应用抑制性消减杂交筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因

目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因。方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中进行同源性比较和分析。结果:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库。选取部分阳性克隆进行杂交筛选,其中5个测序成功,与GenBank数据库进行初步比对,3个可能为新基因,2个为已知基因(Tn3926转座子部分的转座酶基因及23SrRNA核糖体核糖核酸)。结论:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库并获得了其耐多药相关基因,提示转座子介导的耐药机制可能在志贺菌基因转移耐多药中起重要作用。     

带下病中医辨证分型与霉菌、滴虫感染的关系分析

目的：探讨带下病中医辨证与霉菌、滴虫感染的关系。方法：通过对带下病患者阴道及子宫颈环境当中的滴虫、霉菌、支原体等病原体感染的实验分析,以探讨其与带下病各证型之间的联系。结果：带下病脾虚湿困型与阴虚挟湿型以滴虫感染为主;湿热下注型与湿毒蕴结型以霉菌感染为主;带下病脾虚湿困和湿毒蕴结型患者感染解脲支原体的可能性大于其他类型,可能与“湿”邪有一定相关性。结论：现代实验方法有助于对中医证本质的认识。     

志贺菌敏感株与诱导耐多药株蛋白质组学分析

目的对志贺菌敏感株与诱导耐多药株全菌蛋白进行蛋白质组学比较，寻找细菌耐多药相关蛋白。方法采用4类抗生素的次抑菌浓度，对临床分离鉴定的志贺菌敏感株进行诱导耐多药试验；对志贺菌敏感株及诱导耐多药株全菌蛋白进行双向电泳；电泳图谱采用ImageMaster2DPlatinum软件分析；差异表达蛋白进行基质辅助激光解吸飞行时间质谱（MOLDITOF-TOF质谱）分析。结果成功获得志贺菌诱导耐多药株，在志贺菌敏感株与耐多药株全菌蛋白质图谱中分别检测出（946±37）个和（1096±189）个蛋白质斑点；共发现48个差异表达的蛋白点，其中5个质谱鉴定为ABC转运蛋白、谷胺酰转肽酶、天冬氨酸氨甲酰基转移酶、翻译延长因子Tu、单链DNA结合蛋白；其中前3个蛋白中在耐多药株中表达量增强，后2个减弱。结论5个耐多药相关蛋白中在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量上调；ABC转运蛋白在志贺菌诱导耐多药机制中起重要作用。     

郑州市医护人员心理健康状况调查

目的:调查医护人员心理健康状况,为医护人员开展心理健康教育提供理论依据.方法:采用一般健康问卷(GHQ-12)、艾森克人格问卷简式量表中国版(EPQ-RSC)、简易应对方式问卷(SCSQ)和社会支持问卷(SSRS),对郑州市190名5所省市级医院的医护人员(医生87例,护士103例)心理健康相关因素进行分析.结果:护士心理健康总分及消极应对分均高于医生(t=2.90,P=0.004 1;t=2.14,P=0.034 0),人格评分不同性别与常模比较,精神质分与神经质分均高于常模(P＜0.001);多因素分析显示医生的复相关系数R=0.763 0,决定系数R2=0.582 1;护士R=0.685 6,R2=0.470 0,医生积极应对应激事件能力高出护士近1倍.医生心理健康状况变化受社会支持、应对方式、个性的影响程度约为58.21%,而护士为47.00%.结论:护士要提高医学理论知识和医疗技能,面对应激事件才能改变消极应对方式.     

化痰活血益气方对异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚大鼠神经内分泌因子以及Akt信号磷酸化的影响

