巨噬细胞炎性蛋白4的突变和原核表达

目的 探索如何抑制嗜酸细胞的趋化作用，选择β-趋化因子巨噬细胞炎性蛋白4（MIP4）的突变性（Met-MIP4)作为趋化因子受体3的拮抗剂，将Met-MIP4基因在原核细胞中进行表达。方法 设计MIP4基因的PCR引物并进行氨基酸突变，将MIP4N末端的丙氨酸突变为蛋氨酸，以正常人肺酸突变，将MIP4N末端的丙氨酸突变为蛋氨酸。以正常人肺cDNA文库为模板，PCR方法获取Met-MIP4基因，克隆入载体pUC19，测序验证序列已得到突变，将正确的基因插入到GST融合表达载体pGEX-4T中，以IPTG诱导表达。结果 PCR产物为220bp左右的片段，连接入pUC19质粒后测序验证获得正确突变，构建的pGEX-4T融合表达载体在大肠杆菌中表达，经SDS-PAGE凝胶电泳显示有大小约34kU的新生融合蛋白表达。结论 成功突变并克隆了β-趋化因子MIP4基因，SDS-PAGE表明，与GST融合的Met-MIP4突变体已得到表达，为进一步研究其生物学活性奠定了基础。     

60Coγ射线对体外培养成骨细胞作用的实验研究

目的：研究放射性骨损伤的发病机制，探讨骨折合并射线损伤愈合能力下降的原因。方法：将体外培养的成骨细胞用^60Coγ射线一次性照射3、6、9、12Gy，以建立体外培养成骨细胞受射线作用的实验模型；同时，观察成骨细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性改变，骨形态发生蛋白（BMP）和转化生长因子β1（TGF-β1）的胞质内表达量，以及细胞内钙离子的含量。结果：成骨细胞受射线照射后，其ALP活性明显降低，且与照射剂量呈明显量效关系，3Gy组抑制率为31.59%，而12Gy组则为84.95%；BMP、TGF-β1的表达量下降，但与照射剂量无明显量效关系；胞质内钙含量亦降低，但受照各组间的抑制率无明显统计学差异。结论：射线对成骨细胞具有直接损害作用，放射性骨损伤的重要方面就是射线对成骨细胞的主要功能酶ALP活性的损害，抑制BMP、TGF-β1等生长因子的合成，且干扰细胞内第二信使钙离子，从而致骨组织的再生重建机能下降。     

颊鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子的表达

目的 :研究颊鳞状细胞癌 (颊癌 )组织中血管内皮生长因子 (VEGF)表达与颊癌细胞生长、转移及预后的关系。方法 :用免疫组织化学法对 37例颊癌标本进行染色 ,观察VEGF的阳性表达率 ,并结合病理和随访资料作统计分析。结果 :37例颊癌组织中VEGF的总阳性表达率为 91 .89% ,有淋巴结转移者VEGF强阳性占 69.2 3 % ,无淋巴结转移者VEGF强阳性占 33 .33 % (χ2 =6 .48,P <0 .0 1 ) ;VEGF和肿瘤浸润深度密切相关 (r =4.54 ,P <0 .0 1 ) ;5a生存组VEGF阳性率低于 5a内死亡组 (χ2 =3 .90 ,P <0 .0 5) ;COX分析结果表明VEGF可作为独立的预后判断指标 (风险比 =2 .90 ,χ2 =7.95 ,P <0 .0 1 )。结论 :VEGF在颊癌生长转移中发挥重要作用 ,可以作为颊癌预后的指标     

猪尾导管连接化疗药盒实现肝脏肿瘤多重化疗的可行性研究

目的 探讨使用猪尾造影导管与单一化疗药盒连接实现肝脏肿瘤多重化疗的可行性及初步疗效。资料与方法 对30例晚期肝脏恶性肿瘤患者采用经股动脉穿刺、腹腔动脉内植入猪尾导管与皮下埋置药盒并序贯化疗，统计手术成功率、并发症及临床疗效。结果 30例手术全部成功，发生切口延迟愈合1例。术后随访28例，经影像学复查对比，病变缩小7例，稳定12例，进展9例。随访期间12例患者死亡，术后生存期42d-10个月，中位生存期6个月。另外16例患者至今存活，已达术后2-16个月。结论 采用猪尾造影导管置于腹腔动脉并与化疗药盒相连接，能够对晚期肝脏恶性肿瘤实现多重化疗，技术上简单可行，并发症少，初步疗效令人满意。     

