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目的 建立地高辛标记DNA探针杂交法,检测基于Madin-Darby犬肾(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞生产的流感疫苗中宿主DNA的残留量。方法 提取MDCK细胞基因组DNA,制备地高辛标记探针。对地高辛标记DNA探针杂交法进行特异性、灵敏度及稳定性验证, 并用此法检测3批MDCK细胞流感疫苗中的DNA残留量。结果 MDCK细胞基因组DNA的质量浓度为33 ng/μl,260 nm与280 nm波长处的吸光度比值为1.9。制备的探针与非同源细胞DNA无杂交,最低检测限度为10 pg。探针在-70 ℃放置9个月后,检测灵敏度仍可达到10 pg。经检测,MDCK细胞流感疫苗成品中的DNA残留量<10 ng。结论 建立的地高辛标记探针杂交法特异性强、灵敏度高、稳定好,并且操作简便,可用于MDCK细胞流感疫苗中DNA残留量的检测。 相似文献
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[目的]探讨医学大家叶天士治疗喘证的思路及方法。[方法]收集叶天士《临证指南医案》中治疗喘证的医案及处方,对处方进行整理、分析,归纳其治喘思路及方法。[结果]叶氏认为,肺系疾病不外乎咳、痰、喘,治喘本乎肺,却不拘泥于肺。叶氏治喘,以肺体为中心,着眼于肾、肝、脾胃、三焦等脏腑,依据脏腑经络、气血阴阳的相互关联及转化,分而治之。治疗喘证以辨阴阳、辨虚实、辨脏腑、辨缓急为特点,治疗方法包括温肺化饮法、清热泻肺法、宣肺利水法、补中益气法、补肾纳气法、温阳利饮法、分消走泄法、降气活血法、益胃养阴法、固元收摄法10种。[结论]叶氏治喘求古博新,以肺体为中心,着眼于肾、肝、脾胃、三焦等脏腑,依据脏腑经络、气血阴阳的相互关联及转化,分而治之。其治疗经验值得后辈医者探讨学习。 相似文献
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目的探讨微弧氧化联合溶胶-凝胶工艺制备钛表面复合生物涂层。方法钛片根据表面处理工艺不同分为5组:对照组,MAO(微弧氧化组),MAO+Sol/gel(微弧氧化+溶胶-凝胶组),MAO+Sol/gel-LowZn(微弧氧化+溶胶-凝胶低锌组),MAO+Sol/gel-HighZn(微弧氧化+溶胶-凝胶高锌组)。利用扫描电镜(SEM)观察涂层表面形貌,X射线能谱分析仪(EDX)和X射线衍射仪(XRD)分析元素分布和成分,测厚仪测量涂层厚度;粗糙度测试仪测量表面粗糙度。结果 SEM下可见MAO组钛表面粗糙多孔,联合溶胶-凝胶处理后,钛表面更加平整紧密,EDX得出MAO+Sol/gel组钙磷元素的质量百分比分别为25.00%和15.49%,MAO+Sol/gel-Low Zn组和MAO+Sol/gel-High Zn组钙、磷、锌元素的质量百分比分别为22.87%、15.01%、1.82%与18.66%、15.60%、7.45%,XRD得出MAO+Sol/gel组、MAO+Sol/gel-Low Zn组和MAO+Sol/gel-High Zn组均可见特征性羟基磷灰石(HA)峰和Ca3(PO4)2峰,MAO+Sol/gel-High Zn组表面涂层厚度最高(10.40±0.49)μm(P<0.05),MAO+Sol/gel组表面粗糙度最高(1.17±0.10)μm(P<0.05)。结论应用微弧氧化联合溶胶-凝胶工艺,可在钛金属表面制备出HA涂层,并通过调节溶胶凝胶中Zn(NO3)2·6H2O的含量,制备出HA和不同含量锌离子的复合生物涂层。经过两种不同工艺联合处理后,钛表面涂层厚度逐渐增加,而粗糙度随着溶胶凝胶中锌离子的增加逐渐降低。 相似文献
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目的:观察甲磺酸阿帕替尼(简称阿帕替尼)联合化疗在多线治疗失败的晚期乳腺癌患者中的临床疗效和安全性,阐明阿帕替尼在晚期乳腺癌患者治疗中的意义。方法: 25例晚期乳腺癌患者均为多线治疗进展者,其中三线治疗者5例(20%),四线治疗者7例(28%),五线及以上治疗者13例(52%)。所有患者均采用阿帕替尼联合化疗,根据病情及既往用药情况选择化疗方案。阿帕替尼剂量为250~500 mg,每日1次,口服,直至疾病进展或不能耐受发生不良反应为止。采用实体瘤疗效评价标准1.1(RECIST1.1)评价疗效,包括客观缓解率(ORR)、临床获益率(CBR)和无进展生存期(PFS),采用国家通用研究所毒副反应标准4.0(NCI-CTC4.0)评价不良反应。结果: 25例晚期乳腺癌患者中位治疗线数为五线,总ORR为12%(3/25),CBR为52%(13/25),中位无进展生存期(mPFS)为6.00个月。治疗线数评价,三线治疗的5例患者中,2例疾病稳定(SD),CBR为40%(2/5);四线治疗的7例患者中,2例部分缓解(PR),2例SD,CBR为57%(4/7);五线及以上治疗的13例患者中,1例PR,6例SD,CBR为54%(7/13)。病理类型评价,三阴型患者中,3例SD,CBR为60%(3/5);12例腔上皮型(Luminal型)患者中,1例PR,2例SD,CBR为25%(3/12);HER-2阳性患者中,1例PR,6例SD,CBR为88%(7/8)。50岁及以上组患者近期疗效优于50岁以下组(P<0.05),其余不同临床病理参数患者之间近期疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。接受阿帕替尼联合化疗患者耐受性良好,不良反应多为1或2级,主要表现为乏力、手足综合征、肝功能异常、低蛋白血症、贫血、食欲不振、血压升高和蛋白尿,其中最常见不良反应为乏力(80%),其次为低蛋白血症(60%)、手足综合征(60%)和肝功能异常(60%)。结论:阿帕替尼联合化疗用于多线治疗进展的晚期乳腺癌患者仍有较好疗效,不良反应可耐受。 相似文献
