产志贺毒素大肠埃希菌分离株多位点可变数目串联重复序列分析

目的 探讨多位点可变数目串联重复序列分析[multiple-locus VNTR (variable-number tandem repeats) analysis,MLVA]分型方法对产志贺毒素大肠埃希菌分离株的分型效果,初步了解菌株分子流行病学特征。 方法 采用7个VNTR位点对70株产志贺毒素大肠埃希菌分离株进行分析,并根据多态性位点的重复数目利用BioNumerics软件进行聚类分析。 结果 70株菌株被分为46种MLVA型别,O157与非O157菌株可分为A、B两个明显不同的群。除少部分菌株外,不同宿主来源、志贺毒素型别及血清型的非O157菌株与MLVA型别存在较好的相关性。 结论 7个VNTR位点的MLVA分型方案对于产志贺毒素大肠埃希菌的菌株分型、暴发溯源等具有一定的参考价值,但仍需进一步完善。     

16SrRNA基因克隆文库用于菌群分析的效能研究和评价

目的建立16SrRNA基因克隆文库进行菌群相对定量的方法，评价其对细菌的检测效率以及对混合菌群巾低含量细菌的分析能力。方法取脆弱类杆菌等9种细菌以相同及级差比例制备细菌悬液，分别用或不用变溶菌素处理后，用试剂盒提取核酸，16SrRNA基因通用引物进行PCR扩增、纯化、连接、克隆和测序，建立16SrRNA基因克隆文库，将序列与数据库进行比对分析。结果相同比例制备的菌悬液，加或不加变溶菌素提取的核酸，掺入的9种细菌均可检出。级差比例制备的菌悬液，加变溶菌素提取核酸，掺入的9种细菌均可检出；不加变溶菌素提取核酸，数量少难裂解的革兰阳性菌双歧杆菌未能检出。混合菌悬液中各种细菌的比例与文库反映的各种细菌的比例有数量对应关系，但不是线性对应关系。结论16SrRNA基因序列分析是一种较好的细菌菌群分析方法，它可以同时检出多种细菌，并能对混合细菌标本进行菌群相对定量，反映菌群中各种细菌的丰度，但不能准确定量菌群中各种细菌的数量。     

光量子血疗防止输血反应：附262例报告

输血是临床治疗的重要措施之一,应用广泛。尽管检验技术和血型免疫学有了很大进展,但因输血引起的各种反应及其并发症较常见,亦常给输血者带来不少痛苦,严重者可能威胁生命。怎样才能尽量减少和避免输血反应,这是医学界一直努力和探讨解决的问题。我院于1994年以来,同种异体输血采用经光量子照射后再输给患者,进行观察,收到良好效果。现将治疗情况,并设对照组,报告如下。 1 临床资料     

小儿肾病综合征的护理进展

肾病综合征(ｎｅｐｈｒｏｔｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ,简写ＮＳ)在小儿肾脏疾病中发生率仅次于急性肾炎,它是一组由多种原因引起肾小球基底膜通透性增加,导致血浆内大量蛋白质从尿中丢失的临床综合征,有4大特点,即大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症、明显水肿[1]。传统的ＮＳ的护理范畴大致包括心理治疗及护理、饮食护理、糖皮质激素治疗及护理、细胞毒药物应用的护理[2]。近年来随着对ＮＳ不断的研究,使以下4个方面的护理内容不断更新和充实。1　心理治疗及护理研究表明,ＮＳ患儿及家长具有内向、情绪不稳定性的个性生化倾向,心理上具有比较明…     

甘肃省2006-2009年细菌性痢疾耐药谱及脉冲场凝胶电泳分析

目的 对中国甘肃省2006-2009年细菌性痢疾监测点分离到的志贺菌进行耐药谱和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型研究,探讨甘肃省细菌性痢疾的分子流行病学特征.方法 对2006-2009年甘肃省细菌性痢疾监测点分离到的473株志贺菌进行血清型及耐药性分析;采用限制性内切酶对2009年分离的166株志贺菌进行PFGE分型...     

