工程酵母细胞高压破碎、蛋白低温保藏和去糖基化处理对7-木糖紫杉烷糖基水解酶LXYL-P1-2活性的影响

紫杉醇主要来源于红豆杉,作为一种“重磅炸弹”式的抗肿瘤药物,自1992年12月被美国 FDA批准上市以来,一直是销售额最大的植物抗肿瘤药。但由于紫杉醇的天然含量极低,约占含量最高的树皮部位的万分之二,加之红豆杉生长缓慢,早期从野生红豆杉中获取紫杉醇曾给红豆杉资源造成毁灭性破坏。目前主要依靠化学半合成或苗圃栽培手段制取。苗圃栽培虽然对保护野生红豆杉资源具有积极意义,但栽培红豆杉中紫杉醇含量低微的本质没有发生改变。另一方面,红豆杉中存在着大量的紫杉醇结构类似物,其中包括含量数十倍于紫杉醇的7-木糖-10-去乙酰紫杉醇,而后者在脱除木糖基之后形成的10-去乙酰紫杉醇仅需在 C10位乙酰化即可产生紫杉醇[1]。如能将这类副产物转变成紫杉醇,不仅可以减少其对环境的污染,还可以“变废为宝”,大大提高红豆杉资源的利用率。脱除木糖基可用化学法或生物酶法来完成,其中后者的专一性强、环境友好。但由于天然细胞中β-木糖苷酶的酶量普遍偏低,用筛选得到的微生物直接进行转化效率不高[2-3],本实验室已尝试用基因工程方法解决这一问题。我们已从具有转化7-木糖-10-去乙酰紫杉醇为10-去乙酰紫杉醇能力的真菌香菇中克隆得到了7-木糖紫杉烷糖基水解酶 LXYL-P1-2,该酶隶属于糖基水解酶的第3家族,是一种全新的和双功能的β-木糖苷酶和β-葡萄糖苷酶,能高效且专一性地水解包括7-木糖-10-去乙酰紫杉醇在内的7-木糖紫杉烷的木糖基,生成相应的7-羟基紫杉烷。已对该酶及其重组菌开展了酶的表征、高密度发酵与生物催化等研究[4-6]。本文报告工程酵母细胞高压破碎条件、蛋白低温保藏和去糖基化处理对 LXYL-P1-2酶活性的影响,为利用纯化的重组酶进行酶结构与功能关系等的研究提供保障。     

中学生自杀行为流行现状及其与心理-情绪障碍的关联

目的 分析中国中学生自杀行为流行现状及其与心理-情绪障碍的关联,为制定有效干预措施提供依据.方法 利用2005年全国青少年健康危险行为调查资料,分析中学生人群(181 832名)自杀行为的发生情况及其与心理-情绪障碍的关联;心理-情绪指标为"经常/总是"出现孤独、学习压力、失眠和伤心绝望.结果 男、女生自杀意念报告率为16.7%和24.3%,自杀计划报告率为5.6%和7.7%,自杀行动报告率为2.9%和3.0%.以行为复合体形式组成4类自杀现象.男、女均有2/3在意念、计划缺失下行动,女生有意念计划但未行动率高是导致性别差异的主要原因.非参数检验提示,自杀现象和"经常/总是"出现心理-情绪问题间存在密切关联.结论 中学生自杀行为流行现状不容乐观.中学生自杀行为与心理-情绪障碍密切关联,学校卫生工作者可在青少年自杀预防方面发挥积极作用.     

中国城市中学生不健康饮食行为及其聚集状况

目的 分析中国城市中学生不健康饮食行为及其聚集情况,为制定干预措施提供依据.方法 利用2005年18省市青少年健康危险行为调查资料,共分析177 115名城市中学生的不健康饮食行为.结果 男、女生7项不健康饮食行为检出率分别为:频繁喝软饮料2.7%和1.5%;频繁吃甜点心9.4%和14.0%;频繁吃西式快餐1.6%和1.2%;偏食37.1%和39.8%;不喝牛奶17.5%和17.0%;不吃早餐8.6%和7.8%;不健康减肥行为10.1%和23.1%.各种行为检出率及其聚集有明显的地区、性别、年级差异.结论 应重视青少年不健康饮食相关行为预防,通过建立健康促进学校、开展生活技能教育等措施实施.