逍遥散超临界CO2提取工艺及提取物GC-MS特征图谱初步研究

该文为了初步确定逍遥散超临界CO₂提取的最佳工艺条件,并建立提取物的气相色谱-质谱（GC-MS）特征图谱,以提取物得率为考察指标,采用正交试验设计方法,对提取压力、提取温度、CO₂流量、提取时间等因素进行考察;采用GC-MS对不同批次的提取物进行特征图谱分析。逍遥散超临界CO₂提取的最佳工艺条件为提取压力20 MPa,提取温度50 ℃,CO₂流量25 kg·h^-1,提取时间3 h,提取物平均得率2.2%。GC-MS特征图谱中确定27个共有峰,占总峰面积的81.89%,其中指认出21个化合物,占提取物总量的53.20%。超临界CO₂萃取工艺合理可行,GC-MS方法准确可靠,重复性好,可用于逍遥散超临界CO₂提取物的制备及质量控制。     

基于外周血单个核细胞转录组学的柴归颗粒抗抑郁作用机制研究<

目的 通过转录组测序（RNAsequencing,RNA-seq）技术分析柴归颗粒对慢性不可预知温和应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）模型大鼠外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）的转录组学特征，并采用qRT-PCR法验证其作用机制。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、盐酸文拉法辛（35 mg/kg）组和柴归颗粒低、中、高剂量（4.2、8.3、16.6 g/kg）组，造模同时给药，连续28 d。通过抑郁症传统药效学指标（体质量、旷场实验、糖水偏爱实验及强迫游泳实验）评价柴归颗粒的药效。采用RNA-seq技术对大鼠PBMCs进行转录组学分析，筛选差异基因，对其进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）分析；通过qRT-PCR法对筛选出的关键表达基因进行实验验证。结果 行为学指标显示柴归颗粒能显著改善CUMS模型大鼠的抑郁行为。转录组学中KEGG通路富集分析表明抑郁发生时及柴归颗粒干预后，都显著富集到嘌...     

代谢组学研究复方柴归方超临界CO2提取物抗抑郁作用及其机制

采用小鼠悬尾试验（TST）、强迫游泳试验（FST）以及大鼠慢性温和不可预知应激（CUMS）模型评价复方柴归方超临界CO₂提取物（FFCGF）的抗抑郁作用;采用核磁共振代谢组学的方法,结合多元统计分析技术探讨FFCGF的抗抑郁作用机制。大鼠进行为期28 d的CUMS程序造模,药物干预28 d,与CUMS造模同时进行,造模过程中观察大鼠体重、糖水偏爱、穿越格数和直立次数的变化,造模结束后收集大鼠尿液,应用¹H-NMR技术结合多元统计分析方法分析大鼠尿液内源性代谢产物的变化规律,寻找潜在的生物标志物。结果显示FFCGF能明显减少小鼠悬尾试验和强迫游泳试验的不动时间,改善CUMS模型大鼠的体重、糖水偏爱、穿越格数和直立次数,说明FFCGF具有明确的抗抑郁作用。代谢组学结果显示空白组和模型组能明显区分,CUMS模型大鼠尿液中甘氨酸和丙酮酸含量显著升高,醋酸、琥珀酸、2-氧化戊二酸和柠檬酸含量显著降低（P < 0.05,0.01）,FFCGF能够明显调节CUMS程序引起的6种生物标志物的含量变化,使其恢复正常。FFCGF可能通过调节能量代谢、脂质代谢和氨基酸代谢发挥抗抑郁作用。     

基于肝脏代谢组学的柴胡-白芍药对抗抑郁作用机制研究

利用LC-MS代谢组学技术,分析柴胡-白芍药对对慢性不可预知温和应激抑郁(CUMS)大鼠肝脏内源性代谢物代谢紊乱的调控作用,明确柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控途径。将大鼠随机分为正常对照组、CUMS模型组、文拉法辛阳性药组和柴胡-白芍药对高、低剂量组,造模及给药持续28天。通过抑郁症传统药效学指标(大鼠体重、旷场实验、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴胡-白芍药对的药效。动物实验获得山西大学伦理委员会的批准(批准号:SXULL2016036)。采用UHPLC-Q Exactive Orbitrap-MS代谢组学技术分析柴胡-白芍药对对CUMS模型大鼠肝脏代谢轮廓调节作用,探讨柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控机制。结果显示柴胡-白芍药对能显著改善CUMS模型组大鼠的抑郁样行为;通过LC-MS代谢组学技术共鉴定指认出25种与抑郁相关的生物标志物,柴胡-白芍药对能显著回调其中的16种;代谢通路分析显示D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,谷胱甘肽代谢为其改善CUMS模型大鼠肝脏代谢紊乱的主要途径。     

