脑心通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤及MMP-2、MMP-9表达的影响

目的观察脑心通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织病理变化及MMP-2、MMP-9表达的影响，并探讨其可能的保护机制。方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，应用HE及S-P免疫组化法分别观察模型组及用药组大鼠全脑组织的病理改变及MMP-2、MMP-9表达的变化。结果假手术组大鼠脑组织形态结构正常，MMP-2、MMP-9见少量散在阳性表达或不表达；模型组大鼠大脑缺血再灌注区组织明显水肿、蜕变、坏死伴少量炎细胞浸润，对大脑相应区及双侧小脑轻度水肿，MMP-2、MMP-9表达较假手术组对应区显著升高（P〈0．01或P〈0．05），其中缺血侧大脑以坏死区边缘脑组织表达为甚，且较对侧大脑及双侧小脑明显升高（P〈0．05）；脑心通用药组大鼠大脑缺血区组织水肿、蜕变、坏死较模型组明显减轻，对侧大脑相应区及双侧小脑脑组织形态结构正常，MMP-2、MMP-9表达较模型组对应区显著降低（P〈0．05）。结论脑心通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注后包括病灶在内的全脑损伤有保护作用，其作用机制可能与降低MMP-2、MMP-9表达有关。     

基于GAS量表评分Wilson病中西医结合长期驱铜治疗疗效的多中心研究

目的:观察多中心Wilson病(WD)患者在中西医结合长期驱铜治疗前后WD综合评定量表(GlobleAsessmentScale,GAS)各项目评分的改变并评估其疗效,为建立疗效好、不良反应小的WD长期综合治疗方案提供循证医学依据。方法:参与研究的4个中心共纳入1001例WD确诊患者,随机分成青霉胺(PCA)组、二巯基丁二酸(DMSA)组、肝豆片组和中西医结合组(肝豆片+PCA/DMSA)4组(各组按1︰1︰1︰3平行设计,各组的条件除了治疗方案不同外,其他条件完全相同)。在首次入院时、维持治疗1年时(第2次入院时)、维持治疗2年时(第3次入院时)进行GAS量表各项目(GAS-L、C、M、O项目及神经功能)评分,通过治疗前后自身比较及组间比较,评估各组患者的疗效。结果:各治疗组WD患者GAS各项目评分均较治疗前明显降低,在维持治疗2年时的疗效较维持治疗1年时更为明显,尤以中西医结合组评分改善最显著。结论:4种长期驱铜治疗方法均可改善WD患者的病情,中西医结合长期驱铜治疗的疗效更为显著,是目前WD患者长期治疗最有效的方案。     

缺血后海马高迁移率族蛋白与星形胶质纤维酸蛋白表达及相关性

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注星形胶质纤维酸蛋白(GFAP)与高迁移率族蛋白(HMGB1)在海马CA1区表达变化,探讨二者之间的关系。方法采用大脑中动脉栓塞2h制备SD大鼠脑缺血模型,60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组,按1d、3d、7d、14d、28d时间点再分5个亚组,各时间点处死取脑,用免疫组化和荧光双标结合共聚焦扫描的方法来检测高迁移率族蛋白和星形胶质纤维酸蛋白在脑内海马CA1区表达变化。结果不同时间点缺血再灌注组GFAP、HMGB1表达均高于同时期的假手术组(P<0.05)。缺血再灌注组星形胶质细胞1d、3d、7d逐渐激活增生,7d达到高峰,14d开始下降;HMGB1在1d、3d、7d、14d是表达增加,14d达高峰,28d下降(与前一时间点比较P<0.05)。缺血再灌注组GFAP和HMGB1表达具有相关性(P<0.05),存在HMGB1和GFAP共定位细胞。结论脑缺血再灌注后,海马CA1区HMGB1增加与星形胶质细胞激活成正相关,过度表达的HMGB1和增殖的星形胶质细胞可能与缺血再灌注后神经元的迟发性损伤有关。     

重症肌无力P9-ZFD蛋白的骨骼肌亚细胞定位

目的:表达、纯化重症肌无力相关P9基因TRAF型锌指结构(P9 TRAF-type zinc finger domain,简称P9-ZFD)编码的蛋白质,制备P9-ZFD多克隆抗体,研究P9-ZFD蛋白的骨骼肌亚细胞定位.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)克隆编码P9-ZFD的cDNA序列,构建pET24a-P9-ZFD表达载体,在E.coli BL21(DE3)中胞内诱导表达P9-ZFD蛋白,组氨酸亲和色谱法纯化P9-ZFD蛋白并免疫Balb/c小鼠制备其多克隆抗体.ELISA和Western blot鉴定抗体效价及其免疫特异性.免疫组织化学及免疫电镜观察P9-ZFD蛋白在骨骼肌中的表达部位及其亚细胞分布.结果:表达、纯化的P9-ZFD蛋白相对分子质量约30 kD,纯度达95%以上.制备的P9-ZFD抗体具有特异的免疫反应性.免疫组织化学和免疫电镜结果显示,P9-ZFD蛋白的免疫染色部位集中沿MG骨骼肌细胞膜分布.结论:重症肌无力相关的P9-ZFD蛋白在MG骨骼肌细胞膜处表达,是一种骨骼肌细胞膜蛋白组分.     