泰州市腹泻病人中致泻大肠埃希氏菌感染状况及 病原学特征分析

摘要:目的　了解泰州市腹泻病人中致泻大肠埃希氏菌感染状况、毒力基因、分子分型以及耐药性情况,为致泻大肠埃希氏菌防治提供依据。方法　对2013年泰州市215份腹泻病人粪便标本进行多重PCR鉴定和分离培养,并对分离的致泻大肠埃希氏菌菌株进行生化鉴定、脉冲场凝胶电泳（Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE）分子分型以及药敏试验。结果　215份腹泻病人粪便标本共检测出致泻大肠埃希氏菌30株,其中EPEC 20株（占9.30%）,EAEC 5株（占2.33%）,ETEC 5株（占2.33%）;PFGE结果表明,30株致泻大肠埃希氏菌PFGE带型种类多,各亲缘关系较近,但无100%的同源菌,同时PFGE分析结果表明在同一个粪便中有2种不同致泻大肠埃希氏菌感染情况存在;药敏试验表明,30株致泻大肠埃希氏菌对阿莫西林、四环素耐药性最高,3耐以及以上占63.33%。结论　泰州市腹泻病人中致泻大肠埃希氏菌感染普遍存在,并以EPEC、EAEC、ETEC感染为主,菌株的耐药性较强,耐药谱广;基因型呈多态分布,且具有流行相关性。     

荧光定量PCR技术用于模拟临床标本单增李斯特菌检测的研究

目的利用荧光定量PCR(real-time PCR)技术,建立针对模拟临床标本中单增李斯特菌快速检测方法。方法以单增李斯特菌特异性基因hlyO的部分片段作为靶基因,克隆到pMD18-T载体,制作标准曲线,以确定方法的检测下限。利用各种血清型单增李斯特菌以及常见致病菌(如副溶血弧菌、霍乱弧菌、沙门菌、O157∶H7大肠杆菌等)验证引物探针的特异性,通过制备模拟粪便和血液感染标本,直接提取DNA进行检测,以达到快速检测的目的。结果采用real-time PCR技术对模拟临床标本检测结果显示,只有单增李斯特菌有荧光信号,其他常见致病菌以及李斯特菌属中的无害李斯特菌均没有荧光信号;由标准曲线可知该方法可以检测到22copy/反应管的目的基因,而粪便中6.35×103CFU/g和血液中7.0×102CFU/ml的细菌含量即可被检出;粪便标本在2h内可出报告,血液标本1.5h即可出报告。结论以hlyO为靶基因的Real-time PCR单增李斯特菌的检测技术具有特异性好、敏感性高、快速易操作等优点,可用于临床标本的快速诊断、疾病监测和疫情暴发的病原调查。     

致泻性大肠杆菌和福氏2a志贺氏菌染色体上毒力岛和基因组岛插入相关的tRNA位点的研究

目的探讨毒力岛及外源DNA片段的插入与异常tRNA位点的相关性。方法采用PCR和杂交的方法,从异常tRNA位点寻找致泻性大肠杆菌和志贺氏菌的福氏2a菌基因组中可能的毒力岛或基因组岛。以Escherichia coli K12MG1655序列中的86个tRNA位点的45个区域设计引物,对与K12亲缘较近的几类菌株的相关tRNA及其临近序列的完整性进行了初筛,对发现异常者进一步从其内部补充引物扩增证实,并联合杂交方法进行验证,以已知的E.coli O157∶H7EDL933和S.flexneri2a301的序列来对比PCR结果。结果菌株EDL933,S.flexneri2a301,EPEC2348/69,ETEC10407,EIEC8401,E.coliO157∶H78823/64,EAEC O42,E.coli O25F171中异常tRNA位点的个数分别是14,18,15,14,15,11,21,19。通过序列比对EDL933中8个tRNA位点有O岛插入,S.flexneri2a301中有6个插入了毒力岛,其余的位点均有外源片段插入或原有片段缺失。结论毒力岛及外源DNA片段的插入与异常tRNA位点密切相关。     

两种静脉穿刺方法对白血病患儿浅静脉的影响

静脉输液是临床给药的重要途径之一。病人浅静脉的保护是护士在行静脉穿刺时必须考虑的问题 ,但临床上有些护士对此并未引起足够重视。作者采用两种静脉穿刺方法 ,观察对白血病患儿浅静脉的影响 ,旨在引起临床护士的重视。现报告如下。1　资料和方法1.1　一般资料　 1999年 1月— 2 0 0 0年 1月住院白血病患儿 16例 ,男 10例 ,女 6例 ,年龄 2 .5岁～ 12岁 ,平均 6 .5岁 ;急性淋巴细胞性白血病 11例 ,急性粒细胞性白血病 5例 ;首次住院 13例 ,两次及两次以上住院 3例 ,平均住院 36 .3ｄ。住院期间患儿无明显的出血倾向 ,血小板 48× 10 9/Ｌ…