肺癌中结肠多发性腺瘤样息肉基因启动子1A序列甲基化模式的研究

目的 探寻结肠多发性腺瘤样息肉（APC）基因启动子1A序列中肺癌甲基化位点及其存在模式。方法 用甲基化序列特异性引物，对阳性控制样品（CB＋）、阴性控制样品（CB-）、13份正常肺组织及19份肺癌组织进行APC基因启动子1A序列甲基化特异性扩增（MSP），其扩增产物直接测序和进行克隆测序分析。结果 在19份肺癌组织中，APC基因启动子1A序列的707、714、719和726位点发生高甲基化，甲基化率分别为95％（18／19）、74％（14／19）、74％（14／19）和74％（14／19），与正常肺组织比较，差异均有统计学意义（P〈0．001）。而679和687位点甲基化发生率均为11％（2／19），与正常肺组织甲基化发生率（0／13）接近（P〉0．05）。结论 在APC基因启动子1A序列中存在CpG胞嘧啶二核苷酸特定甲基化模式，其对肺癌早期诊断可能有重要意义。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ磷酸化及降解与肥厚型心肌病

目的观察心肌肌钙蛋白Ⅰ在肥厚型心肌病小鼠心肌组织中的磷酸化与降解作用.方法实验于2005-03/2006-01在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所及南京医科大学动物中心SPF级动物房进行.取4周龄BALB/c雌鼠12只,随机分为模型组6只,正常对照组6只,适应性饲养1周后模型组小鼠转染带有EGFP报告基因的CTnIArg146Trp突变基因.饲养至20周龄时二维超声心动图检测证实模型组小鼠室间隔肥厚,断颈处死两组小鼠后,称取小鼠心脏质量(湿),心尖部心肌组织光镜病理学检查,小鼠心肌组织进行Western Blotting检测重组蛋白、肌钙蛋白Ⅰ的磷酸化及降解表达,GAPDH作为内参半定量.结果12只小鼠进入结果分析.①模型组小鼠心脏明显增大,心脏质量(湿)/体质量比显著高于正常对照组(P＜0.01);模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱、间质血管增生、少量炎性细胞浸润;两组血清肌钙蛋白Ⅰ水平均正常(P＞0.05).②模型组小鼠心肌组织用抗EGFP单克隆抗体在Mr 55 000,24 000检测到突变CTnI-EGFP及其降解片断表达.③模型组在Mr55 000,30 000,28 000分别检测到磷酸化突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白Ⅰ及其降解片断表达,正常对照组在Mr30 000见磷酸化肌钙蛋白Ⅰ表达,模型组内源性磷酸化肌钙蛋白Ⅰ表达明显高于对照组(1.18±0.15,0.97±0.15,P＜0.05).④去磷酸化抗肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体在Mr55 000,28 000,检测到去磷酸化突变肌钙蛋白Ⅰ-EGFP、内源性肌钙蛋白Ⅰ降解片断表达,正常对照组未见去磷酸化肌钙蛋白Ⅰ表达;用针对不同位点的抗肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体3E3,2I-14,8I-7,MF4分别在Mr55 000,30 000,28 000检测到突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白Ⅰ及其降解片断表达,正常对照组在Mr 30 000,见肌钙蛋白Ⅰ表达,未见降解片断.结论Adc CTnI Arg146Trp-EGFP突变基因在小鼠体内成功转染心肌组织并有明显表达及降解片断出现,小鼠心脏呈现明显室间隔肥厚;小鼠内源性肌钙蛋白Ⅰ磷酸化表达增强、降解与心肌肥厚的发生、发展及心肌功能的改变可能有关,但两者之间因果关系及确切机制还有待于进一步研究.     

