板蓝根有效组分的抗病毒活性研究

目的 考察板蓝根不同部位提取物,即30％醇沉多糖Ⅰ、50％醇沉多糖Ⅱ、70％醇沉多糖Ⅲ,及板蓝根水提取液的大孔树脂水洗脱部位Ⅳ、10％醇洗脱部位Ⅴ、30％醇洗脱部位Ⅵ、50％醇洗脱部位Ⅶ,以及分得的单体落叶松脂素-4,4'-二-O-β-D-二葡萄糖苷(CB) Ⅷ、异落叶松脂醇Ⅸ的抗甲型流感病毒A/PR8/34(H1N1)活性.方法 采用抗甲型流感病毒A/PR8/34(H1N1)体内实验,通过计算肺指数、肺指数抑制率等,综合检测板蓝根提取部位及单体化合物的抗甲型流感病毒作用.结果 Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ及Ⅸ可明显延长甲型流感病毒感染小鼠存活天数,与病毒模型组比较,具有显著性差异(P＜0.05),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ及Ⅸ可减少感染小鼠死亡率;同时Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及单体Ⅷ可明显降低肺指数(P＜0.05),肺指数抑制率分别为31.4％、28.5％、30.5％和34.0％.结论 板蓝根有效组分Ⅱ-Ⅸ对甲型流感病毒感染小鼠具有较好的保护作用,提示其中化合物CB可作为抗病毒的主要有效及指标性成分.     

板蓝根正丁醇部位抗病毒活性组分及相关化学成分研究

目的研究板蓝根Isatidis Radix正丁醇部位的抗病毒活性组分及相关成分。方法利用溶剂法及色谱法提取分离板蓝根正丁醇部位各化学组分,MTT法体外筛选各组分抗单纯疱疹病毒1(HSV-1)活性,利用UPLC-Q-TOF-MS检测正丁醇部位及各组分的化学成分,运用Markview软件及Excel软件进行各组分差异性成分分析,根据统计结果得到抗病毒相关的化学成分。结果按照化学成分的相似性,利用色谱法将板蓝根正丁醇部位分为20个组分,其中10个组分具有明显抗病毒活性。UPLC-Q-TOF-MS检测到正丁醇部位中的44个化学成分,并明确了它们的化学结构,在各化学组分的分析检测及差异性分析中,发现了生物碱类、有机酸、糖和氨基酸衍生物共15个化学成分与抗病毒活性相关;尤其是1-甲氧基-3-甲醛、3-(3′,5′-二甲氧基-4′-羟基)-2-吲哚酮、1-甲氧基-3-吲哚酮、3-(甲基硫代)芥子油苷、氨基葡萄糖-6-磷酸酯在活性组分中量较高。结论板蓝根正丁醇部位以吲哚类生物碱、有机酸、核苷及氨基酸类成分为主,其中的单吲哚类、硫苷类及糖和氨基酸衍生物与抗病毒活性密切相关。     

板蓝根含药血清对病毒感染RAW264.7细胞的TLR3信号通路的影响

目的:研究板蓝根含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染RAW264.7细胞中干扰素-β(IFN-β),Toll样受体3(TLR3),TBK1,干扰素调节因子3(IRF3)表达的影响,阐释其可能的抗RSV机制,为临床使用提供实验依据。方法:本实验分为6组,分别为空白组,RSV感染细胞模型组,板蓝根含药血清低、中、高体积分数组(40%,50%,60%板蓝根含药血清),利巴韦林含药血清组(70%利巴韦林含药血清)。除空白组外,其余各组接种RSV造成病毒感染模型,采用板蓝根含药血清或利巴韦林含药血清进行干预,12 h后收集细胞及其上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中IFN-β含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测RAW264.7细胞中TLR3,TBK1,IRF3和IFN-βmRNA的表达;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测TLR3,TBK1,IRF3和p-IRF3蛋白的表达。结果:RSV感染RAW264.7细胞12 h后,与空白组比较,模型组TLR3,TBK1和IFN-βmRNA的表达显著升高,IFN-β,TLR3,TBK1和p-IRF3蛋白的表达也显著升高(P0.01),IRF3 mRNA和蛋白均无明显变化;与模型组比较,板蓝根含药血清中、高体积分数组能够显著下调RSV诱导的TLR3,TBK1和IFN-βmRNA的高表达(P0.05,P0.01),同时明显下调RSV诱导的TLR3,TBK1和p-IRF3蛋白的高表达(P0.05,P0.01),板蓝根含药血清各体积分数组的下调作用低于利巴韦林含药血清组,两者对IRF3 mRNA和蛋白均无明显调控作用。结论:RSV能够诱导TLR3信号转导通路的激活从而促进IFN-β的表达,而板蓝根含药血清通过下调TLR3信号通路关键信号分子TLR3,TBK1,p-IRF3使IFN-β适度表达。     

