牛IgG2Fc受体(boFcγ2R)胞外区基因原核表达载体的构建及其表达

目的:构建牛Fcγ2R胞外区基因的原核表达载体,并在E.coli BL21(DE3)中表达.方法:提取健康成年牛的白细胞总RNA,经RT-PCR扩增牛Fcγ2R胞外区基因片段,并将其克隆到载体pGEM-T Easy,经限制性内切酶EcoR I和 Not I双酶切鉴定及序列测定后,再将其亚克隆入原核表达载体pET28a中,构建重组质粒pET-2R,转化E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白.结果:获得682 bp的编码牛Fcγ2R胞外区基因片段.以构建的重组质粒pET-2R转化E.coli BL21(DE3)后,经IPTG诱导,表达出相对分子质量(Mr)约为30 000的重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于E.coli BL21(DE3)的胞质中,Western blot检测表明该蛋白能和牛IgG2结合.结论:成功地构建了原核表达载体pET-2R,并表达出重组蛋白.为研究牛IgG和受体的相互作用机制及其介导的免疫反应打下了基础.     

SPE-HPLC法测定菊延保康颗粒中延胡索乙素的含量

目的 :测定菊延保康颗粒 (延胡索 ,附子 ,萝芙木等 )中延胡索乙素的含量。方法 :选用C18固相萃取小柱对样品进行纯化。色谱柱为DikmaDiamonsilC18柱 (2 5 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相为 0 .0 5M磷酸二氢钾— 0 .0 0 5M庚烷磺酸钠—乙腈 (1.2∶1.2∶1) ,流速为 1.2mL·min-1,检测波长为 2 30nm。结果 :延胡索乙素进样量在 0 .0 6 7～ 0 .4 0 2 μg的范围内与峰面积呈良好的线性关系 ,相关系数为 0 .9997,平均回收率为 98.6 6 %。结论 :本方法简便快速 ,分离度好 ,结果准确可靠。     

麻醉品标准物质的研制和建立

1.麻醉品的分析检测毒品问题近年来愈演愈烈,现没有国家不受其威胁,我国部分地区重新出现阿片类毒品滥用问题,并且野生大麻在我国也有生长,因此大麻滥用也应该注意,因而禁毒是当务之急。禁毒工作离不开对麻醉品的分析检测。国家麻醉品实验室不仅要鉴定非法生产、贩运和缉获的毒品,也要对毒品的滥用情况进行检测。麻醉品可作滥用毒品,也作医用药品,因此对麻醉药品同样也需作分析检测。麻醉品及麻醉药品准确可靠的分析检测结果离不开检测     

L-NMMA对过量氟暴露引起的小鼠MC3T3E1成骨细胞中NO/iNOS表达的影响

目的 探讨L-单甲基-精氨酸(L-NMMA)与过量氟化钠(NaF)共培养对小鼠颅顶前成骨(MC3T3E1)细胞中一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 将MC3T3E1成骨细胞分为空白组(只含培养基)、NaF染毒组(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)及L-NMMA染毒组(0、5、10、20、40、80 mol/L),采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK8)检测细胞存活率,并筛选最佳染氟浓度和最佳L-NMMA用药浓度;再将MC3T3E1成骨细胞分为对照组(0.0 mmol/L NaF)、低氟组(1.0 mmol/L NaF)、高氟组(4.0 mmol/L NaF)、低氟+L-NMMA组(1.0 mmol/L NaF+20μmol/L L-NMMA)、高氟+L-NMMA组(4.0 mmol/L NaF+20μmol/L L-NMMA)、L-NMMA组(20μmol/L L-NMMA),处理24 h,采用硝酸还原酶法检测细胞中NO含量,蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR法分别检测iNOS蛋白及mRNA表达水平。结果 与对照组相比,1.0、2....     

不同诊断标准下黑龙江省成人代谢综合征患病率调查

目的 了解不同诊断标准下黑龙江省成人代谢综合征(MS)的患病率,并比较其一致性.方法 采取多级分层整群随机抽样的原则,对黑龙江2875名20～74岁的居民进行流行病学调查.采用美国胆固醇教育计划成人治疗组第三次指南(NCEP-ATPⅢ)诊断标准、国际糖尿病联盟(IDF)诊断标准及中华医学会糖尿病学分会(CDS)诊断标准计算MS的患病率,并进行结果比较和一致性检验.结果 根据ATP Ⅲ、IDF、CDS这3种诊断标准,黑龙江省成人MS标化患病率分别为14.47%、21.92%和18.73%.ATP Ⅲ与CDS诊断标准判断MS患病率的一致性最好,符合率为87.58%;其次为ATP Ⅲ与IDF,符合率为84.97%;而CDS与IDF的符合率为82.50%.结论 黑龙江地区成人MS患病率已经达到较高水平,3种MS诊断标准存在较好的一致性.     

