紫杉特尔与卡铂联合治疗非小细胞肺癌29例临床观察

1999年6月～2002年2月，我院联用紫杉特尔和卡铂治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)29例，效果满意。现报告如下。     

青少年感染蠕形螨的调查研究

采用透明胶纸粘贴法对卫校508名中专学生进行面部人体蠕形螨感染情况的调查。结果表明有蠕形螨寄生者126人,总感染率为24.80％,男性感染率为49.02％,女性为22.10％,两者显著差异(P<0.01)。最易检出部位为鼻部(鼻尖、鼻沟)。结果还显示面部皮损及有症状者的感染率为24.69％,显著高于正常人群(P<0.01)。     

弓形虫复合抗原基因P30-ROP2在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定

目的构建含弓形虫主要表面抗原P30与致密颗粒蛋白ROP2复合基因重组质粒,并在毕赤酵母中表达、纯化与鉴定。方法用亚克隆技术把P30-ROP2复合基因克隆入表达载体,构建酵母表达载体pGAPZαA-P30-ROP2;线性化重组酵母表达载体,电穿孔法导入毕赤酵母GS115中,抗生素Zeocin筛选、PCR法鉴定阳性转化子;酵母工程菌大量摇瓶表达,纯化产物,免疫活性鉴定。结果获得pGAPZαA-P30-ROP2重组表达载体,SDS-PAGE和Western Blot结果显示P30-ROP2复合基因表达蛋白产物分子量约为66kD,具有一定的免疫活性。结论弓形虫复合抗原基因P30-ROP2在毕赤酵母中成功分泌表达,表达产物具有免疫活性,为弓形虫病诊断抗原及疫苗研制奠定基础。     

弓形虫P30与佐剂CTA2／B复合基因酵母表达载体的构建与生物信息学分析

目的 构建含有弓形虫主要表面抗原P30与免疫佐剂CTA2／B复合基因的克隆载体及酵母表达载体，为进一步真核表达重组P30CTx蛋白奠定基础。方法 PCR扩增P30-CTX复合基因，产物回收后与pMD-18T载体连接，转化大肠埃希菌DH5a，经氨苄抗性筛选及测序，建立克隆载体pMD18T-P30-CTX；克隆载体与表达载体双酶切后，回收1313bp的P30-CTx基因，亚克隆入酵母表达载体，转化大肠埃希菌DH5a，筛选、测序后建立酵母表达载体PGAPZaA-P30-CTX。重组质粒分别以PCR、酶切及测序鉴定。使用生物信息软件分析P30-CTx复合基因，预测编码蛋白结构。结果 重组质粒经PCR可得1313bp的特异条带，EcoRⅠ、xbaⅠ双酶切获得l313bp和3085bp的条带，与预期大小一致，测序结果证实为pGAP-P30～CTX基因，序列分析同源性为99．82％，P30～CTX蛋白结构折叠无明显改变。结论成功构建了含有弓形虫主要表面抗原：P30与免疫佐剂CTA2／B复合基因的克隆载体及酵母表达载体，预测毕赤酵母表达系统对P30-CTX的抗原性不会产生影响。     

含弓形虫复合抗原基因的真核表达质粒在哺乳动物细胞中的表达

目的 研究弓形虫复合抗原真核表达质粒pcDNA3．1-P30-P22-CTXA2/B在哺乳动物细胞中的表达情况。方法利用脂质体介导的转染技术，将真核表达质粒pcDNA3．1-P30-P22-CTXA2／B和空载体pcDNA3．1分别转染Hela细胞，400μg／ml G418加压筛选和200gg／ml G418维持筛选，获得稳定转染的Hela细胞。采用SDS-PAGE和Western-blot方法对复合基因P30P22-CTXA2／B的表达产物进行鉴定。结果SDS-PAGE结果显示，重组质粒转染Hela细胞后的表达产物分子质量单位为64ku，Western blot显示此蛋白条带能被抗P30抗体识别。结论构建的真核表达质粒pcDNA3，1-P30-P22-CTXA2／B能在哺乳动物细胞中成功表达插入基因所编码的融合蛋白，为进一步动物实验提供了实验依据。     

