糖尿病足辨证分型与病理学相关性研究

[目的]探讨糖尿病足中医辨证分型与截肢标本病理组织学之间的关系。[方法]对32例截肢的糖尿病足患者按中医辨证分为气血两虚瘀阻证、脉络血瘀证、脉络瘀热证、脉络热毒证和气阴两虚瘀阻证,分别对截肢肢体进行病理形态学观察、分析。[结果]在32例截肢标本中,中动脉的病理学改变明显,各证型间病变具有显著性差异;微小动脉、神经和肌肉病理学改变各证型间差异不显著。其中脉络热毒证和气阴两虚瘀阻证以动脉粥样硬化和炎性改变为主,气血两虚瘀阻证和脉络瘀热证则以中膜钙化、平滑肌细胞萎缩、变性、坏死及胶原纤维增多及内膜粥样斑块形成为主。[结论]糖尿病足中医辨证分型与病理形态学变化及病变特点具有较高的相关性。     

心复康对大鼠实验性心肌梗死形态学及体外培养乳鼠心肌细胞超微结构的影响

用结扎大工冠状劝脉前降支的方法造成心肌梗死病变模型,给予中药心复康后对其病理形态的改变进行观测,结果显示可使实验性心肌梗死大鼠经程度减轻,便 死后修复增忆,采用体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞,通过暂时停止供应心肌生存必需的糖和氧,造成心肌细胞缺氧样损伤,从细胞水平观察心复康的作用,结果表明可明显心肌细胞结构缺血样损伤,提示心复康对心肌梗死具有防治作用。     

心复康对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧损伤酶及超微结构影响的实验研究

目的:观察心复康对心肌细胞缺血样损伤的保护作用,探讨其保护机理。方法:采用培养的大白鼠乳鼠心肌细胞,通过暂时停止供应心肌细胞生存必需的糖和氧,造成心肌细胞缺血样损伤,观察心复康对体外培养心肌细胞心肌酶及超微结构的影响。结果:心复康可明显降低培养液中心肌酶的活性,改善心肌结构的缺血样损伤。结论:心复康对心肌细胞的缺血样损伤具有保护作用。     

红芪多糖对培养人血管内皮细胞的影响

目的:观察红芪多糖对培养人血管内皮细胞的影响。方法:采用酶消化法,体外培养胎儿脐静脉血管内皮细胞,观察红芪多糖对内皮细胞在正常、高脂血清不同培养条件下的影响。结果:红芪多糖在正常和2％高脂血清培养条件下均有降低细胞内过氧化脂质含量、提高超氧化物歧化酶活力的作用(P<0.01);但当高脂血清浓度达5％时,此作用丧失。对内皮细胞孵育液中前列环素无显著影响,对血栓素 B_2在不同培养条件下均有降低作用(P<0.05),起到提高前列环素与血栓素 B_2比值的作用。结论:红芪多糖对内皮细胞有良好地保护作用,使其免受高脂血清的损伤作用,起到维护内膜屏障作用,防止动脉硬化的发生、发展。     

丹酚酸B、丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型内皮细胞功能的影响

【目的】探讨丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型内皮细胞功能的影响，以寻找其作用靶点。【方法】复制家兔动脉粥样硬化模型，放射性免疫方法检测血浆血栓素（TXB2）、6酮前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）,内皮素（ET）浓度，观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA对内皮细胞功能的影响。【结果】丹酚酸B能够减少动脉粥样硬化家兔血浆TXB2、ET浓度，增加6-keto-PGF1α浓度，丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化家兔血浆TXB2、6-ke-to-PGF1α、ET没有明显影响。【结论】丹参水溶性成分与脂溶性成分在治疗动脉粥样硬化过程中作用靶点及机制不同。     

救心胶囊对损伤内皮细胞黏附因子表达的影响

【目的】研究救心胶囊对缺氧和低密度脂蛋白（LDL）血管内皮细胞（EC）损伤的保护作用。【方法】采用体外细胞培养技术，制造缺氧和LDL内皮损伤模型。采用免疫组化方法观察救心胶囊对血管内皮黏附分子-1（VCAM-1）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的影响。【结果】在缺氧或者LDL状态下，内皮细胞黏附分了（VCAM-1，ICAM-1）表达显著增加。救心胶囊可明显地抑制内皮细胞黏附因子的表达率。【结论】救心胶囊对缺氧和LDL造成的内皮细胞有保护作用。     

