缺血期急性高血糖对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 探讨缺血期急性高血糖对大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)后心肌损伤的影响,并分析血糖水平与心肌损伤之间的关系.方法 在制备急性大鼠MI/R(缺血30min,再灌注6h)模型的基础上,静脉输注高浓度的葡萄糖溶液,造成2个不同浓度的缺血期急性高血糖动物模型.将32只SD大鼠随机平均分配为4组:(1)假手术组(SHAM),(2)生理盐水对照组(CON),(3)高糖1组(HG1)和(4)高糖2组(HG2).术中监测血糖水平,再灌注结束后检测心肌酶谱水平和心肌梗死面积(IS).结果 (1)与CON组相比较,HG1组和HG2组缺血期血糖水平均显著升高,分别为(10.5±1.0)、(18.0±1.2)mmol/L vs(4.7±0.7)mmol/L(P<0.05).(2)HG1组和HG2组的血肌酸激酶和乳酸脱氢酶水平明显升高,且心肌酶谱与血糖水平存在正相关(r分别为0.80和0.73,P<0.01).(3)HG1组的IS较CON组有扩大趋势,但差异无统计学意义[(40.8±5.2)%vs(37.6±5.8)%,P>0.05),HG2组的IS明显扩大[(45.6±8.5)%v8(37.6±5.8)%,P<0.05],且IS与血糖水平存在正相关(r=0.57,P<0.01).结论 缺血期急性高血糖加重大鼠MI/R损伤,且血糖水平与心肌酶谱和IS之间存在正相关.     

丝裂原激活蛋白激酶抑制剂对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的阻断效应

目的观察丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂对弓形虫速殖子侵入细胞的影响。方法 IFA 荧光标记检测在不同剂量抑制剂作用下及在不同时间其宿主细胞感染速殖子的差异;SDS-PAGE 和 Western blot 分析 MAPK 的表达及其相对活性。结果在 PD980591μM 和10μM 作用下其感染率仅分别为对照组的18.00%(u=9.03,P<0.01)和14.80%(u=7.93,P<0.001);在 PD98059 50μM 作用下宿主细胞感染率在24h 和48h 分别为对照组的55.45%(u=3.58,P<0.01)和49.15%(u=4.08,P<0.01);与对照比较,其 MAPK 的相对活性明显下降,10μM 和50μM 组分别降低了43.03%(u=2.72,P<0.01)和78.79%(u=5.74,P<0.001)。结论 PD98059通过作用于 MAPK 信号转导途径而抑制速殖子侵入宿主细胞的过程。     

高龄食管癌患者的手术治疗

70岁以上高龄食管癌患者由于各脏器的生理功能减退，对手术耐受性较差，术后并发症及病死率明显高于60岁以下的青壮年。但为了延长患者的生命及提高生活质量，手术切除病变仍是目前有效的治疗措施。1998年9月～2005年9月，我们共收治高龄食管癌患者185例，其中162例进行手术治疗，疗效满意。现报告如下。     

Tat-GFP融合蛋白的表达纯化及其穿膜活性

目的：获得具备穿膜活性与绿色荧光蛋白（GFP）标记的Tat-GFP融合蛋白,探讨Tat-GFP在MCF-7细胞中的跨膜转运特性。方法：应用pET-24a-Tat-GFP质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,检测不同异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）浓度（0.5和1.0 mmol•L^-1）和不同温度（22℃和37℃）诱导融合蛋白的表达情况;利用Ni-IDA树脂亲和纯化Tat-GFP蛋白,利用GFP特异性抗体采用Western blotting法分析洗脱液中的蛋白;激光共聚焦荧光显微镜下检测Tat-GFP融合蛋白的跨膜转运活性。 结果：0.5和1.0 mmol•L^-1 IPTG诱导出的细菌总蛋白中所含的Tat-GFP蛋白量无明显差异;低温（22℃）诱导生产的Tat-GFP蛋白量较37℃更高;Western blotting分析,GFP抗体能够特异性识别PVDF膜上的蛋白,条带灰度与Tat-GFP蛋白上样量有关联;细胞穿膜实验,绿色荧光分布于MCF-7细胞的细胞质和细胞核中。 结论：低温诱导时大肠杆菌BL21菌体上清液中Tat-GFP融合蛋白量更高,所生产的Tat-GFP融合蛋白既具备穿膜活性又具有易于检测的绿色荧光。     

