小脑扁桃体下疝24例治疗回顾性分析

目的:分析小脑扁桃体下疝畸形的手术治疗及效果。方法:将我院2010年1月~2013年3月接待的24例小脑扁桃体下疝畸形患者作为研究对象,对他们的临床资料进行回顾性分析,全部采用后颅窝减压术,将患者的部分小脑扁桃体切除,并采用人工补片的方式扩大修补硬膜。结果:24例患者皆顺利完成了手术,在术后1个月进行了复查,并采用GOS评分(格拉斯哥预后评分)对疗效进行评价,其中效果评分为好有19例患者,百分比为79.17%,评分为差的患者有5例,百分比为20.83%。所有患者进行了4个月~1年的随访,对患者症状改善采用Tator标准进行评价,显示症状明显改善16例,症状部分改善6例,症状无明显改善2例,总有效率91.67%(22/24);此外,在随访的时候,并未发现患者出现脑膨出、脑脊液漏及颅内感染等并发症。结论:对于小脑扁桃体下疝畸形患者而言,采用合理的后颅窝减压术治疗,同时给予人工补片扩大修补硬膜,那么除了可以改善患者的临床症状之外,对于并发症的预防也能起到很好的效果,值得临床推广及应用。     

Mollaret脑膜炎脑脊液细胞学研究

Mollaret脑膜炎又称良性复发性无菌性脑膜炎（recurrent benign aseptic meningitis）,是脑膜炎的罕见形式,目前全球报道例数不多。本文收集了10例Mollaret脑膜炎的脑脊液细胞学资料,结合临床资料进行分析和讨论,以指导Mollaret脑膜炎的诊断。     

山西营养与慢性病家庭队列人群体质指数与死亡率的关系

目的 分析山西营养与慢性病家庭队列人群BMI与总死亡率的关系。方法 以"2002年中国居民营养与健康状况调查"山西省调查人群为基线建立队列，于2015年12月至2016年3月对研究对象进行随访调查，对逝者进行死因回顾调查。2002年基线信息完整的≥ 18岁研究对象7 007人，随访到5 360人，随访率为76.5%。将研究对象按BMI分为8组，计算死亡率，以死亡率最低组作为参照，采用Cox比例风险回归模型估计全人群、分性别、年龄（≥ 60岁、<60岁）的各组死亡风险比（HR）及95% CI，模型调整基线年龄、性别、吸烟、饮酒、文化程度等因素，并进行敏感性分析。结果 共随访67 129人年，平均随访12.5年，死亡615人，队列总死亡率为916/10万人年。BMI为26.0~27.9 kg/m²组死亡率最低，以该组为参照组，多因素调整后，BMI<18.5、18.5~19.9、22.0~23.9和≥ 30.0 kg/m²组的死亡风险明显升高，调整HR值（95% CI）分别为1.90（1.26~2.86）、1.68（1.15~2.45）、1.49（1.08~2.06）和1.72（1.07~2.76）。对于≥ 60岁老年人，BMI<18.5 kg/m²组的死亡风险明显升高，调整HR值（95% CI）为1.94（1.20~3.15）。结论 BMI ≤ 19.9、22.0~23.9及≥ 30.0 kg/m²均会增加全因死亡风险。除关注肥胖外，低体重营养不良造成的老年人高死亡风险应特别引起重视。     

