蚓激酶重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LK~R的构建及其在山羊乳腺组织中的表达

目的在山羊奶中表达蚓激酶。方法将含有蚓激酶基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了蚓激酶重组逆转录病毒载体,转染泌乳期奶山羊乳腺小叶并获得暂时表达。利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到阳性细胞克隆,克隆扩大培养后病毒上清感染妊娠期奶山羊乳腺小叶组织,山羊产后采奶纤维蛋白平板溶圈法检测蚓激酶活性。结果产后奶样经纤维蛋白平板溶圈法检测羊奶具有明显纤溶活性。结论蚓激酶基因已经整合到奶山羊乳腺组织并能实现相对稳定的表达。     

一种改进的显微注射用DNA片段的纯化方法

目的显微注射用DNA的纯度是影响转基因动物制备成功与否的重要因素,本文建立一种可行的适用于普通实验室的纯化DNA方法,替代普遍使用的试剂盒纯化方法。方法分别使用酚-氯仿多次抽提法及常规的凝胶提取试剂盒纯化含有蚓激酶基因的DNA片段,通过显微注射技术将纯化的DNA片段导入小鼠受精卵的原核,制备转基因小鼠。根据转基因实验的结果对两种方法进行比较。结果使用两种方法纯化DNA均能获得转基因小鼠。在DNA纯度及注射卵的存活率上,两种方法无明显差别;在移植卵的出生率及转基因阳性率上,抽提法优于试剂盒法。结论本实验建立的抽提方法可以替代试剂盒方法纯化显微注射用DNA片段,在降低实验成本、简化实验条件及提高转基因阳性率方面具有优势。     

蚓激酶基因在山羊乳腺中的瞬时表达

构建了包括山羊β-酪蛋白基因启动子和蚓激酶基因cDNA的乳腺表达载体pβLK。通过直接注射将重组载体DNA导入山羊的乳腺组织,以纤维蛋白平板法测定乳汁中蚓激酶基因表达产物的活性。实验证实蚓激酶基因可以在山羊乳腺中瞬时表达。在进行山羊乳腺的瞬时表达时,适宜的注射剂量为500μg/ml。注射后6~9 h的表达量最高,达到2.0×105U/L,并持续表达至60 h。     

磁导航支气管镜与肺穿刺在肺外周病变中的诊断率和安全性研究

目的 评价磁导航支气管镜与肺穿刺两种活检方式在肺外周病变中的诊断率和安全性,探索基于患者的病变特征及其他临床表现,选择低风险高获益的活检方法。方法 对2020年—2022年因肺外周病变在复旦大学附属华东医院住院接受磁导航支气管镜下活检和（或）肺穿刺活检的患者进行回顾性分析,根据基线特征进行倾向评分匹配后,对比两种活检方式的诊断率和安全性。结果 共纳入磁导航组126例,肺穿刺组104例,进行倾向评分匹配后获得83对病例。相比于磁导航组,肺穿刺组的诊断率更高（90.4%比48.2%,P<0.001）,但同时更易发生气胸（1.2%比21.7%,P<0.001）。在磁导航组中,诊断效能与病变直径相关[P<0.001,比值比（odds ratio,OR）=0.183,95%置信区间（confidential interval,CI）0.071～0.470],不同肺段之间的诊断率差异无统计学意义（P>0.05）。在肺穿刺组中,不同病变特征等对诊断率没有显著影响,但是病变直径≤30 mm(P=0.019,OR=5.359,95%CI 1.320～21.753)、距胸膜距离≥2...     

大中专学生常规胸透的临床价值及合理性分析

入学体检是大中专院校学生入校的程序之一。X线胸部透视是检测学生心肺状况的体检常规项目之一,但会给学生带来电离辐射的危害。为探讨大中专学生胸透的临床价值及合理性,笔者对近7 a兰州市安宁区万里医院承接体检的大中专学生胸透结果进行了分析。     

输尿管镜气压弹道碎石术治疗59例输尿管结石的临床疗效观察

选取2013年1月~2014年9月我院收治的118例输尿管结石患者。随机分为试验组和对照组各59例,试验组采用输尿管镜气压弹道碎石术,对照组采用超声定位体外冲击波碎石术,比较两组患者彻底碎石的成功率、术中失血量、术后肉眼血尿情况及尿路感染情况。结果对照组碎石成功率为50.85%,试验组碎石成功率为89.83%。试验组患者的术中失血量明显少于对照组,术后肉眼血尿发生率为18.64%、尿路感染情况为3.38%,对照组术后肉眼血尿发生率为45.76%、尿路感染情况为20.33%,均比试验组高,差异有统计学意义(P0.05)。输尿管镜气压弹道碎石术治疗输尿管结石的疗效比超声定位体外冲击波碎石术好,造成的创伤及术后血尿、尿路感染等并发症更少,值得在临床上推广应用。     

Ⅲ度精索静脉曲张患者术后性激素的变化

目的分析Ⅲ度精索静脉曲张患者手术前后性激素的改变,探讨手术治疗精索静脉曲张的疗效。方法 2009年1月至2011年12月河源市人民医院收治的108例Ⅲ度精索静脉曲张患者,患者平均年龄28.3岁(18～36岁),术前抽血测血清睾酮(Testo)、促卵泡成熟激素(hFSH)、促黄体生成激素(hLH)、催乳素(Prol)水平,所有患者均行精索静脉高位结扎术,术后半年抽血复查外周血清性激素;统计分析手术前后患者性激素水平的变化。正常组为具有正常生育能力的健康男性35例,平均年龄26.8岁(19～37岁),同样抽血测血清性激素水平。结果患者术前血清Testo值低于正常组,而hLH、hFSH、Prol值较正常组明显升高(P<0.05),术后患者血清T、DHT值较术前升高,而hLH、hFSH、Prol值较术前降低,术前术后患者性激素比较有统计学差异(P<0.05)。结论Ⅲ度精索静脉曲张能引起性激素的改变,精索静脉高位结扎术后性激素水平明显改善。     

Nucleostemin基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

Tasi等最近发现Nudeostemin (NS)蛋白存在于多种癌细胞的细胞核，并且其与维持癌细胞自我更新能力密切相关。我们应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及核酸分子原位杂交技术检测膀胱移行细胞癌(TCC)中NS基因的表达，探讨其在TCC中的作用。     

前列腺癌基因治疗研究进展

前列腺癌的基因治疗可采用病毒或非病毒载体,通过不同的途径将治疗基因导入前列腺癌细胞,从而在基因水平上治疗前列腺癌。本文就近年来前列腺癌基因治疗研究中的基因转移途径、各种载体、治疗策略、临床取得的成果和目前存在的问题作一综述。     

Hepsin基因在前列腺癌中的研究进展

Hepsin是最近筛查发现的在前列腺癌中高表达的基因,其编码一种Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶,有可能成为前列腺癌的一个新的肿瘤标志物和治疗靶点。本文就Hepsin基因在前列腺癌中的研究作一综述。