心肌肌钙蛋白I磷酸化及降解与肥厚型心肌病

目的：观察心肌肌钙蛋白I在肥厚型心肌病小鼠心肌组织中的磷酸化与降解作用。 方法：实验于2005-03／2006-01在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所及南京医科大学动物中心SPF级动物房进行。取4周龄BALB／c雌鼠12只，随机分为模型组6只，正常对照组6只，适应性饲养1周后模型组小鼠转染带有EGFP报告基因的CTnIArg146Trp突变基因。饲养至20周龄时二维超声心动图检测证实模型组小鼠室间隔肥厚，断颈处死两组小鼠后，称取小鼠心脏质量（湿），心尖部心肌组织光镜病理学检查，小鼠心肌组织进行Western Blotting检测重组蛋白、肌钙蛋白I的磷酸化及降解表达，GAPDH作为内参半定量。结果：12只小鼠进入结果分析。①模型组小鼠心脏明显增大，心脏质量（湿）／体质量比显著高于正常对照组（P〈0．01）；模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱、间质血管增生、少量炎性细胞浸润；两组血清肌钙蛋白I水平均正常（P〉0．05）。②模型组小鼠心肌组织用抗EGFP单克隆抗体在帆55000，24000检测到突变CTnI—EGFP及其降解片断表达。③模型组在M55000，30000，28000分别检测到磷酸化突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达，正常对照组在Mr30000见磷酸化肌钙蛋白I表达，模型组内源性磷酸化肌钙蛋白I表达明显高于对照组（1．18&;#177;0．15，0．97&;#177;0．15,P〈0．05）。④去磷酸化抗肌钙蛋白I单克隆抗体在肛55000，28000，检测到去磷酸化突变肌钙蛋白I-EGFP、内源性肌钙蛋白I降解片断表达，正常对照组未见去磷酸化肌钙蛋白I表达；用针对不同位点的抗肌钙蛋白I单克隆抗体3E3，2I-14，8I-7，MF4分别在M55000，30000，28000检测到突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达，正常对照组在帆30000，见肌钙蛋白I表达，未见降解片断。 结论：Adc CTnI Arg146Trp—EGFP突变基因在小鼠体内成功转染心肌组织并有明显表达及降解片断出现，小鼠心脏呈现明显室间隔肥厚；小鼠内源性肌钙蛋白-I磷酸化表达增强、降解与心肌肥厚的发生、发展及心肌功能的改变可能有关，但两者之间因果关系及确切机制还有待于进一步研究。     

国产罗库溴铵肌松效应及安全性的评价

目的评价国产罗库溴铵的临床效应和安全性。方法随机双盲前瞻性研究。纳入择期行腹腔镜下胆囊切除术病人48例,随机分为国产组和进口组,每组各24例。以静脉推注咪达唑仑,靶控输注（TCI）丙泊酚和瑞芬太尼来完成麻醉诱导。肌松监测仪（TOF-Wacth）定标稳定3～5分钟后,静脉推注国产或进口罗库溴铵0．6mg／kg。以单刺激（0．1Hz）测定肌松程度,待肌松达最大抑制时行气管插管。以靶控输注（TCD丙泊酚和瑞芬太尼维持麻醉深度。持续监测肌松至单刺激恢复至基础值的75％。同时记录注入罗库溴铵后患者的生命体征。结果国产组与进口组相比,起效时间、维持时间、单刺激75％恢复时间、恢复指数及给药前后的平均动脉压、心率均无显著性差异。试验中并未观察到有患者发生不良反应。结论国产罗库溴铵临床使用肌松效应与进口罗库溴铵相似,试验中未观察到不良反应发生。     

定量检测人超敏C-反应蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步临床应用

目的：建立定量检测人超敏C-反应蛋白（CRP）双抗体夹心EUSA方法。方法：采用Protein A亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体（mAbs）,并行SDS—PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗CRPmAbs进行标记HRP后行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的CRP抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法。初步对人血浆中的超敏CRP水平进行检测。结果：最佳配对组合为抗CRP mAb 1C10和HRP标记的抗CRP mAb2 C11,最适工作浓度分别为10μg／mL和l：2000,该方法的批内、批间变异系数分别为3．1％～9．7％和3．6％～13．6％,灵敏度达8．3ng／mL,回收率为90％～109％。用ELISA法测定左右冠无明显狭窄者68例,狭窄小于50％者59例和狭窄大于50％患者67例的血浆hs．CRP水平,冠脉狭窄小于50％组（3．7±1．2）mg／L与冠脉无狭窄组（1．8±0．7）mg／L比较明显升高（P〈0．05）;狭窄大于50％组（8．9±3．3）mg／L与狭窄小于50％组比较明显升高（P〈0．05）。结论：建立了一种可用于检测人超敏CRP的双抗体夹心ELISA方法。     