Identification of a novel missense mutation in Wilson''s disease gene.

ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｎｏｖｅｌｍｉｓｓｅｎｓｅｍｕｔａｔｉｏｎｉｎＷｉｌｓｏｎ＇ｓｄｉｓｅａｓｅｇｅｎｅＦａｎＹｕｘｉｎ范玉新，ＹａｎｇＲｅｎｍｉｎｇ杨任民，ＹｕＬｏｎｇ余龙，ＷｕＭｅｎｇｃｈｕ吴梦楚，ＳｈｉＳｈａｏｌｉｎ施少林ＲｅｎＭ...     

25-羟基维生素D与脑梗死的关系及干预治疗的临床研究

目的   探讨血清25-羟基维生素D［25-hydroxyvitamin D,25（OH）D］水平与脑梗死患者病情严重程度的相关性及维生素D干预治疗对脑梗死预后的影响。 方法  分别检测217例急性脑梗死患者及163例健康体检者的血清25（OH）D水平。比较急性脑梗死组和健康对照组血清25（OH）D水平差异,以及两组维生素D缺乏、维生素D不足及维生素D充足者的比例分布;比较不同25（OH）D水平的脑梗死患者临床资料的差异并进行相关性分析;将血清25（OH）D＜20?ng/ml的脑梗死患者根据其是否接受维生素D干预（阿法骨化醇0.5?µg/d治疗持续1年）分为两亚组,对两组间血清25（OH）D水平、终点事件复发率及改良Rankin量表（modified Rankin Scale,mRS）评分进行1年的随访比较。 结果  脑梗死患者平均血清25（OH）D水平低于对照组［（13.67±1.16）ng/ml vs （20.11±2.05）ng/ml,P=0.001）］。脑梗死组血清25（OH）D水平缺乏者高于对照组（88.02% vs 63.80%,P=0.001）。血清25（OH）D水平＜20?ng/ml的脑梗死患者与≥20?ng/ml的患者相比,更多合并高血压病、糖尿病、冠状动脉粥样硬化性心脏病史（P=0.010,P=0.011,P=0.037）。血清25（OH）D水平与患者入院时美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS）评分呈负相关（r=－0.720,P=0.001）。血清25（OH）D水平＜20?ng/ml的脑梗死患者亚组分析中,给予阿法骨化醇干预治疗组1年后短暂性脑缺血发作（transient ischemic attack,TIA）或脑梗死复发率和mRS评分均低于未干预组,但无显著差异（P=0.080,P=0.079）。 结论  脑梗死患者血清25（OH）D水平降低,与脑梗死病情严重程度相关;尚不能证实补充活性维生素D治疗可以降低脑梗死复发风险和改善患者预后。     

TNF-α和MMP-9在格林-巴利综合征发病机制中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF—α）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在格林-巴利综合征（GBS）发病机制中的作用。方法（1）采用ELISA双夹心法检测24例GBS患者和19例健康人TNF—α和MMP-9血浆浓度。（2）用免疫组化方法分别检测GBS组（7例）和对照组（7例具有遗传性神经病患者）腓肠神经中TNF-α和MMP-9的表达。结果（1）TNF—α和MMP-9浓度在GBS组明显高于对照组（均P〈0．001）,且其浓度与临床分级间有显著相关关系（r值分别为0．712和0．724）。（2）在GBS腓肠神经中,MMP-9表达于血管内皮细胞、T淋巴细胞和神经纤维上;TNF-α表达于神经纤维上。结论在GBS中,MMP-9可能对白细胞渗出、血-神经屏障（BNB）和髓鞘结构的破坏起重要作用,TNF—α可能在免疫介导的脱髓鞘和轴索损伤中起重要作用。     

缺血性卒中TOAST分类亚型的生物学标记物

由于缺血性卒中是一种病因异质性疾病,识别每例患者的具体病因具有重要的临床意义.急性卒中Orgl10172治疗试验(Trial of Org10172 in Acute Stroke Treatment,TOAST)分型可用来确定卒中的病因学,但该分型方法不能在急性卒中患者入院时及时完成,影响了对临床治疗的早期指导作用.文章对TOAST分型具有早期鉴别意义的生物学标记物进行了综述.