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目的 探讨医护康患一体化模式在心脏移植术患者康复护理中的应用效果。方法 选取2018年4月至2021年5月于郑州市第七人民医院重症医学科行心脏移植术治疗的96例患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组52例、观察组44例。对照组给予常规康复护理干预,观察组给予医护康一体化康复护理干预。随访6个月,比较两组干预前后心理弹性水平、健康行为、生活质量等差异。结果 随访6个月后,观察组坚韧、自强、乐观和心理弹性量表(CD-RISC)评分均高于对照组(P<0.05),且观察组坚韧、自强、乐观、CD-RISC总分上升幅度高于对照组(P<0.05);观察组健康责任、营养行为、体育运动、人际关系、压力管理、精神成长和生活方式量表-Ⅱ(HPLP-Ⅱ)评分均高于对照组(P<0.05),且观察组HPLP-Ⅱ评分上升幅度高于对照组(P<0.05);观察组躯体功能、心理功能、社会功能、总体生活质量(GQOLI-74)评分高于对照组(P<0.05),且观察组GQOLI-74评分上升幅度高于对照组(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论 医护康患一体化康复护理有助于增强心脏... 相似文献
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探讨过表达IDO的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)免疫抑制调节作用机制。通过慢病毒转染体系构建过表达IDO大鼠BMSC并加入基因开启剂。采用体外共培养方式共分12组,检测CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、OX62、Treg、CD4、CD8表达;利用液相芯片检测IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-18、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3的变化情况。结果显示各组与DC单独培养48h后,共培养组中过表达IDO-BMSC+DC培养组中DC表达CD40、CD86、CD80、MHCII、CD45RA、CD45RA+CD45RB、OX62是降低的,而CD274的表达是升高的,说明过表达IDO提高了BMSC对DC的免疫抑制作用;各组与T细胞单独培养48h后,共培养组中过表达IDO-BMSC+T细胞培养组中T细胞中Treg数量是升高的,CD4+T细胞的变化无明显规律性,但CD8+T细胞是降低的,说明过表达IDO-BMSC可调节CD8+T细胞并可以促进Treg的表达;当将各组BMSC+DC+T细胞培养48h后,可见:共培养组中悬浮细胞表达CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD45RA、CD45RA+CD45RB、OX62是降低的,而CD274是升高的,再次说明过表达IDO提高了BMSC对DC的免疫抑制作用,而Treg数量增加,CD4+T细胞的变化无明显规律性,但CD8+T细胞是降低的,再次说明IDO能调节CD8+T细胞并可促进Treg的表达;各组培养48h后的上清液进行液相芯片检测,可见IDO-BMSC+DC+T细胞培养组上清中IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IFN-γ、IL-18减低,IL-10、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3表达量升高。综上,过表达IDO的BMSC可以通过有效调节DC、T细胞水平及细胞因子分泌,从多免疫途径进行免疫抑制调节。 相似文献
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目的:探讨过表达IDO 大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)改善大鼠腹腔异位移植心脏的存活机制。方法:通过慢病毒载体GV308 携带IDO 基因转染大鼠骨髓间充质干细胞构建过表达IDO 大鼠骨髓间充质干细胞。建立大鼠腹腔异位移植心脏模型,经尾静脉给予相应细胞处理:1.利用超声心动图检测移植心脏心功能变化。于采用小动物活体成像系统评估移植心脏局部荧光强度。2.再取各组受体大鼠的脾脏,采用流式细胞技术检测CD40、CD86、CD80、MHCⅠ、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、Treg 细胞的表达情况。3.取各组移植心脏,采用HE 染色评估炎性细胞浸润情况。虞利用液相芯片检测各组血清IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-18、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3 因子的变化情况。结果:淤给予相应细胞处理,可见过表达IDO-BMSCs 处理后2 d 移植心脏的EF、FS 较其余各组有提高。于采用小动物活体评估可见过表达IDO-BMSCs 组移植心脏局部荧光强度最强。盂给予干预措施后2 d 可见过表达IDO-BMSCs 组脾脏细胞CD40、CD86、CD80、MHCⅠ、CD45RA、CD45RA+CD45RB 表达降低,而CD274、Treg 细胞的表达增高。榆采用液相芯片检测各组提取血清可见在2 d 时,过表达IDO-BMSCs 组血清中IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IFN-γ、IL-18 是降低的;IL-10、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3 表达量是升高的。HE 染色证实过表达IDO-BMSCs 组炎性细胞浸润少于其他组。结论:过表达IDO 的BMSCs 可以通过有效调节免疫DC、T 细胞及细胞因子,从多个免疫层面改善移植心脏存活。 相似文献
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