心肌肌钙蛋白I磷酸化及降解与肥厚型心肌病

目的:观察心肌肌钙蛋白I在肥厚型心肌病小鼠心肌组织中的磷酸化与降解作用。方法:实验于2005-03/2006-01在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所及南京医科大学动物中心SPF级动物房进行。取4周龄BALB/c雌鼠12只,随机分为模型组6只,正常对照组6只,适应性饲养1周后模型组小鼠转染带有EGFP报告基因的CTnIArg146Trp突变基因。饲养至20周龄时二维超声心动图检测证实模型组小鼠室间隔肥厚,断颈处死两组小鼠后,称取小鼠心脏质量(湿),心尖部心肌组织光镜病理学检查,小鼠心肌组织进行WesternBlotting检测重组蛋白、肌钙蛋白I的磷酸化及降解表达,GAPDH作为内参半定量。结果:12只小鼠进入结果分析。①模型组小鼠心脏明显增大,心脏质量(湿)/体质量比显著高于正常对照组(P<0.01);模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱、间质血管增生、少量炎性细胞浸润;两组血清肌钙蛋白I水平均正常(P>0.05)。②模型组小鼠心肌组织用抗EGFP单克隆抗体在Mr55000,24000检测到突变CTnI-EGFP及其降解片断表达。③模型组在Mr55000,30000,28000分别检测到磷酸化突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000见磷酸化肌钙蛋白I表达,模型组内源性磷酸化肌钙蛋白I表达明显高于对照组(1.18±0.15,0.97±0.15,P<0.05)。④去磷酸化抗肌钙蛋白I单克隆抗体在Mr55000,28000,检测到去磷酸化突变肌钙蛋白I-EGFP、内源性肌钙蛋白I降解片断表达,正常对照组未见去磷酸化肌钙蛋白I表达;用针对不同位点的抗肌钙蛋白I单克隆抗体3E3,2I-14,8I-7,MF4分别在Mr55000,30000,28000检测到突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000,见肌钙蛋白I表达,未见降解片断。结论:AdcCTnIArg146Trp-EGFP突变基因在小鼠体内成功转染心肌组织并有明显表达及降解片断出现,小鼠心脏呈现明显室间隔肥厚;小鼠内源性肌钙蛋白I磷酸化表达增强、降解与心肌肥厚的发生、发展及心肌功能的改变可能有关,但两者之间因果关系及确切机制还有待于进一步研究。     

急性冠脉综合征血小板反应素-1基因多态性研究

目的探讨血小板反应素-1(TSP-1)基因第13外显子单核苷酸多态性(SNPs),致TSP-1蛋白第700位氨基酸、丝氨酸转换为天冬氨酸(700N→S)与中国汉族人急性冠脉综合征(ACS)的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术(PCR-RFLP),筛查了南京医科大学第一附属医院2003-11～2005-09的323例汉族ACS患者和273名对照组TSP-1基因第13外显子钙结合活性片段8831A→G,对筛查到含有突变的片段进行序列测定,并与正常序列进行对照分析。结果对照组TSP-1基因8831A→G变异频数明显低于西方人,与西方人群比较差异有显著性(0.4%对11%,P<0.001);TSP-1基因8831A→G不是中国汉人ACS发生的独立危险因素(GA对AA∶OR=1.699,95%CI为0.309～9.348,P=0.538)。结论TSP-1基因8831A→G在中国汉人中发生频率低,与汉族人ACS发生无相关性,补充了TSP-1基因SNPs的中国汉人数据库信息。     

中国人群肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白基因突变研究

目的:初步探讨中国人群肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白T基因突变情况,为该病的早期防治和康复介入奠定理论基础。方法:提取58例肥厚型心肌病(hypertrophiccardiomyopathy,HCM)患者外周血白细胞基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增心肌肌钙蛋白T(cTnT)基因8、9、11号外显子,产物做单链构象多态性(SSCP)分析,出现异常条带者直接测序验证。结果:58例临床确诊的HCM患者cTnT基因8,9,11号外显子,除160位密码子存在ATC和ATT多态性外,未发现基因位点的异常。结论:与国外报道的肥厚型心肌病约20%是由肌钙蛋白T基因突变引起相比较,中国人群肥厚型心肌病患者基因突变可能存在不同的特点。     

肌松拮抗药与肌松监测在小儿麻醉中的应用

肌松拮抗药(MRA)是骨骼肌松弛药(SMR)的拮抗剂,主要包括抗胆碱酯酶药(新斯的明、吡斯的明),K⁺通道阻滞剂和氨基甾类非去极化SMR的特异性拮抗药(舒更葡糖钠)。肌松监测是指连续监测肌肉松弛程度,客观反映SMR作用的消长过程。随着SMR在临床中的广泛应用,肌松药残余阻滞(RBMR)越来越受到麻醉医师关注。RBMR可能导致麻醉恢复期患儿麻醉苏醒延迟、呼吸减弱、缺氧、窒息,甚至死亡。围术期使用MRA,并同时进行肌松监测,可有效预防术后患儿RBMR的发生。相较于成年患者,患儿对缺氧耐受性差,RBMR对麻醉恢复期患儿危害性更大,可能导致更多不良反应。因此,如何降低术后RBMR对麻醉恢复期患儿的不良反应发生率,是麻醉医师需要关注和解决的重要问题之一。笔者拟就MRA的药理学特点,以及术中肌松监测在小儿麻醉中应用的最新研究进展进行阐述。     

