糖尿病肾病相关miR-130b-3p靶点的生物信息学预测

目的：预测miR-130b-3p靶基因,并对靶基因的分子功能、生物学进程和信号通路进行富集分析,为深入研究糖尿病肾病相关miR-130b-3p的靶基因功能提供理论基础。方法：通过NCBI和miRbase数据库检索基因。应用Vector NTI软件进行miR-130b-3p序列分析,应用TargetScan,picTar,RNA22,PITA和miRanda软件预测靶基因,通过DAVID 和KEGG 数据库进行靶基因功能与信号通路富集分析。结果：已知成熟的不同物种miR-130b-3p核酸序列高度保守。靶基因主要富集在核质和细胞溶质,分子功能主要富集在蛋白绑定和转录因子激活。经典的miR-130b-3p靶基因集合明显富集于KEGG数据库中的TGF-β、AMPK和内吞作用等7个信号转导通路。疾病富集分析与糖尿病高度相关。结论：成功预测miR-130b-3p靶基因,部分靶基因参与的功能及信号通路与糖尿病肾病发生发展过程密切相关。     

FAK、FAKpY397和Src在肝细胞癌中的表达和意义

目的：探讨黏着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）、磷酸化黏着斑激酶（phospho-FAK Y397,FAKpY397）和类固醇激素受体共活化因子（sceroid recptor coactivator,Src）在不同分化程度肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达情况以及三者的相关性。方法：通过免疫组织化学法和人工计数法检测44例HCC组织及8例癌旁正常肝脏组织中FAK、FAKpY397和Src的表达。结果：FAK、FAKpY397和Src在HCC组织中表达均高于正常肝脏组织（P=0.027、P=0.041、P=0.030）且三者均与HCC分化程度有关（P=0.026、P=0.045、P=0.005）,FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组（P=0.015、P=0.002）。HCC组织中三者表达两两之间呈正相关（P=0.000、P=0.000、P=0.000）。结论：HCC组织中FAK、FAKpY397和Src表达与HCC分化程度有关;FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组且三者相互之间存在一定相关性。     

超声测量胎儿肾长径与双顶径比值及其临床价值

目的：探讨胎儿肾长径（fetal renal longitudinal distance,FRLD）与双顶径（biparietal diameter,BPD）比例关系及其临床应用价值。方法：应用经腹超声测量孕18～41周单胎妊娠FRLD,计算FRLD与BPD的比例关系。结果：共收集 600 例胎儿正常肾的 FRLD/BPD值。左肾 FRLD/BPD值为0.44 ± 0.03,右肾FRLD/BPD值为0.44 ± 0.03（P >0.05）。同时检出同期胎儿肾异常共 142 例：其中多囊肾、多囊性肾发育不良和肾发育不全的 FRLD/BPD值分别与正常肾的ＦＲＬＤ/ＢＰＤ值比较差异均有统计学意义（P<0.05）。FRLD/BPD 95%参考值范围（0.38,0.50）。结论：FRLD/BPD值可作为判断中晚期妊娠胎肾发育较为可靠指标,能早期发现胎肾发育异常,进行临床干预和治疗。     

成纤维细胞生长因子19和成纤维细胞生长因子受体4在食管鳞癌中的表达及其意义

目的：探讨成纤维细胞生长因子19（fibroblast growth factor 19,ＦＧＦ１９）和成纤维细胞生长因子受体4（fibroblast growth factor receptor 4,ＦＧＦＲ４）在食管鳞癌中的表达及其是否存在相关性。方法：利用免疫组织化学法检测我院2009-2012年间34例食管鳞癌术后病理标本中肿瘤组织和正常食管组织中FGF19和FGFR4 蛋白的表达,并进行统计学分析。结果：FGF19和FGFR4在人类食管鳞癌组织中均高表达（P=0.000,P=0.000）,FGFR4和FGF19在食管鳞癌中的表达与淋巴结转移（rs=0.401,P=0.019;rs=0.404,P=0.018）和病理分期（rs=0.495,P=0.003;rs=0.439,P=0.009）呈正相关,并且在食管鳞癌中FGFR4与FGF19的表达呈正直线相关（rs=0.483;P=0.004）。结论：FGF19和FGFR4与食管鳞癌的发生有关,并参与其侵袭转移过程。     

超声造影对甲状腺良恶性结节的鉴别诊断价值

目的：探讨超声造影（contrast-enhanced ultrasound,CEUS）增强模式对甲状腺结节良恶性的鉴别诊断价值。方法：回顾性动态观察184个甲状腺良恶性结节的CEUS灌注过程,分析CEUS各指标包括造影剂进入结节的快慢、方式、增强强度、达峰时间、造影剂分布是否均匀、边界是否清晰、有否周边环状增强以及结节内造影剂消退快慢。结果：甲状腺良恶性结节增强模式间差异具有显著性意义（P<0.001）,甲状腺良性结节多表现为同步等增强或高增强及周边环状增强;而恶性结节多表现为慢进快退、向心性、不均匀低增强,其中快退对于诊断甲状腺恶性结节的灵敏度最高（92.2%）,向心性、慢进及低增强等造影指标的特异度均较高。结论：CEUS增强模式分析对甲状腺结节的良恶性鉴别诊断具有重要的价值。造影剂慢进快退、向心性、不均匀低增强有助于甲状腺恶性结节的诊断,而环状增强有助于良性结节的诊断。     