湿性烧伤治疗技术在深度烧伤的临床应用体会

目的：总结和简述烧伤湿性医疗技术在治疗深度烧伤的临床应用经验。方法：对我院近年来150例深度烧伤病人全程股规范应用湿性医疗技术治疗的创面，深度创面采用耕耘疗法。结果：150例病人创面全部愈合，创面愈合时间最短10天，最长56天。没有一例植皮，创面均达到生理性愈合，无畸形，无功能障碍。结论：湿性疗法对深度烧伤疗效显著，深度烧伤创面能实现生理性愈合，达到烧伤皮肤原位再生之目的。     

MMP-2、TIMP-2在脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 分析MMP-2、TIMP-2的表达与脑胶质瘤恶性程度和侵袭性之间的关系。方法 采用免疫组化和原位杂交的方法,检测42例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中,MMP-2 mRNA、MMP-2和TIMP-2蛋白表达。结果 MMP-2蛋白表达水平(LI)与肿瘤的分级呈正相关(r=0.872,P<0.01);Ⅲ、Ⅳ级与正常脑组织、Ⅰ～Ⅱ级之间均有显著的差异(P<0.01)。MMP-2mRNA表达与肿瘤的分级同样呈正相关(P<0.01);Ⅲ、Ⅳ级与正常脑组织、Ⅰ～Ⅱ级之间均有显著的差异(P<0.01)。MMP-2蛋白表达增高时TIMP-2蛋白表达也增高;但随着肿瘤恶性程度的增加,TIMP-2表达强度增加的幅度较MMP-2明显减缓。结论 MMP-2的高表达与脑胶质瘤恶性程度呈正相关;TIMP-2与MMP-2间的平衡失调与脑胶质瘤的侵袭性和恶性程度密切相关。     

经颅多普勒频谱参数与急性颅脑损伤患者颅内压的关系

目的探讨急性颅脑损伤患者的经颅多普勒频谱参数与颅内压的关系。方法应用TCD检测20例急性中、重型颅脑损伤患者双侧大脑中动脉,同时行颅内压监测。结果经颅多普勒频谱参数cf、PI、af、RI、ae均和ICP正相关,Vd、ac和ICP负相关,其中cf与ICP的相关系数最大。建立TCD相关参数与ICP的多元线性回归方程:ICP=0.312MAP-1.531Vd+21.437PI-15.059ac+38.722cf(P<0.001,R2=0.920估计值的标准差=4.0972mmHg)。结论经颅多谱勒频谱参数可以反应颅脑损伤患者的颅内压的改变。综合研究经颅多谱勒频谱参数、血压与颅内压的关系是应用经颅多普勒无创监测颅内压的方向。     

动脉波形分析计算心排出量及临床应用

动脉波形分析技术用于测量心排出量(arterial pressure-based cardiac output,APCO)和每搏输出量变异指数(stroke volume variation,SVV)是一项新的微创血流动力学技术,它能够连续通过对外周动脉的波形特征结合患者的基本信息(年龄、性别、身高、体重等)进行分析测定心排出量(CO),并且不需要通过其他方法来校准.临床上已经显示出可以接受的准确性和良好的即时性和方便性,但也存在一定的局限性,如在一些心脏疾病如主动脉返流、二尖瓣返流或给予α1受体激动药,APCO并不能准确反映心排血量.     

吻合腓肠浅动脉的游离小腿后侧皮瓣修复手掌软组织及神经缺损

目的 探讨修复手掌软组织及神经同时缺损的新方法。方法 利用吻合腓肠浅动脉的游离小腿后侧皮瓣修复手掌软组织及神经缺损6例。结果 临床应用6例，全部成活，术后10～13个月随访，皮瓣外形近似正常手掌，两点辨别觉为5mm，感觉为S4；患指感觉恢复为S3两例，S4四例。结论 利用吻合腓肠浅动脉皮瓣修复手掌软组织及神经缺损是理想的方法。     

经皮肾镜下气压弹道碎石联合超声碎石术治疗复杂性肾结石疗效观察

目的：评价经皮肾镜下气压弹道碎石联合超声碎石术处理复杂性肾结石的疗效。方法：自2003年9月～2004年4月采用经皮肾镜下气压弹道碎石联合超声碎石术Ⅰ期治疗肾结石38例42侧。结果：平均手术时间85min，结石处理时间62min，结石清除率88．1％；5例多发性结石或铸形结石患者经皮通道小角度的肾盏内有直径小于1cm结石残留，辅助施行体外冲击波碎石治疗。随访1～3个月，无严重手术并发症。结论：经皮肾镜下气压弹道碎石联合超声碎石术处理大的复杂性肾结石具有高效、安全的特点，结石清除率高，值得临床推广应用。