丹酚酸B对缺氧再复氧心肌细胞内Ca~(2+)浓度变化的影响

目的　探讨中药丹参水溶性单体成分丹酚酸B(SalB)对体外培养心肌细胞模拟心肌缺血再灌注损伤 (MIRI)钙超载的干预作用。方法　建立大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤模型。缺氧 4h ,复氧 2 0h ,应用荧光染料Fura - 2 /AM定量测定细胞内游离Ca2 +浓度。结果　SalB可以减少细胞内Ca2 +的浓度。结论　SalB可以抑制心肌细胞缺氧复氧过程中的Ca2 +超载 ,是其发挥心肌缺血再灌注损伤心肌保护作用的机制之一。     

调肝导浊中药对动脉粥样硬化家兔PDGF-A及其受体α表达的影响

[目的]探讨调肝导浊中药对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔模型血小板源性生长因子A链(PDGF-A)及其受体(PDGFR—α)表达的影响，以阐明其抗动脉粥样硬化的作用机制。[方法]采用高胆固醇饮食饲喂家兔，并在饲喂过程中依分组进行不同处理。实验结束后，处死动物取主动脉，用免疫组化方法检测PDGF—A、PDGFR—α的表达。[结果]AS模型组家兔主动脉PDGF—A、PDGFR—α阳性表达增强，而调肝导浊中药可有效降低其表达。[结论]调肝导浊中药可有效抑制高胆固醇饮食诱导的PDGF—A、PDGFR—α表达增强，从而阻止AS的发生发展。     

高糖高脂诱导脐静脉内皮细胞凋亡及对线粒体膜电位的影响

[目的]明确糖基化终末产物(AGEs)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)联合诱导内皮细胞凋亡及其作用机制。[方法]以AGEs和ox-LDL联合作用人脐静脉内皮细胞24 h,hochest33258染色后观察凋亡,Rhodamin123染色后流式细胞术检测线粒体膜电位。[结果]研究表明AGEs和ox-LDL共同作用可增加内皮细胞的凋亡率,降低内皮细胞线粒体膜电位。[结论]提示高糖高脂促进内皮细胞凋亡,可能和降低线粒体膜电位有关。     

骨髓间充质干细胞与丹酚酸B预处理内皮祖细胞共移植对急性心肌梗死大鼠心功能及分化基因表达的影响

背景:由于心肌细胞自身增殖能力有限,急性心肌梗死后细胞移植是目前流行的再生心肌方法.骨髓间充质干细胞的存活受心肌微环境的影响,而内皮祖细胞参与血管新生,可为骨髓间充质干细胞提供微环境. 目的:探讨骨髓间充质干细胞联合中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞共移植后,对急性心肌梗死大鼠心功能改善及骨髓间充质干细胞分化早期基因表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/2008-03在天津中医药大学完成.材料:清洁级雄性Wistar大鼠45只,由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供.丹酚酸B为天津天士力现代中药资源有限公司产品,批号 20060601.方法:分别取2只和1只大鼠,采用密度梯度离心法+贴壁筛选法分离培养纯化内皮祖细胞、骨髓间充质干细胞.剩余42只大鼠随机分为4组:假手术组9只、模型组11只、骨髓间充质干细胞组12只、共移植组10只.假手术组只开胸穿线,不结扎左冠状动脉;其余3组结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型.结扎冠状动脉15 min后再次开胸,共移植组吸取骨髓间充质干细胞悬液250 μL(浓度1×1010L-1)+8mg/L丹酚酸B预处理的内皮祖细胞悬液250 μL(浓度1×108L-1),于结扎区附近心肌组织分5点注射:骨髓间充质干细胞组同法注射单纯骨髓间充质干细胞悬液500μL,模型组注射等量细胞培养液.主要观察指标:采用超声心动仪测定左室功能,Real-time PCR检测心肌分化基因Nkx2.5,GATA-4的表达.结果:细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组左室结构有改善趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);共移植组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、舒张末期室间隔厚度、收缩末期室间隔厚度均明显改善(P＜0.05),心室收缩功能指标射血分数、心输出量均明显改善(P<0.05).细胞移植4周后与模型组比较,骨髓间充质干细胞组、共移植组Nkx2.5及GATA-4 mRNA表达均明显增加,且共移植组Nkx2.5 mRNA增加幅度明显大于骨髓间充质干细胞组(P<0.05).结论:骨髓间充质干细胞联合丹酚酸B预处理的内皮祖细胞共移植方式,可上调骨髓间充质干细胞向心肌分化过程中Nkx2.5,GATA-4基因的表达,改善急性心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能.