B型钠尿肽抑制心成纤维细胞增殖与转化生长因子-β1/Smad信号传导途径的关系

目的:探讨B型钠尿肽(BNP)抑制心成纤维细胞(CFs)增殖机制与转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1) /Smad信号传导途径的关系.方法:原代提取乳鼠的心CFs,以重组人心肌营养素刺激细胞增殖,分为: BNP组(A组)、SB431542组(B组)、BNP+SB431542组(C组)、对照组(D组).收集培养液检测细胞因子TGF-β1,收集细胞提取总RNA以荧光实时定量RT-PCR检测Smad4 mRNA变化.结果:A、B、C组TGF-β1 浓度较D组明显降低而Smad4 mRNA的△CT值较D组明显升高(P<0.05),但A、B、C组之间TGF-β1相比差异无统计学意义(P>0.05);C组Smad4 mRNA △CT值高于A组和B组.结论:BNP抑制CFs增殖机制除了TGF-β1/Smad2/3信号途径,还可能存在TGF-β1非Smad2/3信号传导途径.     

沙利度胺对EAE小鼠的疗效观察及相关指标检测

为探讨沙利度胺对EAE的疗效及相关指标影响,以MOG35-55多肽序列为免疫原诱导C57BL/6小鼠EAE模型,同时设置正常对照组。在免疫诱导当天分别给予15和60 mg/kg沙利度胺治疗。对小鼠进行行为学评分至免疫诱导第20天,采集小鼠内眦静脉血并分离血清,ELISA检测IL-4、IL-6、TGF-β、IL-17、TNF-α水平;分离小鼠脾脏,FACS检测CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg百分比。结果显示,对照组小鼠行为正常,无发病。沙利度胺治疗组小鼠行为学评分显著低于EAE模型组,且60 mg/kg给药组显著低于15 mg/kg给药组(P0.05)。EAE组与正常对照组比较,Treg百分比明显降低(P0.05);15 mg/kg沙利度胺给药组与EAE组比较,Treg百分比无显著变化;60 mg/kg沙利度胺给药组Treg百分比相较EAE组显著升高(P0.05)。不同剂量沙利度胺给药组与EAE组比较,IL-4水平升高,IL-6、IL-17、TNF-α水平均降低,且60 mg/kg沙利度胺给药组变化更显著(均P0.05);TGF-β在EAE组显著升高,且给药组与EAE组差异无统计学意义。由此,沙利度胺可升高EAE小鼠Treg百分比,抑制促炎因子分泌,有利于病情缓解。     

胎盘NKT细胞在小鼠原因不明多发性流产中的作用研究

目的:通过检测原因不明多发性流产模型(CBA/J雌鼠×DBA/J雄鼠)小鼠胎盘中的NKT的细胞数量、成熟度和细胞因子的分泌格局,以探索NKT细胞失调在原因不明多发性流产中的可能作用.方法:分别建立正常妊娠模型(CBA/J雌鼠×BALB/C雄鼠)和原因不明多发性流产模型,用流式细胞仪检测滋养层细胞中NKT细胞和CD3~+T数量的变化,用ELISA方法检测Th1/Th2相关细胞因子,而胎盘淋巴细胞T-bet表达水平用荧光定量PCR法检测.结果:正常妊娠组与原因不明多发性流产组CD3~+T细胞数量无显著性变化(P＞0.05);正常妊娠过程中,胎盘淋巴细胞分泌IFN-γ的量逐渐下降,伴随有NKT细胞数量、成熟型比例逐渐下降,而原因不明多发性流产妊娠过程中则相反;多发性流产组与正常妊娠组相比,T-bet mRNA存在表达异常,并与NKT细胞成熟型比例、胎盘淋巴细胞分泌IFN-γ的量成正相关.结论:原因不明多发性流产的发生,可能与NKT细胞失调相关,妊娠早期与胎盘NKT细胞成熟型比例偏低,分泌IFN-γ不足有关,而妊娠中后期则与NKT细胞成熟型比例偏高,分泌IFN-γ过量有关,T-bet mRNA的表达异常是造成NKT细胞失调的因素之一.     

