滇乌碱及其类似物镇痛效应的构效关系

目的：研究滇乌碱（Ｔ_１）、滇西嘟拉碱甲（Ｔ_２）及３－乙酰滇乌碱（Ｔ_３）的镇痛效应的构效关系。方法：小鼠扭体反应法和大、小鼠甲醛致痛法及急性毒性试验测试三药的镇痛作用强度及毒性。结果：镇痛作用Ｔ_１＞Ｔ_３＞Ｔ_２，毒性Ｔ_１＞Ｔ_２，Ｔ_１＞Ｔ_３，镇痛治疗指数Ｔ_３＞Ｔ_２＞Ｔ_１。结论：滇乌碱类生物碱３位上取代基与其镇痛效应及毒性关系密切。     

褪黑素对豚鼠回肠体外吗啡依赖性的影响

目的 观察褪黑素(MT)对豚鼠体外回肠吗啡依赖性的影响。方法 以豚鼠体外回肠为实验对象，37℃孵育3h，测定纳洛酮催发引起的戒断性收缩强度，作为产生依赖性的指标。结果 豚鼠回肠标本用含吗啡(终浓度4μmol/L)的Krebs液孵育3h，纳洛酮(终浓度为4μmol／L)可催发戒断症状(特异性收缩)；MT(终浓度800μmol／L)单独孵育3h．纳洛酮不会催发戒断性收缩；急性给MT(终浓度分别为100，200，400μmol／L)或预防性给MT(终浓度分别为25，100，400μmol／L)均可剂量依赖性地减弱回肠戒断后的特异性收缩。结论 MT可抑制回肠吗啡依赖性的产生且减弱回肠的吗啡依赖戒断性反应。     

PTEN与磷酸化tau蛋白水平在Aβ25-35诱导的AD样细胞模型中的变化

目的探讨在Aβ25-35诱导人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞和大鼠胎鼠皮层原代神经元细胞的过程中PTEN及磷酸化tau(Ser396)蛋白水平的变化。方法 40μmol/L和20μmol/L的Aβ25-35分别孵育SH-SY5Y细胞和大鼠原代皮层神经元,孵育后的不同时间点MTT法测定细胞活力,显微镜观察细胞形态的变化,免疫印迹法观测各时间点磷酸化tau(Ser396)蛋白水平来确定模型的建立;同时观察在此过程中PTEN蛋白水平的变化。结果随着Aβ25-35孵育时间的延长,SH-SY5Y细胞和大鼠皮层原代神经元细胞逐渐出现细胞活力下降,细胞胞体变圆,突起回缩甚至消失,细胞间连接断裂等现象,细胞磷酸化tau(Ser396)蛋白水平于诱导后6h升高,12～24h达到高峰;PTEN蛋白水平于3h左右开始升高,6～12h达到高峰,后逐渐下降,48h甚至低于正常对照组,且PTEN蛋白水平的升高先于磷酸化tau(Ser396)蛋白水平的升高。结论 PTEN与Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病样细胞模型的发生发展可能具有一定的关联性,在其发生早期PTEN表达可能增强。     

眼镜蛇毒MP成分对离体豚鼠回肠的收缩作用及与磷脂酶A_2活性的关系

目的探讨温度和磷脂酶A2抑制剂甲基二十碳二烯酸(DEDA)对眼镜蛇毒MP成分收缩离体豚鼠回肠作用的影响,阐明MP成分的药理作用是否依赖其磷脂酶A2(PLA2)活性。方法利用卵磷脂水解法测定在27℃和37℃下MP成分的PLA2活性;分别测定在27℃和37℃下MP成分及卡巴胆碱收缩豚鼠回肠纵行肌作用强度并比较;将豚鼠回肠纵行肌标本在浴槽中预先5 min加入PLA2抑制剂DEDA 100μmol·L-1,再测定MP成分及卡巴胆碱收缩豚鼠回肠纵行肌的作用强度,分别观察DEDA对MP成分及卡巴胆碱收缩豚鼠回肠纵行肌作用强度的差异。结果 MP成分在27℃下水解卵磷脂的酶活性仅为37℃时的55%,具有显著性差异(P<0.01)。离体实验显示,27℃和37℃组间MP成分及卡巴胆碱收缩豚鼠回肠的作用强度均不存在明显差异。与对照组相比,DEDA干预组MP成分及卡巴胆碱收缩豚鼠回肠的作用强度均无明显差异。结论 MP对豚鼠回肠纵行肌的收缩作用与其PLA2活性不存在直接相关。     