老龄cTnIR146W转基因小鼠心脏结构与功能的超声特征

目的 探讨老龄cTnIR146W转基因小鼠心脏结构与功能.方法 应用GE Vivid 7超声诊断仪,榆测老龄cTnIR146W小鼠心脏结构与功能,包括室间隔脬度(IVS)、射血分数(EF)、短轴缩短率(FS),并用绀织多普勒测量二尖瓣环收缩期峰值速度(S)等指标.结果 老龄cTnIR146W基因型阳性(A)组小鼠IVS为(1.010±0.011)mm ,显著高于基因型阳性(B)组小鼠的(0.911±0.007)mm(P＜0.01);A组小鼠EF和FS分别为(71.534±2.488)%和(35.289±1.918)%,均显并低于B组小鼠的(77.737+1.990)%和(40.501±1.697)%(P＜0.01);A组小鼠二尖瓣前叶、后叶瓣环收缩期峰值速度分别为(0.032±0.006)m/s和(0.031±0.010)m/s,均显著低于B纰小鼠的(0.037±0.005)m/s和(0.039±0.006)m/s(P＜0.05).结论 老龄cTnIR146W 基因型阳性小鼠室间隔心肌增厚,左室收缩功能减退.超声心动图及组织多普勒可以评价转基因小鼠心脏结构与左事收缩功能.     

crp基因c+1444t多态性与中国苏皖地区汉族人群acs的易感性无关

目的:探讨C反应蛋白(C-reactive portein,CRP)基因C+1444T多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的易感性。方法:选择2003年11月～2008年5月住院的ACS患者443例(ACS组)和同期经冠脉造影排除冠心病者285例(对照组),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)方法检测CRP基因C+1444T多态性。结果:ACS组的CC、CT和TT基因型以及C等位基因频率分布与对照组无显著性差异(83.7%vs 86.7%、14.4%vs 12.3%、1.8%vs 1.1%和91.0%vs 92.8%,P值分别为0.292、0.439、0.540和0.243)。调整年龄、性别、吸烟、收缩压、舒张压、血糖和血脂等多因素后采用多元Logistic回归分析显示,CRP基因C+1444T多态性与ACS的发生仍无显著性关联(P>0.05)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因C+1444T多态性与ACS的易感性无显著相关性。     

C反应蛋白对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙的影响

目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用?方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i?将内皮细胞用1 μmol/L阿托伐他汀预处理30 min后,加入100 mg/L CRP,观察阿托伐他汀对CRP作用的影响?结果:与对照组相比,CRP可显著升高内皮细胞胞内[Ca2+]i并呈剂量依赖关系;阿托伐他汀可明显降低CRP引起的[Ca2+]i升高?结论:CRP可导致和加重小鼠主动脉内皮细胞的炎症反应,阿托伐他汀可部分拮抗CRP的致炎作用?     

牙周疾病与早产关系的研究进展

牙周疾病是牙周组织（牙龈、牙周膜、牙槽骨）病变的总称。该病为口腔两大类疾病（牙周病和牙冠病）之一,以炎症细胞浸润、组织渗液和组织破坏为特征的慢性炎症性疾病,通常以牙龈出血为主要症状,还可出现牙龈红肿、流脓、对刺激性食物过敏、牙松动,甚至脱落等。     

Expression of Inositol 1,4,5—trisphosphate Receptor mRNA in Myocardium of Spontaneous Hypertension Rats and Cultured Vascular Smooth Muscle Cells of Rats

Ｔｈｅｉｎｏｓｉｔｏｌ 1,4,5 ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ (ＩＰ3)ｉｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓａｋｅｙｓｅｃｏｎｄｍｅｓｓｅｎｇｅｒｏｒｏｎｅｏｆｔｈｅｅｌｅｍｅｎｔｓｏｆｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ .Ｔｈｅｒａｐｉｄｒｅ ｌｅａｓｅｏｆＣａ2 + ｆｒｏｍｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＣａ2 + ｓｔｏｒｉｎｇｐｏｏｌｌｉｋｅｔｈｅｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍａｎｄｔｈｅｓａｒｃｏｐｌａｓ ｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍｔｈｒｏｕｇｈｔｗｏｔｙｐｅｓｏｆｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｃａｌｃｉｕｍｒ…