CCR7和VEGF在缺氧时视网膜血管内皮细胞中的表达及意义

目的：探讨CC族趋化因子受体7（ CC chemokine receptor7, CCR7）和血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor,VEGF）在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞（ retinal endothelial cell,REC）中的表达及意义。
　　方法：恒河猴脉络膜－视网膜内皮细胞（ RF／6A）分别在常氧和低氧环境中培养,分为正常对照组、低氧对照组和治疗组。低氧对照组和治疗组分别采用脂质体LipofectamineTM 2000（ LF2000）介导转染空载体质粒和CCR7siRNA表达质粒。 CCK8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot和RT－PCR法检测三组RF／6A内CCR7、VEGF蛋白及mRNA的表达情况。结果：低氧对照组较正常对照组比较及治疗组较正常对照组和低氧对照组比较细胞生长速度明显减慢,增殖能力减弱,细胞凋亡率显著增加（均为P＜0．05）;低氧对照组与正常对照组比较, RF／6 A内CCR7、VEGF蛋白及mRNA表达显著增高,均有统计学意义（ tCCR7蛋白＝3．38,tVEGF蛋白＝4．75,tCCR7mRNA＝4．27,tVEGFmRNA＝5．34,均为P＜0．05）,且二者表达呈正相关（ r蛋白＝0．71, rmRNA ＝0．83,均为 P＜0．05）。治疗组CCR7和VEGF的蛋白及mRNA表达较正常对照组和低氧对照组明显下降（均为P＜0．05）。
　　结论：缺氧时REC中CCR7可上调VEGF的表达,CCR7－VEGF信号途径在视网膜新生血管（ retinal neovascularization, RNV）形成的过程中可能具有潜在功能,CCR7siRNA有望成为防治RNV的一种有效方法。     

手术前玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子单克隆抗体bevacizumab预防增生型糖尿病视网膜病变玻璃体切割手术后玻璃体积血的meta分析

目的 系统评价手术前玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子单克隆抗体bevacizumab(IVB)预防增生型糖尿病视网膜病变(PDR)玻璃体切割手术后玻璃体积血(VH)的有效性和安全性.方法 随机对照试验(RCT)的Meta分析.计算机检索Medline、Embase、Cochrane图书馆、中国生物医学文献数据库和中国期刊全文数据库,并辅以手工检索相关书籍、期刊和会议论文及其参考文献.按照纳入和排除标准筛选评价手术前IVB预防PDR玻璃体切割手术后VH的RCT.对纳入的RCT进行数据提取后,采用Jadad评分量表进行质量评价.分析指标包括手术后VH发生率、最佳矫正视力(BCVA)、视网膜复位率和并发症发生率.统计学分析使用Stata/SE 11.2软件,连续变量采用加权平均差(WMD)及其95％可信区间(CI)表示,非连续变量采用比值比(OR)及其95％ CI表示,结果 共纳入7项符合标准的RCT,其中IVB组170例,对照组161例.纳入的RCT Jadad评分仅1项为5分,1项为3分,其余5项均为1分.手术后≤4周和手术后＞4周,IVB组VH发生率低于对照组,差异均具有统计学意义(OR=3.28,95％ CI:1.58～6.82,P=0.00;OR=2.51,95％ CI:1.21～5.22,P=0.01).手术后3个月和手术后6个月,IVB组VH发生率与对照组比较,差异均无统计学意义(OR=2.52,95％ CI:0.74～8.57,P=0.14;OR=3.26,95％ CI:0.50～21.45,P=0.22).IVB组手术后BCVA优于对照组,差异具有统计学意义(WMD=0.29,95％ CI:0.13～0.44,P=0.00).IVB组手术后视网膜复位率与对照组比较,差异无统计学意义(OR=0.39,95％ CI:0.10～1.59,P=0.19).IVB组手术后视网膜再脱离发生率与对照组比较,差异无统计学意义(OR=2.36,95％ CI:0.74～7.56,P=0.15);IVB组手术后新生血管性青光眼发生率与对照组比较,差异无统计学意义(OR=1.47,95％ CI:0.28～7.71,P=0.65).结论 手术前IVB能够有效预防PDR玻璃体切割手术后VH,且相对较为安全,但仍需高质最、多中心、大样本、长期随访的RCT进一步研究证实.     