肌动蛋白和Tau蛋白荧光蛋白融合载体的构建、表达及其细胞内定位

背景：肌动蛋白和Tau蛋白分别是微丝和微管的重要组成成分,肌动蛋白和Tau蛋白的分布能否作为微丝和微管的观察指标。 目的：构建肌动蛋白和Tau蛋白的红色和绿色荧光蛋白融合表达载体并转染真核细胞,观察其在细胞内的表达和定位情况。 设计、时间及地点：单一样本观察实验,于2008-03/08在南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室共同完成。 材料：克隆在pcDNA3载体上的肌动蛋白和Tau蛋白真核表达载体pcDNA3-actin和pcDNA3-Tau,以及红色荧光蛋白表达载体pmCherry-C2和绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C2、大肠杆菌株DH5α和小鼠NIH3T3细胞系由南方医科大学病理生理学教研室保存。 方法：将克隆在pcDNA3上的肌动蛋白和Tau蛋白亚克隆到红色荧光蛋白载体pmCherry-C2和绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2上,然后转染NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察重组载体的表达和细胞内定位。 主要观察指标：NIH3T3细胞转染24 h后,利用Leica荧光显微镜观察上述重组载体在细胞中的表达和定位情况。 结果：重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在NIH3T3细胞中可获得高量表达。融合蛋白发出的红色和绿色荧光均表明,肌动蛋白在细胞质中呈短丝状弥散分布,Tau蛋白以细胞核为中心呈放射状排列。 结论：成功构建了肌动蛋白和Tau蛋白的不同荧光蛋白融合表达载体,并在真核细胞中得到有效表达,这为研究细胞骨架在信号分子移位中的作用提供了一个重要的工具。     

人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达

目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白。结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小)。结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达。     

星形胶质细胞条件培养液对tbOOH致PC12细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物tbOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法 以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流式细胞术测定细胞凋亡率的变化;用巴比妥酸法评估细胞内丙二醛含量的变化。结果 tbOOH可诱导PC12细胞凋亡,而星形胶质细胞条件培养液可降低其凋亡;同时,巴比妥酸法显示星形胶质细胞条件培养液可显著性降低PC12细胞丙二醛含量(P<0.05)。结论 星形胶质细胞条件培养液有提高PC12细胞抗氧化能力,可抑制活性氧tbOOH诱导的神经细胞凋亡。     

PSF真核表达载体的构建及细胞内表达和定位

目的构建小鼠多嘧啶束结合蛋白相关剪切因子（PSF）真核表达载体并在小鼠Hepa1-6肝癌细胞内表达,观察PSF胞内定位及脂多糖（LPS）对其定位的影响。方法提取小鼠肝组织总RNA,RT-PCR扩增小鼠PSF基因的蛋白编码序列;采用基因重组技术将其亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,将该载体瞬时转染Hepa1-6细胞,通过细胞免疫荧光方法观察PSF的胞内表达及LPS对其定位的影响。结果酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;细胞免疫荧光可见PSF在Hepa1-6细胞内表达后只分布于细胞核,LPS刺激后PSF分布无明显变化。结论成功构建PSF真核表达载体,为研究PSF在基因表达调控中作用及其生物功能提供了重要载体;进一步证实PSF为定位于细胞核的核蛋白。     

人GFP—AWP1融合基因载体的构建及其在293细胞中的表达

目的 克隆、构建绿色荧光蛋白(GFP)-AWPI(associated with protein kinase Crelated kinase I，AWPI)表达载体,观察AWPI在293细胞中表达和定位。方法 采用逆转录PCR(RT—PCR)法从人ECV304内皮细胞中扩增AWPI cDNA编码区．并将其重组于GFP表达载体pEGFP—C2中。经酶切，序列鉴定分析后，将该重组质粒通过DOTAP脂质体介导，转染293细胞。荧光显微镜观察AWPI在细胞内的表达和分布。结果 GFP—AWPI融合基因表达载体经酶切鉴定和测序分析确认构建成功，并在293细胞中获得了高效表达。荧光显微镜下，在不携带外源基因的空载体pEGFP—C2转染的对照组293细胞,绿色荧光均匀分布于整个细胞中；在重组质粒pEGFP—C2／AWPI转染的293细胞，绿色荧光弥散分布于细胞质内。结论 成功构建GFP—AWPI融合基因表达载体并表达于293细胞胞质中。     

严重急性呼吸综合征患者细胞因子与趋化因子表达谱的特征

由于严重急性呼吸综合征(SARS)的免疫病理机制尚未阐明,目前尚无有效药物或治疗方法能够控制这种疾病.为了探讨SARS发病的免疫学机制,我们研究了SARS患者外周血细胞因子与趋化因子的表达谱以及肺和淋巴组织的免疫病理改变.采用液相芯片技术,动态扫描了23例诊断明确的SARS患者血中14种细胞因子与趋化因子;应用反转录PCR、免疫组化和免疫荧光技术对SARS死亡患者经尸体解剖的肺和淋巴组织进行免疫病理学观察.