检验医学临床教学中学生综合素质的培养

近年来,随着各种新技术应用于临床检验领域以及检验自动化程度不断提高,其他学科特别是信息技术广泛应用于检验医学,使得检验医学处在一个飞速发展的阶段。在此期间,检验人员知识结构发生了明显变化,加快了检验医学管理理念的不断更新,这对检验人员提出了更高的要求[1]。为了培养高素质的医学检验人才,加强他们的竞争力,在临床实习教学中特     

白细胞介素-18抑制小鼠Lewis肺癌生物学活性及其机制

80年代中期形成的生物调节理论产生了第四大肿瘤疗法-肿瘤生物治疗,在抗肿瘤基础研究与临床实践上愈益显示出其独特的疗效,可望为肿瘤防治开辟一个新的局面[1].白细胞介素-18(IL-18)是新近发现的多效能免疫调节细胞因子.本实验旨在观察其对小鼠Lewis肺癌移植瘤增殖生长与转移的抑制作用,并探讨其作用机制. 一、材料与方法 1.材料:Lewis肺癌细胞株,由福建医科大学药学院惠赠.C57BL/6小鼠,6周龄,雄性,体质量(20±2)g,购自上海斯莱克实验动物有限公司.     

脑钠肽检测的临床应用进展

脑钠肽(BNP)有利钠、利尿、扩张血管及松弛平滑肌作用和对抗心室重塑,减少心肌肥厚和心室扩大的作用.BNP血浆浓度是监测许多疾病发生、发展、预后的一项良好指标,尤其在心血管疾病.检测血浆BNP水平是心肺疾病鉴别诊断.心血管疾病诊断和评估疗效、预后以及指导改善预后的重要指标.     

混合皮肤移植中自体角朊细胞表达B7-H1 诱导免疫抑制的相关研究

目的:探讨自体角朊细胞表达的B7-H1 分子在混合皮肤移植中的作用和相关机制。方法:体外模拟混合皮肤移植模拟系统(MELC 体系),通过流式细胞术检测角朊细胞B7-H1 和淋巴细胞PD-1 的表达。同时,实时荧光定量PCR 检测淋巴细胞IL-10、Foxp3、GATA-3 mRNA 的表达。结果:流式细胞仪检测结果显示,在有自体角朊细胞参与的MELC 体系中,随着作用时间增加,角朊细胞上B7-H1 的表达和淋巴细胞上PD-1 的表达水平均明显升高,且具有时间依赖性(P<0.01);实时荧光定量PCR 检测结果显示,随着作用时间增加,与无自体角朊细胞参与的MELC 体系相比,在自体角朊细胞参与的MELC体系中,淋巴细胞IL-10、GATA-3、Foxp3 mRNA 的表达水平均明显升高,且具有时间依赖性(P<0.01)。结论:在体外混合皮肤移植模拟系统中,自体角朊细胞通过表达共刺激分子B7-H1,上调淋巴细胞表面PD-1 的表达,二者相结合,诱导Th2 细胞和Foxp3+的Treg 细胞分化,从而负向调节免疫反应。     

混合皮肤移植中自体角朊细胞转染B7-1后诱导抑制功能的改变

目的 分析混合皮肤移植中自体角朊细胞转染B7-1基因后功能的改变，并探讨传统共刺激分子和MHC Ⅱ类分子等在自体角朊细胞诱导的局部免疫耐受中的作用。方法 利用建立的MELC体外模拟系统，对自体角朊细胞进行B7-1基因的转染，观察转染前后自体角朊细胞诱导抑制能力的变化，同时通过抗CTLA-4单抗及HLA Ⅱ类分子的封闭实验，观察这些分子在自体皮岛抑制效应中的作用。结果 自体角朊细胞转染B7-1基因后，诱导局部免疫抑制的能力消失，如果加入抗B7-1单抗阻断B7-1的作用后，其诱导抑制的能力又恢复；抗CTLA-4单抗不能阻断自体角朊细胞在实验体系中的抑制作用；用单抗所作的封闭实验结果表明。抗HLA-DR单抗封闭组对自体角朊细胞对MELR抑制诱导的影响最小（P〉0．05），抗DQ单抗则可以对MELR的抑制得到最大幅度的回复，而抗DP单抗也可以使体系中cpm值有一定的回升。结论 混合皮肤移植中，自体角朊细胞之所以可以诱导局部免疫耐受，是通过B7-1以外的其他共刺激信号激活Th2亚群、进而遏制Th1亚群来诱发抑制的，而且这种抑制与CTLA-4的负向调节无关。并具MHC限制性。