玻璃体切割联合晶状体摘出和IOL植入术治疗晶状体后脱位

目的：探讨玻璃体切割联合晶状体超声粉碎和Ⅰ期人工晶状体睫状沟固定术治疗晶状体后脱位的临床效果。 方法:对晶状体后脱位11例11眼作回顾性研究, 均采用闭合式三切口玻璃体切割联合晶状体超声粉碎和人工晶状体睫状沟固定术。 结果:所有患者均成功摘出脱位晶状体, 且视力均有提高。合并继发青光眼者, 眼压得到控制。术后并发症有角膜水肿3例, 虹膜炎症反应2例。 结论:晶状体后脱位导致视力障碍、继发性青光眼、伴有玻璃体积血时, 采用玻璃体切割联合晶状体超声粉碎和人工晶状体睫状沟固定术治疗效果良好。手术成功的关键在于选择适应证及掌握娴熟的操作技巧。     

地塞米松缓释剂治疗糖尿病性黄斑水肿的研究进展

糖尿病性黄斑水肿(DME)是糖尿病患者视力丧失甚至失明的重要原因,其治疗方案多种多样,主要包括抗血管内皮生长因子、曲安奈德及激光光凝等,均具有较好的疗效,但也存在各自的局限性。近年来,地塞米松缓释剂作为一种新的治疗方案给其他治疗反应欠佳的DME患者带来了希望,同时具有疗效佳、持续时间长、安全性可接受及患者耐受性良好等优点,使其成为了目前的研究热点。本文就地塞米松缓释剂的药理特性、治疗DME的临床研究及适用条件进行阐述。     

激光角膜共焦显微镜观察真菌性角膜炎的研究

目的探讨激光角膜共焦显微镜在真菌性角膜炎临床诊断中的意义。方法真菌性角膜炎患者40例40只眼,同时行角膜组织刮片及角膜真菌培养、激光角膜共焦显微镜检查,对三组结果进行比较。结果根据病史、临床表现确诊的真菌性角膜炎患者40例40只眼,激光角膜共焦显微镜的确诊率为90%,角膜刮片的确诊率为30%,培养查真菌菌落确诊率为25%。激光角膜共焦显微镜检查检出率高于角膜组织刮片(P<0.01)及真菌培养(P<0.01)检查。结论激光角膜共焦显微镜对真菌性角膜炎的检出具有及时、无创和高阳性率的特点,对真菌性角膜炎的早期诊断、治疗和研究具有重要的临床意义。     

新生血管性年龄相关性黄斑变性患者玻璃体内注射抗血管内皮生长因子药物治疗进展

年龄相关性黄斑变性是引起50岁以上人群视力不可逆性损伤的主要原因之一，新生血管性年龄相关性黄斑变性（neovascular age-related macular degeneration,nAMD）也称湿性年龄相关性黄斑变性（wet age-related macular degeneration,wAMD），是其晚期阶段，可导致最严重的视力丧失。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是脉络膜新生血管和视网膜渗漏形成的主要因素，抗VEGF治疗是目前唯一实现多数患者视力改善并且停止疾病进展的治疗方法，因此玻璃体内注射抗VEGF药物已经成为wAMD一线治疗方法。用于临床治疗wAMD的抗VEGF药物主要有哌加他尼、贝伐单抗、雷珠单抗、阿柏西普和康柏西普。治疗方案有固定式、按需式以及治疗和延长式治疗方案。Brolucizumab和abicipar pegol是2种新的抗VEGF药物，正处于3期临床试验阶段。本文对以上药物治疗wAMD的研究进展进行综述。     

