞具有多向分化的潜力,符合干细胞特征.结论:成功从大鼠牙髓中获取牙髓干细胞.     

舌癌转移淋巴结中舌癌细胞耐药性的实验研究

目的:观察舌癌淋巴结转移模型中舌癌细胞耐药特性,探讨舌癌转移与耐药相关性。方法:在建立舌癌淋巴结转移模型的基础上,取淋巴结转移的舌癌细胞进行HE染色与免疫组化检测P-gp和LRP耐药相关蛋白,并分离纯化其细胞进行耐药特性检测,包括半数抑制浓度(IC50)、耐药倍数(re-sistance index,RI)与细胞内多柔比星荧光强度。结果:转移淋巴结中舌癌细胞表达P-gp和LRP蛋白,其分离纯化的子代细胞对多柔比星IC50为(1.86±0.026)μg/mL,对照的亲本(Tca8113)舌癌细胞IC50为(0.26±0.005)μg/mL,RI为7.15;进一步检测淋巴结转移舌癌细胞内多柔比星浓度,其多柔比星荧光强度为6.13±2.48,明显低于亲本Tca8113舌癌细胞的12.36±3.59,P<0.05。结论:淋巴结转移的舌癌细胞有一定的耐药特性。     

肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物发光法(ATP-TCA)检测技术在化疗中的应用

肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物发光法(ATP-TCA),是近年发展起来的针对恶性实体肿瘤有较高可评估率的新方法.ATP-TCA法的检测原理:由于ATP是活细胞最基本的能量来源,其水平与活细胞数呈正相关线性关系.用荧光素一荧光素酶试验定量测定细胞内源性ATP的含量,荧光酶在有氧条件下,可以和底物结合后催化ATP转变成ADP,并且释放出荧光(波长562 mm).