目的:探讨化痰活血益气方的抗心肌肥厚作用及对神经内分泌因子血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(aldosterone,ALD)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)及Akt信号磷酸化水平的影响。方法:采用异丙肾上腺素(Isoproterenol,Iso)诱导的大鼠心肌肥厚模型(1mg/kg/d,s.c.,连续10d)。48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、复方低剂量组(4.88mg/kg/d)、复方中剂量组(9.77mg/kg/d)、复方高剂量组(19.53mg/kg/d)和卡托普利组(0.02mg/kg/d),每组8只。14 d相应药物干预后,测定左心室重量指数(left ventricle mass index,LVMI)、全心重量指数(heart mass index,HMI),ELISA法检测血清AngⅡ、ALD、ET-1的含量,Western blot法检测心肌组织Akt蛋白水平及其活性形式p-Akt蛋白水平的表达并计算p-Akt/Akt比率。结果:与正常组相比,模型组大鼠的LVMI、HMI、AngⅡ、ALD、ET-1和p-Akt/Akt比率均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,复方低、中、高剂量组与卡托普利组的LVMI、HMI、AngⅡ、ALD、ET-1和p-Akt/Akt比率均有不同程度的降低,复方中剂量组的上述各项指标始终存在显著性差异(P<0.05)。结论:①化痰活血益气方可以有效改善Iso诱导的心肌肥厚并降低神经内分泌因子AngⅡ、ALD、ET-1含量;②在各剂量组中,等效于成人剂量的中剂量组疗效最好,且该组疗效优于卡托普利组;③该复方可能通过抑制Akt信号的磷酸化来发挥其抗心肌肥厚作用。     

贞红生发酊对体外培养小鼠毛囊生长与形态学的影响

目的探讨贞红生发酊对小鼠触须毛囊体外培养生长速度与形态学改变的影响。方法将离体培养的小鼠触须毛囊分别置入对照组和高、中、低3种浓度的贞红生发酊溶液中,显微镜下观察各组毛囊生长速度及形态学变化。结果生发酊各组毛囊生长速度均大于对照组(P<0.05或P<0.01),而生发酊各组间以1.0g/L组生长作用最佳(P<0.05)。对照组第8天毛囊出现退行性变化,而生发酊各组毛囊仍维持生长期毛囊形态,且以1.0g/L组毛囊生长情况最佳,部分毛囊生长可达20d以上。结论贞红生发酊对体外培养的小鼠毛囊生长有明显的促进作用,并能较长时间保持毛囊的生长形态。     

以人群为基础的食管癌高发区危险因素病例对照家系研究

目的 探讨食管癌高发区食管癌发生的危险因素,为食管癌的综合防治提供理论依据.方法 采用以人群为基础的病例一对照家系研究方法,在河南省食管痛高发区以匹配方式选择病例和对照家系各505户,家庭成员各1171名,进行以家庭为单位的问卷调查,应用单因素和多因素logistic回归模型分析食管癌危险因素.结果 病例组和对照组比较,食用炯熏食物[2.10%(36/1711),0.82%(14/1711);X2=9.82,P=0.00;OR=2.61,95%C/:1.40～4.85],常吃油炸食品[7.17%(66/921),3.91%(35/894);X2=9.13,P=0.00;OR=1.90,95%C/:1.24～2.89],常吃生硬食物[13.36%(123/921),8.95%(80/894);X2=8.87,P=0.03;OR=1.57,95%CI/:1.16～2.11],喜食热烫食物[20.05%(343/1711),15.20%(260/1711);X2=13.87,P=0.00;OR:1.40,95%C/:1.17～1.67],有精神刺激史[6.72%(115/1711),3.10%(53/1711);X2=24.06,P=0.00;OR=2.25,95%CI:1.62～3.14]和有E消化道不适症状[19.40%(332/1711),12.74%(218/1711);X2=28.15,P=0.00;OR=1.65,95%CI:1.37～1.99]等因素,是食管癌发生的危险因素.而进食速度较快则显示是保护因素[20.85%(192/921),25.14%(225/895);X2=4.73,P=0.03;OR=0.78,95%Cl:0.63～0.98].结论 食管癌发生是多因素综合作用所致,要从生活行为方式、环境因素、社会心理因素和生物遗传因素等多方面进行综合防治.     

电针结合鳖甲煎丸对肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡及JNK信号通路的影响

目的:观察电针结合鳖甲煎丸对H22肝癌小鼠肿瘤抑制作用及JNK信号通路的影响。方法:建立H22肝癌小鼠模型,将100只肝癌小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、电针组、鳖甲煎丸组、针药联合组,小鼠治疗14 d后,取肿瘤组织称重,计算抑瘤率;采用Western blot方法检测肿瘤组织Bcl-2、Bax、JNK、p-JNK蛋白表达情况。结果:针药联合对H22小鼠肿瘤生长有明显抑制作用;Western blot结果表明针药联合能明显降低Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,促进JNK蛋白磷酸化。结论:针药联合可通过激活JNK信号通路,降低抑凋亡蛋白Bcl-2表达,提高促凋亡蛋白Bax表达,调整Bcl-2/Bax比值,进而发挥抑瘤作用。