Ex-press微型引流器植入联合深层巩膜切除术治疗难治性青光眼

目的：：探讨Ex-press微型引流器植入联合深层巩膜切除术治疗难治性青光眼的临床疗效。方法：收集2014-01/11难治性青光眼患者24例30眼,施行Ex-press微型引流器( P-50)植入联合深层巩膜切除术。术后随访12mo,分析术前及术后疼痛感、眼压、视力、并发症等情况。结果：术后随访期间所有患者眼痛症状均缓解。术前平均眼压为51.15±2.60mmHg,末次随访时平均眼压15.11±2.51mmHg,术后眼压与术前相比,差异有统计学意义( P<0.05)。术后视力有提高者8眼,无显著改变者22眼。术后前房出血2眼(7%),1wk后出血吸收。结论：Ex-press微型引流器植入联合深层巩膜切除术是治疗难治性青光眼相对安全、有效的方法,能显著降低眼压,减少患者痛苦,且并发症少。     

CTGFsiRNA改善STZ诱导糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡

目的:探讨CTGF对糖尿病大鼠视网膜内细胞凋亡的影响。方法:将60大鼠分为对照组,糖尿病4,8,12,16wk组和干预组。糖尿病大鼠应用STZ腹腔注射诱导成模。干预组大鼠于糖尿病成模后16wk玻璃体腔注射CTGFsiRNA来造成CTGF基因的沉默。取各组视网膜组织,应用RT-PCR检测视网膜内的CTGF基因表达,Tunnel法检测视网膜凋亡细胞的情况。结果:糖尿病组视网膜内CTGF表达和凋亡细胞数较正常组明显增加。凋亡发生在建模后4wk,并随着时间的延长而加重,在24wk时,凋亡细胞数为25.8个/mm2。CTGF表达于8wk时出现升高,到16wk时升高更明显。CTGFsiRNA处理后凋亡细胞数明显降低。视网膜内CTGF和细胞凋亡之间具有明显的相关性。结论:CTGF参与了糖尿病视网膜早期病变的细胞凋亡机制,CTGFsiRNA有利于改善糖尿病早期视网膜由于凋亡所致的细胞丢失。     

携带 Tum5 基因的慢病毒表达载体的构建及其在人脐静脉血管内皮细胞中的表达

目的:构建及鉴定Tum5基因慢病毒表达载体,并观察在体外人血管内皮细胞中的表达。方法:采用PCR技术从含有tumstatin基因的质粒克隆模板pSPORT1-Sfi钓取Tum5基因,并将基因克隆到慢病毒载体表达质粒pGC-FU(含EGFP基因)中,构建慢病毒载体表达质粒pGC-FU-Tum5,通过酶切、测序验证Tum5基因后,将pGC-FU-Tum5质粒和包装质粒pHelper1.0,pHelp-er2.0共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带Tum5基因和EGFP基因的重组慢病毒GC-FU-Tum5,并转染靶细胞人脐静脉血管内皮细胞。通过检测标志蛋白-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和目的蛋白Tum5进一步验证pGC-FU-Tum5在靶细胞中Tum5的表达。结果:(1)pGC-FU-Tum5中携有正确的Tum5基因,并能在人类细胞中表达;pGC-FU-Tum5共转染包装细胞293T能产生重组病毒GC-FU-Tum5;(2)目的基因Tum5能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞人脐静脉血管内皮细胞,并达到稳定的表达,荧光显微镜下能直接观察到GFP,Western blotting能检测到Tum5蛋白在靶细胞中的表达。结论:成功构建了携带Tum5基因的重组慢病毒载体,转染人脐静脉血管内皮细胞后能够稳定表达Tum5基因,为进一步研究Tum5的功能和眼部新生血管疾病的治疗奠定基础。     

自制螺旋针在下泪小管吻合术中的应用

自制螺旋针在下泪小管吻合术中的应用中国医科大学第二临床学院眼科（１１０００３）陈晓隆下睑内侧裂伤常伴有下泪小管断裂，如不及时将泪小管吻合，会造成患者终生溢泪。泪小管吻合方法虽然较多，但用自制螺旋针行下泪小管断裂吻合国内尚未报道。笔者采用自制螺旋针行泪...