佩夫人止咳露中四种主要成分的分离检测

佩夫人止咳露是含有磷酸可待因和其它多种组分的复方制剂。本文介绍了在碱性溶液中,经氯仿提取后用HPLC法,以C_(18)ODS为固定相,0.005 mol·L~(-1)(PIC-B6甲醇液):0.05mol·L~(-1)KH_2PO_4(含1％三乙胺,H_3PO_4调节pH=3),1:1.5为流动相,测定磷酸可待因、盐酸麻黄碱和愈创木酚甘油醚,以及在碱性溶液中经正己烷提取用UV法测定扑尔敏的方法。用该方法测定磷酸可待因、盐酸麻黄碱、愈创木酚甘油醚和扑尔敏这4种组分的回收率分别为100.3％、100.3％、101.7％和99.7％。此方法简便易行,结果可靠。     

氨酚待因片(Ⅰ)质量标准的修订

本文建立一种高效液相色谱法检测氨酚待因片 (Ⅰ )中磷酸可待因和对乙酰氨基酚的方法。该方法以ODS为固定相 ,0 0 5mol·L- 1磷酸二氢钾 -甲醇 -四氢呋喃 (5 0∶10∶4 )为流动相 ,检测波长 2 80nm。磷酸可待因和对乙酰氨基酚的回收率分别为 10 0 2 %和 99 6 % ,RSD分别为 1 7%和 0 8% (n =6 )。该方法简便快速 ,结果准确可靠。     

磷酸可待因与布洛芬的分离与检测

本文介绍了一种用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）检测复方制剂中磷酸可待因和布洛芬含量的方法。该方法用Ｃ１８ＯＤＳ为固定相，甲醇－０．０５ｍｏｌ／Ｌ．Ｌ＾－１ＫＨ２ＰＯ４－ＴＨＦ为流动相。ＵＶ检测波长２５４ｎｍ，该方法需经提取分离，溶解后直接进样。简便快速，结果可靠。     

人文关怀在口腔医疗中的实践

人文关怀是医学模式转变的必然要求,有助于提高医疗服务质量,有助于减少医疗纠纷,有助于提高医院的竞争力。我们通过重视口腔患者心理特点和心理护理;精心布置就诊环境,消除患者紧张情绪;以精湛全面的治疗技术达到无痛治疗;使用先进的医疗设施,遵守严格的消毒制度;重视与病人的沟通,将人文关怀应用于临床实践中,让口腔疾病的诊治过程充满人文关怀,提高了治疗质量和效率,减少了医疗纠纷。     

结核性淋巴腺炎针吸细细胞病理学诊断与结核抗体相互关系研究

目的探讨结核性淋巴腺炎针吸细胞病理学诊断与结核抗体相互关系的研究,提高淋巴结核诊断准确率。方法根据淋巴结核针吸细胞病理学诊断不同时期细胞学特点及特征结构改变,结合结核抗体检测做出分型诊断。结果在445例结核性淋巴腺炎中,结核初期—炎性增殖期1例占0.2%;结核早期—淋巴结节期82例占18.4%;结核中期—结核发性结节期有174例,占39.1%;结核晚期—干酪脓样坏死期有61例占13.7%;结核恢复期—纤维间质增殖期6例占1.3%。同时存在结核初期—炎性增殖期与结核早期—淋巴结节期有2例,占0.5%;结核早期—淋巴结节期与结核中期—结核性结节期有107例,占24.0%;结核中期—结核性结节期与结核晚期—干酷样脓样坏死期12例,占2.7%。期中进行结核抗体实验的有195例,ICT法共142例,阳性75例,占52.8%;DOT法160例,阳性100例,占62.5法;ELISA法共69例,阳性32例,占46.4%,炎性增殖反应期形态学变化,需要结合结核抗体阳性和腺苷脱氨本科明显增高更有助于诊断,结核结节期主要可有较多类上皮样细胞及郎罕氏细胞;而干酷样脓样坏死,主要见大量坏死组织及碎屑、少数残碎不全上皮样细胞,此期主要能查到抗酸菌为特点;纤维增殖期,抽出物难取,仅见少数纤维组织、纤维细胞和粘液间质为其特征,提示结核恢复、疤痕形成所致。细胞病理学结核诊断符合率明显高于传统诊断方法,高达98.4%。结论应用淋巴结针吸细胞病理学分型诊断与结核抗体相结合方法,为淋巴结核早期诊断、早期发现、早期治疗提供重要方法。