弓形虫P30与佐剂CTA2/B复合基因酵母表达载体的构建与生物信息学分析

目的构建含有弓形虫主要表面抗原P30与免疫佐剂CTA2/B 复合基因的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组P30-CTX 蛋白奠定基础. 方法 PCR 扩增P30-CTX 复合基因,产物回收后与pMD-18T 载体连接,转化大肠埃希菌DH5α,经氨苄抗性筛选及测序,建立克隆载体pMD18T-P30-CTX;克隆载体与表达载体双酶切后,回收1 313 bp 的P30-CTX 基因,亚克隆入酵母表达载体,转化大肠埃希菌DH5α,筛选、测序后建立酵母表达载体PGAPZαA-P30-CTX.重组质粒分别以PCR、酶切及测序鉴定.使用生物信息软件分析P30-CTX 复合基因,预测编码蛋白结构.结果重组质粒经PCR 可得1 313 bp 的特异条带,EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切获得1 313 bp和3 085 bp的条带,与预期大小一致,测序结果证实为pGAP-P30-CTX 基因,序列分析同源性为99.82%,P30-CTX蛋白结构折叠无明显改变. 结论成功构建了含有弓形虫主要表面抗原P30与免疫佐剂CTA2/B 复合基因的克隆载体及酵母表达载体,预测毕赤酵母表达系统对P30-CTX 的抗原性不会产生影响.     

刚地弓形虫RH株GRA2分子基因克隆与序列分析

目的:克隆刚地弓形虫RH株致密颗粒抗原2(Dense Granule Antigen,GBA2)分子基因．为研究使用重组的GPA2分子作为抗原诊断弓形虫病及进行弓形虫分子疫苗研究奠定基础。方法:弓形虫DNA的提取。目的基因GPA2片断的扩增、酶切及纯化。目的基因片断的纯化。目的基因的克隆。核酸序列分析。结果:从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出的402bp的GPA2基因片断，与以往报道的RH株GKA2分子有100％的同源性。结论:本研究成功地获得了刚地弓形虫RH株的GPA2分子基因．为今后此分子作为抗原诊断弓形虫病及进行弓形虫核酸疫苗研究奠定基础。     

CAI在人体寄生虫学教学中的应用和探索

计算机辅助教学(ComputerAssistedInstruction,CAI)是一种新教育理念、新教学手段的体现,是一门综合计算机科学、教育学、心理学等诸多学科相结合的边缘交叉科学,其目的是运用计算机运算速度快、存储容量大、易于检索、对图像和声音等媒体处理快的特点进行辅助教学,以提高教学质量,促进教育现代化。随着计算机多媒体技术的发展和广泛应用,CAI在医学教育中的地位日益提高,愈来愈被广大教师所接受和重视,显示了传统教学手段所不能比拟的优越性。作者等在人体寄生虫学教学中进行了CAI的初步尝试,并对该教学方法的教学效果进行了一些研究和…     

弓形虫抗原与霍乱毒素A2/B亚基复合基因在小鼠体内诱导的免疫反应

目的　观察弓形虫主要表面抗原SAG1、SAG2 与霍乱毒素A2 /B亚基复合基因真核质粒经肌肉免疫小鼠所诱导的免疫反应。方法　将SAG1基因、SAG2 基因及CTXA2 /B基因定向连接插入真核表达质粒pcDNA3.1,经酶切及测序,获得pcDNA3.1 SAG1 SAG2 及pcDNA3.1 SAG1 SAG2 CTXA2 /B的重组子;碱裂解法大量制备经肌肉注射免疫BALB/c鼠,每只鼠经后腿肌肉注射质粒10 0 μg ,每2周免疫1次,共3次,以PcDNA3.1空质粒注射组及PBS组为对照,分别于每次免疫前断尾取血和免疫后4周取小鼠脾脏测定T淋巴细胞增殖活性及NK细胞活性,ELISA法测定IgG抗体。结果　免疫组小鼠的IgG抗体水平明显提高,NK细胞杀伤活性和T细胞增殖活性也明显增强。免疫鼠抗攻击感染的时间延长。结论　含有霍乱毒素的复合基因免疫小鼠后体液免疫和细胞免疫水平均有提高。     

脂溢性角化皮肤EGF的表达

目的 :探讨EGF在脂溢性角化中的作用机制 .方法 :用免疫组化方法检测正常组织 ,棘层肥厚型和角化过度型皮损中EGF表达 .结果 :正常皮肤组织EGF表达于基底层 (+:10 0 % ) ,基底上层几乎不表达 ;在角化过度型皮损中 ,表达于表皮全层 ,但表达强度比棘层肥厚型皮损弱而比正常组织强 ( :85 .7% ) ,在棘层肥厚型皮损中 ,表达于表皮全层( :95 .8% ) ,前两者与后者有显著差异性 (P <0 .0 5 ) .结论 :EGF在脂溢性角化的棘层肥厚的形成中起关键作用