人胰岛素样生长因子-l的原核表达和纯化

目的构建高表达、易纯化的人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程菌。方法采用pET32a(+)质粒构建带羟胺裂解部位的表达载体,转入大肠杆菌DH5α进行诱导表达。表达产物经镍离子-亲和柱色谱分离后进行羟胺裂解。裂解产物纯化后用MALDI-TOF-MS法测定相对分子质量(Mr)。结果重组质粒序列完全正确。工程菌可表达预计Mr的融合蛋白,经Western blot证实有hIGF-1抗原活性。经镍离子-亲和柱色谱分离、羟胺裂解后得到的肽的Mr为7 640,和理论值相符。结论成功构建了表达hIGF-1的工程菌,为开发hIGF-1奠定了基础。     

麝珠明目散的眼刺激及长期毒性实验

目的 观察麝珠明目散对家兔眼睛的刺激反应及长期滴眼与灌胃给药对大鼠的毒性作用。方法 实验兔眼睛滴6％的麝珠明目散滴眼液每次0．2mL，1／d，连续2周，观察药物对眼有无刺激性。SD大白鼠以6％，12％麝珠明目散(0．2mL，2／d)滴眼，高剂量组加3％麝珠明目散0．2mL／100g灌胃，每周给药6d，连续10周。结束后检测血液学和血清生化指标，测脏体比并作脏器病理检查。结果 该药眼刺激实验平均得分1．25分，属无刺激。对大鼠生长发育无不良影响，测血液学、血清生化指标值均在正常范围内，病理学检查未见特异性病理改变。结论 麝珠明目散滴眼对眼睛无明显的刺激性，长期用药对肾功能有影响，但停药后可恢复。     

麝珠明目散对豚鼠实验性白内障的作用

３％和６％麝珠明目散滴眼液能显著抑制由Ｄ－半乳糖诱发的实验性白内障豚鼠晶状体混浊度的进展，也能显著减少豚鼠血清ＬＰＯ含量，但对ＳＯＤ活性无明显的影响。提示该药可明显控制、延缓白内障的发生和发展。     

丝裂原激活蛋白激酶信号转导通路在类风湿关节炎中的研究进展

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种以关节滑膜炎症为显著特征的慢性自身免疫系统疾病,其发病机制复杂且尚未完全阐明。多种细胞、细胞因子以及细胞间信号转导通路都参与了RA的发生发展,其中丝裂原激活蛋白激酶（mitogen activation protein kinase,MAPK）信号转导通路与RA发病关系紧密,在血管翳形成、滑膜炎症、骨破坏等过程中都发挥了重要作用。该文从MAPK信号通路在RA发病中与多种关键细胞、细胞因子的相互作用等方面,综述了MAPK信号转导通路在RA中的研究进展,以期为抗RA药物治疗研究提供方向和理论依据。     

渗透压冲击预处理提高金属螯合亲和色谱纯化IGF-1融合蛋白的效率

目的采用渗透压冲击预处理细菌以提高重组IGF-1融合蛋白纯化中金属螯合亲和色谱的效率。方法采用20%的蔗糖-EDTA缓冲液预处理经诱导表达的大肠杆菌,然后将表达产物经Ni-NTA-琼脂糖亲和色谱柱进行分离,观察蔗糖溶液处理对纯化效果的影响。结果经蔗糖-EDTA缓冲液预处理后Ni-NTA-琼脂糖色谱柱纯化蛋白的产量可以提高约2倍。结论渗透压冲击预处理可以有效提高金属螯合亲和色谱的效率。     

褪黑素对冈田酸致NG108-15细胞tau蛋白过度磷酸化的影响

目的 观察褪黑素（MLT）对冈田酸（OA）致大鼠神经母细胞和小鼠胶质细胞瘤细胞的杂交细胞系NG108—15细胞tau蛋白过度磷酸化的影响。方法 10nmol／LOA作用于NG108—15细胞0，3，6，12及24h，免疫细胞化学法和免疫印迹法（Western blot法）观察Ser-396位点磷酸化tau蛋白，观察MLT对细胞内Ser-396位点磷酸化tau蛋白的影响。结果 在OA作用后3h增高，6h达到峰值，之后逐渐降低。选取OA作用6h，低、高剂量MLT较模型组Ser-396位点磷酸化tau蛋白水平明显降低。结论MLT 可对抗tau蛋白过度磷酸化，可能是其发挥抗阿尔茨海默病作用的机制之一。