微柱凝胶免疫检测技术在新生儿溶血病检测中的应用

目的探讨微柱凝胶免疫检测技术在新生儿溶血病（HDN）诊断的临床应用。方法选择该院收治的疑诊HDN患儿163例,采用微柱凝胶免疫检测技术进行直接抗人球蛋白试验、游离试验以及放散试验。结果 163例患儿共确诊72例HDN,ABO血型系统所致HDN占93.06%,其中,A型30例,B型37例;Rh血型系统所致HDN占6.94%;出生时间不超过3d的新生儿HDN阳性发生率明显高于出生3d以上的新生儿。结论微柱凝胶免疫检测检测HDN具有准确、操作简单、标本用量少以及敏感性高等优点。     

逍遥散抗抑郁有效部位配伍对应激抑郁模型小鼠行为学及睡眠时间的影响

目的研究逍遥散抗抑郁有效部位(A,B4,B3)配伍对应激抑郁模型小鼠行为学及睡眠时间的影响。方法逍遥散抗抑郁有效部位采用L9(34)正交设计进行配伍研究,以配伍后的组份及文拉法辛为干预药物,灌胃给予15 d的实验药物。实验过程中,定期测定小鼠体重与自主活动。于第14天给药后1 h,采用急性应激抑郁模型(小鼠悬尾)观测配伍组份对小鼠悬尾不动时间的影响,初步筛选最佳配伍比;第15天给药后1 h,各组小鼠按45 mg/kg腹腔注射阈剂量的戊巴比妥钠生理盐水注射液,准确记录注射结束时间、翻正反射消失时间、翻正反射恢复时间。观测配伍组份对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响。结果与空白对照组比较,当配伍部位按生药量计,A为138.9 g/kg,B4为46.3 g/kg,B3为23.1 g/kg时,可显著减少小鼠悬尾不动时间(P<0.001),且不影响小鼠自主活动量,并能够明显延长小鼠睡眠潜伏期(P<0.01)和显著地缩短小鼠睡眠持续时间(P<0.001)。结论逍遥散抗抑郁有效部位按生药量计,A为138.9 g/kg,B4为46.3 g/kg,B3为23.1 g/kg时,抗抑郁作用最佳,且在最佳配伍比时,能明显缩短阈剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间。     

逍遥蒌贝胶囊的质量标准研究

目的建立逍遥蒌贝胶囊的质量控制方法。方法采用薄层色谱法（TLC）对处方中白术、当归、浙贝母和柴胡进行定性鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）测定处方中芍药苷的含量,色谱柱：Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×200 mm,5μm）;流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（30∶70,v/v）;流速：1.00 mL.min-1;检测波长：232 nm;进样量10μL。结果薄层鉴别的色谱斑点清晰,特征斑点对应性强,阴性对照无干扰;芍药苷进样量在65～1 300 ng范围内与峰面积具有良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.43%（n=6）,RSD为1.97%。结论所建立的方法简便、准确、重现性好,可作为逍遥蒌贝胶囊的质量控制标准。     

散射比浊法检测尿微量白蛋白对糖尿病早期肾损害的价值

为探讨糖尿病肾病的早期检测手段,笔者对73例2型糖尿病患者的晨尿及随意尿的微量白蛋白（mAlb）进行了联合检测。旨在探讨晨尿及随意尿mAlb联合检测对糖尿病肾损伤早期诊断的价值。     

滇桂艾纳香化学成分的分离与鉴定(Ⅱ)

目的分离鉴定中药滇桂艾纳香的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果分离得到10个化合物,分别鉴定为:环(亮-脯)二肽(1)(、24S)豆甾-4-烯-3-酮(2)(、24S)豆甾-4-22-二烯-3-酮(3)、二氢槲皮素-4′-甲醚(4)、丁香酸(5)、没食子酸(6)、香草酸(7)、呋喃甲酸(8)、水杨酸(9)、咖啡酸(10)。结论化合物1~10均为首次从该植物中分离得到。     

逍遥散抗抑郁有效部位指纹图谱归属分析

目的建立逍遥散抗抑郁有效部位的HPLC指纹图谱,研究复方与组方药材指纹图谱色谱峰相关性。方法采用HPLC-UV方法,建立逍遥散有效部位及各药材在275 nm检测波长下的指纹图谱,以色谱峰保留时间为考察指标,对复方指纹图谱色谱峰归属进行分析。结果成功建立了逍遥散复方有效部位的HPLC指纹图谱,标示出27个共有峰并对其进行了归属分析。结论该指纹图谱为阐明有效部位的药效物质基础提供科学依据,为下一步的临床应用以及新药的开发提供参考。