甜菜碱对HepG2人肝癌细胞基因组范围DNA甲基化表达的影响

目的研究甜菜碱对人肝癌细胞HepG2内基因组范围DNA甲基化的影响。方法以浓度0.1、0.2、0.4mol/L甜菜碱作用于人肝癌细胞HepG2 24、48 h后,通过高效毛细管电泳仪(HPCE)检测肿瘤细胞中DNA水解产物中5-甲基-2′-脱氧胞嘧啶(5-methyl-2′-deoxycytidine,5 mdC)水平,来检测甜菜碱对HepG2内基因组范围DNA甲基化表达的影响。结果随着甜菜碱的浓度增大,5 mdC占总体胞嘧啶的峰面积的百分比也相应增大,且有剂量依赖性。结论甜菜碱作为甲基供体,促进HepG2细胞基因组范围DNA甲基化的表达,从而调控细胞周期抑制肿瘤的生长。     

甜菜碱的抗肿瘤作用及对S180荷瘤小鼠机体糖代谢过程的影响

目的研究甜菜碱的抗肿瘤作用及其对S180荷瘤小鼠机体糖酵解过程的影响。方法建立S180荷瘤小鼠模型,以抑瘤率、血清乳酸脱氢酶(LDH)、醛缩酶(ALD)活力为检测指标,用试剂盒进行测定。结果甜菜碱不同剂量(4.535、2.267、1.133g/kg)对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为39.8%、25.7%、17.7%,甜菜碱高剂量可以非常显著地降低LDH、ALD活力(P<0.01),中剂量和低剂量可显著地降低血清LDH、ALD活力(P<0.05)。结论甜菜碱能抑制实验性S180小鼠的肿瘤细胞的生长,并呈现出一定的量效关系,同时能降低血清LDH、ALD活力,抑制S180荷瘤小鼠的糖代谢过程,可能是甜菜碱潜在的抗肿瘤作用的机制之一。     

对应用型本科药学专业实践教学进行综合改革的探讨

本文提出构建适合独立学院应用型药学本科人才培养的实践教学体系,以适应应用型药学本科专业人才培养目标的要求,旨在加强基本理论知识、基本专业技能的培养,并重点提高学生综合运用理论知识与技能解决实际问题的能力,全面提升学生的岗位适应能力与综合素质,形成“厚基础、重应用、强素质、宽出口”的人才培养特色。     

板蓝根抗病毒有效部位筛选

目的:对板蓝根药材中提取的10个化学部位进行体外抗单纯疱疹病毒(HSV)活性研究,确定板蓝根抗病毒的有效部位。方法:利用溶剂法和色谱法从板蓝根中提取分离出10个粗提和精制部位,用MTT法检测这10个部位体外对HSV-Ⅰ及HSV-Ⅱ型病毒的抑制作用,以病毒抑制率和治疗指数(TI)为评价指标,比较各化学部位体外抗病毒的效果。结果:水提大孔树脂吸附的10%、50%醇洗部位(Ⅷ、Ⅹ)作用最强,对HSV-Ⅰ型病毒的抑制率为分别为53.21%、56.28%,接近阳性对照药阿昔洛韦(62.55%),其TI分别为4.61、18.62。结论:板蓝根不同化学部位的抗病毒作用强度有较大差异。     

中药石膏炮制品的X射线衍射分析及指纹图谱的建立

[目的]考察石膏炮制品(煅石膏)X射线衍射图谱特征.建立煅石膏的X射线衍射指纹图谱,评价该方法对生、煅石膏及化学试剂进行区分鉴别的应用价值.[方法]应用X射线衍射法对煅石膏进行定性分析.应用Origin6.0软件比较其共有峰的夹角余弦和相关系数的相似度.[结果]各煅石膏样品X衍射图共有峰相似度均各达到95%以上,与生石膏、化学试剂区别明显.[结论]煅石膏的X衍射分析方法专属性强,准确可行,可作为与生石膏、化学试剂进行区分鉴别的手段,并能全面地、客观地反映出煅石膏的内在质量特征.     

中药花蕊石的X射线指纹图谱研究

目的建立花蕊石的X射线衍射指纹图谱，评价该方法对花蕊石及其它含钙矿物药进行区分鉴别的应用价值。方法应用X射线衍射法对10批花蕊石药材进行定性分析，并用Origin6．0软件比较其共有峰的夹角余弦和相关系数的相似度。结果不同来源花蕊石样品X衍射图共有峰相似度均各达到95％以上，与其它矿物药区别明显。结论花蕊石的X衍射分析方法专属性强，准确可行，可作为与其它矿物药进行区分鉴别的手段。