HPLC测定风热清胶囊中的绿原酸和牛磺熊去氧胆酸

目的建立测定风热清胶囊中绿原酸和牛磺熊去氧胆酸的方法。方法采用HPLC法,绿原酸的测定用Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(9:91),流速为0.8 m.lmin-1,柱温为35℃;牛磺熊去氧胆酸的测定用Phenomenex双子星C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.03 mo.lL-1磷酸二氢钠溶液(65:35)(磷酸调pH4.4),流速为0.8 ml.min-1,柱温35℃。结果绿原酸进样量0.3176~2.3820μg与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为103.82%,RSD=0.30%;牛磺熊去氧胆酸进样量0.2036~1.6288μg与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.72%,RSD=0.98%。结论所用方法简便可行、重复性好,可控制风热清胶囊的质量。     

SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化的机制研究

［摘要］　目的　探究SNHG3调控miR-186-5p/E盒结合锌指蛋白1（ZEB1）促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化（EMT）的机制。方法　在HepG2细胞中转染siRNA干扰片段敲除SNHG3、转染pcDNA3.1(+)/SNHG3使SNHG3过表达,通过实时荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）检测是否转染成功。克隆形成实验检测HepG2细胞增殖,细胞划痕实验检测HepG2细胞迁移率,Transwell小室实验检测HepG2细胞侵袭数量,双荧光素酶活性检测验证SNHG3与miR-186-5p、miR-186-5p与ZEB1的靶向关系,FQ-PCR和Western blot法检测SNHG3、ZEB1、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9、Snail的表达水平。结果　肝癌组织中SNHG3表达量高于正常组织,SNHG3表达量低/中的肝癌患者的生存预后优于SNHG3表达量高的肝癌患者,差异有统计学意义（P<0.05）。克隆形成实验结果显示,与pcDNA3.1(+)组相比,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞增殖数量显著增加（P<0.05）。细胞划痕实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞迁移率显著高于pcDNA3.1(+)组（P<0.05）。Transwell小室实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞侵袭数量显著高于pcDNA3.1(+)组（P<0.05）。双荧光素酶活性检测结果显示,miR-186-5p mimic和pGL6-SNHG3-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,miR-186-5p mimic和pGL6-ZEB1-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,差异有统计学意义（P<0.05）。FQ-PCR和Western blot检测结果显示,当SNHG3过表达时,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著下调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著上调;当SNHG3敲除后,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著上调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著下调,差异有统计学意义（P<0.05）。结论　SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1可促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,表明SNHG3是肝癌潜在的治疗靶点。     

乐陵市3609名社区居民慢性病调查结果分析

[目的]了解乐陵市居民慢性病患病情况及筛查其危险因素,为制订综合防治措施提供科学依据。[方法]研究对象3609人,进行问卷调查、医学体检及血生化指标测定。[结果]高血压、糖尿病、血脂异常标化患病率分别为39．7％、5．0％、21．1％,有随年龄增长呈明显上升的趋势。筛出体质指数、高血压家族史、年龄、LDL-C升高、TG升高、职业和性别是高血压的主要危险因素,糖尿病家族史、LDL—C升高、年龄、中心性肥胖和吸烟是糖尿病的主要危险因素。[结论]应根据慢性病患病率及其危险因素对慢性病的重点人群采取相应的干预措施。     

TGF-β1小干扰RNA影响人腹膜间皮细胞黏附胃癌细胞株SGC-7901的研究

目的:观察人腹膜间皮细胞转染TGFβ1小干扰RNA后对胃癌细胞株SGC7901黏附的变化,探讨其治疗腹膜转移的作用。方法:使用线性化的pcPURβicassette质粒构建针对TGFβ1基因的siRNA表达载体;采用胰蛋白酶EDTA消化法,从人的腹膜组织中分离腹膜间皮细胞。将TGFβ1siRNA载体转染人腹膜间皮细胞,以半定量RTPCR和Western蛋白印迹方法检测转染后间皮细胞中TGFβ1表达水平的变化,以3HTdR掺入实验测定腹膜间皮细胞和人胃癌细胞株SGC7901之间的黏附变化。结果:电泳、DNA测序证实合成的siRNA基因序列正确并已准确克隆入pcPURβicassette载体。免疫组化染色结果显示腹膜间皮细胞角蛋白、波形蛋白表达阳性,而白细胞共同抗原(CD45)、第Ⅷ因子相关抗原阴性。与对照组比较,TGFβ1siRNA载体能显著下调TGFβ1mRNA(0.779±0.091vs0.503±0.064,P=0.013)和蛋白(77.67±5.69vs29.33±6.03,P=0.001)在腹膜间皮细胞中的表达,间皮细胞黏附胃癌细胞的能力减弱。结论:载体介导的RNAi技术可成功地干扰TGFβ1在腹膜间皮细胞中的表达。同时,降低了间皮细胞黏附肿瘤细胞的能力,有望减少胃癌腹膜转移的发生。