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本研究共用威斯特大鼠40只,以闭塞大脑中动脉(MCA)的方法复制局部脑缺血的实验模型。本文描述了闭塞MCA的手术方法,并对MCA闭塞后脑组织病理学,梗塞面积及电子计算机断层扫描(CT)结果进行了探讨。结果表明,本方法复制的局部脑缺血模型死亡率低,重复性高。脑缺血后脑组织病理学改变有神经细胞水肿、线粒体固缩、细胞器崩解,核膜破裂,细胞坏死等,而小胶质细胞的噬节细胞现象和大量格子细胞的形成为最显著的特点之一。MCA闭塞后脑梗塞的面积轻恒定,但CT扫描未见缺血性改变,由于该研究用小啮齿动物,采源便宜、手术操作较简便,且术后存活卒高;可供临床研究脑缺血时形态、机能及代谢的改变作参考。 相似文献
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血小板聚集:是临床观察与药理研究的一种方法,可以用血小板聚集仪持续地记录穿过搅动中的血小板悬液的透光度来测定血小板聚集的数量。常规临床研究是用富血小板的枸椽酸血浆(PRPc)测血小板聚集,血样本最好需除去任何痕量的凝血酶。血液以3.8％的二羧化(dihydrate)枸椽酸钠抗凝(1:9份血),于室温内190g离心15分钟。所得到的富血小板枸椽酸血浆以贫血小板血浆(ppp)稀释,并调整血小板浓度为3×10~5/微升。富血小板血浆在室温内保存在Co_2中塞住的玻璃试管内以防PH发生变异。从取血到测定完毕的时间只能是3小时,有些情况下为了判定血小板的病变,血浆旦白,凝血因子及抗凝血因素的影响,需要用洗涤过的血小板悬液。用酸性葡萄糖枸椽酸(ACD)收集血样本,于 37℃下离心取PRPc。将PRPC离心后取血小板沉淀物,按Mustard氏法在 37℃以0.35％浓度的台氏-旦白缓冲液反复洗涤2次。再将洗涤后的血小板在 37℃重新悬浮于含有腺苷三磷酸双磷酸酶(apyrase)的上述缓冲液内,并调整血小板浓度为3×10~5/微升。用下述几种试剂诱导血小板聚集:ADP,肾上腺素,胶原,凝血酶,花生四烯酸,离子载体A_(23187),血小板活化因子-酰醚(PAF-acether),及瑞斯托霉素(ristocetin)。对人血小板聚集曲线的定量分析,有助于对调节血小板聚集的生理及生化机制的研究,对导致临床出血或血栓栓塞性疾病的先天性或获得性血小板异常的认识及分类,以及利用血小板聚集曲线的定量分析对抑制血小板聚集药物的效应及其作用机理进行研究。人血小板与血管壁成分及凝血旦白间的相互作用在许多生理及病理过程中起着重要作用:止血、血栓形成,动脉粥样硬化,免疫性疾病,癌瘤转移,体内存在许多诱导血小板聚集的因素:如ADP,肾上腺素,花生四烯酸及其衍生物(前列腺素内过氧化物PGG_2及PGH_2,TXA_2),胶原,凝血酶,PAF-acether。各种刺激所引起的血小板致活反应系按同一机理逐步发生的血小板反应,根据刺激物与特异性膜受体的反应强度,椭园状血小板的形态发生改变,于是出现聚集,血小板将其α颗粒,致密颗粒以及最后是溶酶体中的内含物都分泌出来。聚集系指需要有血小板间,在细胞外的钙离子(Ca~(2 )),纤维旦白原,以及由糖酵解同完整呼吸提供代谢能量使血小板发生撞击的一种主动过程,因为血小板能悬浮在枸椽酸血浆或人工缓冲环境内,故其功能可以在体外加以测出,以穿过悬浮血小板的光束的透光度,可在一个激动系统内用持续的比浊法测出血小板聚集的量。本文的目的在于详述我们实验室内日常应用着的测血小板聚集的方法。我们所应用的方法对血小板制备,反应物(试剂),以及我们所进行的关于血小板聚集机理的研究,以及对聚集的测定法都是严格标准化了的;对血小板功能的遗传性或后天性异常;对抑制血小板聚集药物效应及药理作用机理的认识都是严格标准化了的。 相似文献
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