硝酸羟胺诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变的研究

背景与目的:研究硝酸羟胺对小鼠淋巴瘤L5178Y-3.7.2c tk /-细胞tk基因突变的影响.材料与方法:使用硝酸羟胺对L5178Y细胞进行梯度染毒,再分别进行细胞毒性,细胞接种效率,相对存活率,相对悬浮生长率和突变频率测定.结果:随着硝酸羟胺的剂量增加,L5178Y细胞的相对存活率和悬浮生长率均下降.在硝酸羟胺50～500μg/ml范围内可以诱导细胞tk基因的突变率达到自发突变率几倍至十几倍.结论:硝酸羟胺对L5178Y细胞具有明显的细胞毒性,并可以诱导tk基因突变.     

1,3-丁二烯生产车间工人职业接触监测及健康影响调查

目的研究1，3-丁二烯（1，3-Butadiene，BD）生产车间作业工人职业接触水平及其对健康的影响。方法现场调查BD车间生产工艺与作业工人工作流程，结合受试对象一般健康与生活习惯背景资料，选择BD接触组（74人）与对照组（157人），确定空气监测采样点，测定BD含量，并且对受试对象进行职业健康检查。结果BD接触组工作地点空气中BD浓度为（20．79±34．95）mg/m^3，而对照组工作地点均低于仪器检测下限（〈0．5mg／m^3）；在涉及神经系统、呼吸系统以及生殖系统的主诉症状方面，BD接触组明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；BD接触组血红蛋白含量（121．38±21．74）g／L明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；BD接触组的心电图异常比例明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），主要表现为T波低平。结论BD对职业接触人群具有一定的毒性作用，可能在人体内存在多种靶器官和组织。     

乙基亚硝基脲诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因杂合性缺失

目的探讨tk基因分子突变的类型,对不同剂量乙基亚硝基脲（ENU）诱导小鼠淋巴瘤L5178Y3.2.7c-tk^＋/-细胞tk基因突变的杂合性缺失（LOH）进行分析,为环境致突变剂检测和突变机制研究提供依据。方法使用乙基亚硝基脲10μg/mL和100μg/mL剂量对L5178Y细胞进行梯度染毒,分别测定细胞毒性、细胞接种效率、相对存活率、相对悬浮生长率和突变频率等。挑选经ENU诱导的tk基因突变子（tk^-/-）和自发突变体,提取基因组DNA,应用等位基因特异性PCR扩增、杂合性缺失分析等技术,分析其杂合性缺失的发生。结果低剂量和高剂量诱导突变体的tk基因LOH发生率分别为73.5%和69.1%。LOH分析结果显示,诱导突变体的LOH在大集落与小集落之间差异具有显著性（P〈0.05）。结论功能性等位基因缺失是ENU诱导tk基因分子突变的重要形式之一,不同剂量可能具有不同的突变机制。     

PRELIMINARY STUDY OF DETECTION OF EXCISION-REPAIRABLE DNA LESIONS WITH CYTOSINE ARABINOSIDE-CYTOKINESIS-BLOCK MICRONUCLEUS TEST(ARA-CBMNT)

阿糖胞耷（ＡＲＡ）能抑制ＤＮＡ切除修复作用，从而使Ｇ０期淋巴细胞的ＤＮＡ初始损害得以固定和表达，并最终形成微核（ＭＮ）．本实验用微量全血培养法，对人淋巴细胞进行了加与不加ＡＲＡ（＋ＡＲＡ，－ＡＲＡ）的实验研究。结果本底＋ＡＲＡ组双核细胞ＭＮ率比－ＡＲＡ组增加了６．４倍，ＩＧｙＸ射线平均增加了３．３倍，ＩＧｖγ射线组平均增加３．５倍，而紫外线组平均增加了６．３倍。结果证明ＡＲＡ可显著增强ＣＢ－ＭＮＴ法对ＤＮＡ小损伤的敏感性，微量全血培养法同样适用于该方法。     

γ─射线诱导微核的电镜超微结构观察

γ─射线诱导微核的电镜超微结构观察曹佳，刘胜学，郑怀恩，程天民（重庆第三军医大学分子毒理学实验室６３００３８第三军医大学防原医学教研室）微核（ＭＮ）形成的基本机制已熟为人知，但仍有许多细节尚未搞清。如ＭＮ是否具有核膜、核仁，是否具有ＤＮＡ复制功能等等...     