脐血间充质干细胞移植对大鼠肺动脉高压的治疗作用研究

目的:观察脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对SD大鼠肺动脉高压(PAH)的治疗作用。方法:将60只健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组15只(n=15),即①正常对照组:不做任何处理;②模型组:以腹主动脉-腔静脉瘘分流术(abdominal aortocaval fistula shuning,A-VF)+单野百合碱(monocrotaline,MCT)注射建立大鼠PAH模型,故也可称为A-VF+MCT组;③干细胞移植组:在建立PAH模型后4周,经尾静脉注射Ho-echst 33342荧光染料标记的脐血MSCs,故此组也可称A-VF+MCT+MSCs组;④培养液对照组:在建立PAH模型后4周,经尾静脉注射培养脐血MSCs的培养液,故此组也可称为A-VF+MCT+培养液组。4周后以右心导管法测定平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥厚指数[RVHI=RV/(LV+S)]、肺小动脉中层厚度占血管外径的百分比[MA(%)]和血管壁中层横截面积占血管总横截面积的百分比[MA(%)],观察肺小动脉重构情况。检测血流动力学、肺小动脉重塑及脐血MSCs的定植情况。结果:与正常对照组比较,造模实验证实,4周后A-VF+MCT组大鼠可形成典型的PAH,8周后mPAP明显增高,动脉中膜明显增厚,右心室出现明显肥厚;而A-VF+MCT+MSCs组大鼠mPAP、RV/(LV+S)、MT%和MA%均显著下降(P<0.01)。PAH大鼠死亡率从66.7%下降到13.3%。荧光显微镜观察显示脐血MSCs已成功定植到肺血管内膜。结论:以A-VF+MCT建立的大鼠PAH模型可形成重度PAH。脐血MSCs移植能显著降低肺动脉压力,减轻肺小动脉重构及右心室肥厚,显著降低PAH大鼠的死亡率。     

非放射性马来丝虫DNA探针pBm15-F-Dig的制备及其用于微丝蚴检测的研究

本文报道以异羟基洋地黄毒苷配基(Dig)标记种特异的马来丝虫重组DNA片段,制备非放射性DNA探针,并用于微丝蚴检测的初步结果。含有马来丝虫特异DNA片段的重组质粒pBm15转化入感受态大肠杆菌JM101,筛选扩增后提取质粒DNA,经限制性内切酶EcoRI/SalI消化,低融点琼脂糖凝胶电泳分离特异片段,随机引物法以Dig标记。检测结果表明,该探针可检出lpg同源DNA,240pg的微丝蚴DNA,100μl病人血样中的3.5～7条微丝蚴,与10ng的人白细胞DNA和正常人血样不发生杂交反应。     

老年患者院内感染原因分析及其预防措施

近年来 ,由于广谱抗生素的使用甚至滥用 ,以及医院布局及消毒隔离措施不尽人意 ,加之医院对感染统计的重视和确诊率的提高 ,使院内感染率有上升趋势。老年人由于免疫能力下降 ,生理功能减退 ,更易受到多种致病菌的侵袭 ,为此 ,作者对医院干部病房 2 0 0 1年 8月～ 2 0 0 4年 10     

聚乙二醇电解质散在腹腔镜术前肠道准备中的应用

腹腔镜手术前肠道准备的清洁程度直接影响手术的进行。传统的肠道准备方法为清洁灌肠,患者要忍受反复插入肛管的痛苦,且因肠道准备时间长(术前1日晚及术日晨),容易出现脱水和电解质紊乱。近年来,聚乙二醇电解质散在国外已广泛应用于肠道准备[1]。国内周平红等[2]为44例接受结肠     

老年人心绞痛的观察及护理

目的:在临床护理工作中,对老年人主诉的心前区不适者,应提高警惕,减少诱发因素,加强护理和观察.方法:通过临床药物观察,加强健康教育,改进注射方法以及心电图检查等方法收集资料.结果:减少了用药的反应,避免延误病情,减少了并发症的发生.结论:对老年人主诉的心前区不适者,加强观察和护理,可避免心绞痛发作导致严重并发症的发生.     

刚地弓形虫细胞培养的研究：Ⅲ.不同毒力株速殖子培养检出时间的差异

本文观察了弓形虫ＲＨ株，Ｐｒｕｇｎｉａｕｄ株和８株源自羊水等标本的野生株速殖子，在以单核细胞ＴＨＰ－１作为受污染细胞的培养系统中不同接种量其检出时间的差异，结果表明，ＲＨ株和Ｐｒｇｎｉ－ａｕｄ株各不同接种量最早可在１～４ｄ内获阳性结果，而野生株仅１株可检测一每管（２ｍｌ）１０速殖子的接种量（第１４ｄ）１００速殖子接种量６／８株在第１４ｄ检获阳性，提示在以细胞培养进行弓形虫病原检测时适当延长培养检测