血清cTnI对病毒性心肌炎诊断价值的研究

目的　分别观察多种病毒感染后血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)变化 ,结合心电图 (ECG)及临床特征 ,阐述其对病毒性心肌炎 (VMC)心肌损伤的诊断价值。方法与结果　VMC患者 180例ELISA双抗夹心法定量测定血清cTnI ,升高 97例 (5 4% ) ,其中重症 19例、有病毒感染史与ECG改变 2 7例血清cTnI均增高。 19例丙型病毒性肝炎患者 ,8例血清cTnI增高。 5 0例带状疱疹病毒感染者 2 0例血清cTnI增高 ,且与临床严重度有关 ,其中 17例ECG呈多样性表现。 6 5例VMC且cTnI持续增高者在病程 1、3、6、9、12个月时转阴率分别为 47 7%、5 2 3%、90 8%、92 3 %、98 5 %。结论　血清cTnI对多种病毒感染后VMC患者的心肌细胞损伤及病程观察能提供可靠的诊断依据     

MS—PCR法检测血管紧张素原基因M235T多态性

目的 建立新型突变基因分离聚合酶链反应（MS-PCR）法检测血管紧张素原（AgT)基因M235T多态性,以正确评估其与家族性原发性高血压的关系。方法 建立PCR-RFLP和MS-PCR法最佳实验体系,验证敏感性及特异性。结果 （1）PCR-RFLP体系中,随内切酶量和消化时间的增加,消化反应越彻底,以0.075ug基因组DNA扩增产30UnitTth111-I酶消化3小时为最佳反应体系。（2）MS-PCR法一次扩增即可确定AgT基因型。（3）10个标本以PCR-RFLP法检测者基因型均为MT,而MS-PCR法仅1例为MT型,余9例均为TT型（90%）。结论 传统的PCR-RFLP可能因消化不彻底而造成结果判断的误差;MS-PCR以其高敏感性和特异性成为检测基因多态性的快速、简便、可靠的方法。     

公共卫生事业管理专业实践教学的思考

泸州医学院公共卫生系自2004年开始招收四年制公共卫生事业管理专业本科学生,每年招生25人左右,已招收5届学生.现有2届毕业生共43人,在校生76人.     

血清肌钙蛋白Ⅰ水平与心绞痛患者危险度分层的关系

目的 探讨检测肌钙蛋白Ⅰ（ｃＴｎⅠ）诊断冠心病心绞痛微小心肌损伤以及对其预后的判断价值。方法 对１０１例不稳定性心绞痛（ＵＡ）和３４例稳定性心绞痛（ＳＡ）患者及６６例冠状动脉造影正常者,７２例健康者进行血清心肌肌钙蛋白定量测定,同时测定磷酸肌酸激酶同工酶,并分组比较相关因素,观察住院心脏事件发生率。 ４４例ＵＡ患者ｃＴｎⅠ增高（４３．５６％）,而ＳＡ患者只增高６例（１７．６５％）,ｃＴｎⅠ增高组发     

DCM大鼠心室肌组织肌浆网钙泵与IP3受体表达的变化

目的 :心肌病心室再构 (ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ)与细胞内钙失调控密切相关 ,本研究在ＤＣＭ大鼠模型的基础上观察了ＳＥＲＣＡ活性、ＳＥＲＣＡ2和ＩＰ3-Ｉ受体表达的变化与ＤＣＭ早期心肌再构的关系 ,并对ＡＣＥＩ和β-受体阻滞剂对以上两种受体基因表达的影响及可能机制做一分析。方法 :高血压、糖尿病合并心肌病大鼠动物模型制备 ,采用本实验室改良的ｐ -ＮＰＰ法测定ＳＥＲＣＡ活力。半定量ＲＴ -ＰＣＲ结合放射自显影测定ＳＥＲＣＡ2、ＩＰ3-ＩｍＲＮＡ水平。结果 :模型组心脏指数 (ＬＶ/ＢＷ)显著高于正常对照组 ,提示有心肌肥厚形成 ,…     

急性心肌梗死血清诊断指标比较

目的 :建立血清磷酸肌酸激酶同工酶 MB(CK- MB)与心肌肌钙蛋白 I(c Tn I)测定的方法 ,并通过与CK、谷草转氨酶 (AST)、乳酸脱氢酶 (L DH)比较阐述其对急性心肌梗死 (AMI)的诊断价值。方法 :共观察急性心肌梗死 (AMI) 6 5例 ,陈旧性心肌梗死 2 8例 ,稳定性心绞痛 17例 ,阵发性室上性心动过速 49例。建立 CK- MB单克隆抗体吸附测定与 c Tn I EL ISA双夹心测定的方法。同时观察血清 CK- MB、c Tn I、CK、AST、L DH在 AMI等疾患中的变化。结果 :血清 CK- MB单克隆抗体吸附法与 c Tn I EL ISA双夹心法回收率分别为 97%～ 113%、94.6 %～ 10 5 .6 % ,标准曲线相关系数分别为 0 .993与 0 .990 ,分别与琼脂糖电泳法及国外实验室检测法对比结果基本一致。 AMI胸痛发生后 12 h内血清 CK- MB的敏感性最高 ,12～ 2 4h的敏感性与 CK、c Tn I相当 ,高于 AST和L DH,而 2 4h后血清 c Tn I的敏感性最高 ;血清 CK- MB与 c Tn I对 AMI诊断的特异性和诊断有效性明显高于CK、AST、L DH。结论 :血清 CK- MB单克隆抗体吸附法与 c Tn I EL ISA双夹心法的敏感性和特异性高 ,CK- MB与c Tn I两个指标相互补充 ,对诊断 AMI有重大的临床价值