用多重PCR分析60Coγ射线引起人白血病细胞HPRT基因突变

目的：探讨＾６０Ｃｏγ射线诱导人ＨＰＲＴ基因突变的分子图谱和发生机理,以及与辐射抗肿瘤的关系。方法采用单细胞克隆培养、双向筛选计数、多重ＰＣＲ扩增和电泳分析等方法。结果①随着辐射剂量的增加,细胞接种存活率下降,突变频率升高。②自发突变中９２．３％是点突变,而γ射线诱发突变主要由缺失与点突变两部分组成（两者分别为６１．７％和３８．３％）。③缺失突变可以发生于ＨＰＲＴ基因的每个子外显子,但诱发突变中绝     

丙烯酰胺诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变谱的实验研究

目的为研究丙烯酰胺(AA)致基因突变的机制提供实验依据。方法挑选经AA诱导的小鼠淋巴瘤L5178Y3．2．7c-tk^ /-细胞tk基因突变子(tk-/-)，提取基因组DNA，用等位基因特异性聚合酶链反应(PCR)扩增、杂合性缺失(LOH)分析、序列分析等技术，分析其突变谱。结果AA诱导突变体tk基因LOH发生率为78．8％。LOH的发生率随AA剂量的增加呈上升趋势，染毒剂量越大，tk等位基因缺失的发生就越严重。在大集落(LC)中，AA低剂量组(150、300μg/m1)诱导LOH的发生率(25．0％、33．3％)与自发突变组和AA高剂量组(600、750μg/ml)LOH的发生率(66．7％、77．8％、85．7％)相比，差异均有统计学意义(P＜0．05)。序列分析证实，AA诱导的tk基因点突变主要为碱基置换以及1个移码，其中碱基置换主要的类型为T：G→G：T的颠换。结论AA诱导的tk基因突变谱是以功能性等位基因缺失为主的突变类型，其次是碱基置换，移码较少发生。     

贫铀对小鼠睾丸生精细胞和精子遗传损伤的初步研究

目的　初步探讨小鼠吸入不同剂量的贫铀 (DU)气溶胶对生精细胞和精子的遗传损伤作用。方法　采用小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验、小鼠睾丸生殖细胞微核试验和精子染色质结构试验 (SCSA) ,评价DU诱导小鼠生精细胞和精子的遗传损伤程度。结果　吸入DU气溶胶组睾丸生殖细胞微核发生率与对照组相比无显著差异 ,吸入 ( 73 1 5 2± 3 5 99)和 ( 877 83± 43 19)ng gDU组小鼠睾丸初级精母细胞染色体数目畸变率为 17 2 %和 2 7 2 %,与对照组比较显著升高 (P <0 0 1) ;精子染色质结构试验中 ,对照组、吸入 ( 73 1 5 2± 3 5 99)和 ( 877 83± 43 19)ng gDU组的精子SCSA各变量平均值 :αT分别为 2 5 3 5 1± 3 1 76、2 88 2 9± 68 3 0、2 94 5 6± 72 90 ,%COMP分别为 3 73± 5 5 0、9 0 2± 4 43、9 11± 5 3 3 ,%GREEN分别为 0 89± 0 44、1 62± 1 0 6、1 80± 0 61,DU组各变量值与对照组比较均有显著增高 (P <0 0 5 )。结论　小鼠吸入贫铀气溶胶可诱导生精细胞和精子遗传损伤     

γ—射线诱发人淋巴细胞微核形成与细胞周期关系的初步研究

本研究用γ－射线诱发人外周血淋巴细胞微核，使用细胞周期控制、ＢｒｄＵ免疫荧光染色、松胞素阻滞胞质分裂等技术，研究淋巴细胞微核形成与细胞周期的定量关系。     

γ─射线诱导女性X染色体形成微核比率的研究

γ─射线诱导女性Ｘ染色体形成微核比率的研究曹佳，刘胜学，敖琳，钱频（重庆第三军医大学分子毒理学实验室６３００３８）已有观察证实随着女性年龄的增加，Ｘ染色体丢失率也增加。那么，在女性是否Ｘ染色体受报和丢失的比率要比常染色体大一些呢？本实验使用５Ｇｙγ─...