异体脱钙骨基质明胶骨粒/骨水泥复合材料的生物力学性能研究

目的　研究不同质量比的部分脱钙骨基质明胶骨粒 /骨水泥复合材料的结构特征及生物力学性能 ,初步分析与复合比例的关系 ,为临床应用提供依据。方法　按 Urist等的方法制备异体部分脱钙骨基质明胶骨粒 ,再与骨水泥按不同比例混和制成含骨粒质量比分别为 0、4 0 0、5 0 0及 6 0 0 m g/ g的部分脱钙骨基质明胶骨粒 /骨水泥复合材料 ,对其进行扫描电镜观察和抗压极限强度、抗弯极限强度测定。结果　不同复合比例材料中骨粒与骨水泥均匀混合分布 ,呈多点面状接触 ,无序排列 ,其中骨水泥相互延续构成材料的骨架 ,不同大小的骨粒分布其间 ;材料间存在较多 10 0～ 4 0 0 μm不规则相互连通的自然裂隙 ,随材料中骨粒所占比例增加 ,骨水泥含量减少 ,自然裂隙增多。含部分脱钙骨基质明胶骨粒质量比为 0、4 0 0、5 0 0及 6 0 0 mg/ g的复合材料的抗压极限强度分别为 (71.1± 2 .0 ) MPa,(46 .9± 3.3) MPa,(39.8± 4 .1) MPa和 (32 .2± 3.4 ) MPa;抗弯极限强度分别为 (6 5 .0± 3.4 )MPa,(38.2± 4 .0 ) MPa,(33.1± 4 .3) MPa和 (2 5 .3± 4 .6 ) MPa。结论　部分脱钙骨基质明胶骨粒 /骨水泥复合材料具有良好的生物力学性能 ,且制备简便 ,易于塑形 ,其中以 10 0～ 4 0 0 μm自然裂隙有利于宿主骨的长入 ,是很好的     

骨组织工程学的研究概况及发展趋势

目的：讨论理想的骨组织工程细胞外支架材料的选择和制备。方法：广泛查询了关于细胞外支架材料的文献,归纳总结了各种细胞外支架材料的优缺点。结果：理想的细胞外支架材料应该是不同材料组成,并含有最佳生长因子组合的多孔的缓释系统。结论：复合型细胞外支架材料的研制是骨组织工程学的发展趋势。     

异体骨基质明胶骨粒 /骨水泥复合材料结构特征及力学性能的初步分析

目的研究不同质量分数比的骨基质明胶骨粒 /骨水泥复合材料的结构特征及生物力学性能 . 方法按 Urist等的方法制备异体部分脱钙骨基质明胶骨粒 , 与骨水泥按不同比例混和制成含骨粒质量分数比分别为 0、 400、 500 mg/ g的复合材料 , 对其进行扫描电镜观察和抗压极限强度、抗弯极限强度测定 . 结果复合比例材料中骨粒与骨水泥均匀混合分布 , 无序排列 , 骨水泥相互延续构成材料的骨架 , 骨粒分布其间 ; 材料间存在较多 100～ 400 μ m的不规则的自然裂隙 , 随材料中骨粒所占比例增加 , 骨水泥含量减少 , 自然裂隙增多 . 结论部分脱钙骨基质明胶骨粒 /骨水泥复合材料具有良好的生物力学性能 , 其中的 100～ 400 μ m自然裂隙有利于宿主骨的长入 , 是很好的骨移植替代材料 .     

女性患者使用及未使用抗骨质疏松药物人工全髋关节置换术后疗效及假体可能生存率比较

目的评价女性患者人工全髋关节置换术使用及未使用抗骨质疏松药物对疗效的影响。方法通过匹配性研究对105例患者进行随访,获得随访83例(85髋),随访率79%,抗骨质疏松组42例(44髋),未抗骨质疏松组41例(4l髋),并对术后病人进行综合性评价和分析。结果两组病人术后疗效及假体可能生存率无显著差异。结论老年女性患者行人工髋关节置换术后无论是否使用抗骨质疏松药物术后疗效相似,假体都没有达到理想固定的效果。     

水飞蓟素可通过MAPK信号转导通路促进肺腺癌A549细胞凋亡

目的:探讨水飞蓟素(SM)对人肺腺癌细胞(A549)的抗癌作用及其分子机制. 方法:采用倒置显微镜和电子显微镜等形态学检测、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪(FCM)技术结合PI及Annexin V双标记染色以及MAPK的磷酸化活性检测方法. 结果:SM对人肺腺癌A549细胞的增殖有抑制作用;SM作用A549细胞48 h后,随着浓度的增加,倒置显微镜下可见细胞数目减少,有些细胞变小、变圆;透射电镜观察发现,随着SM作用浓度的增加,A549细胞中逐步出现增多的凋亡细胞,凋亡细胞表现出典型的超微结构特征;流式细胞仪检测的结果发现,随着药物作用时间的延长,A549细胞的G1期细胞比例增多,S期细胞明显减少,G2期细胞略有减少,并出现一明显的凋亡峰. SM可以抑制A549细胞中ERK的活性,并在一定程度上提高p38和JNK的活性. 结论:SM可以在体外抑制人肺腺癌细胞A549的增殖作用,并诱导其凋亡. SM可能通过抑制A549细胞中ERK的活性,并提高p38和JNK的活性发挥其诱导作用.     

体外诱导C2C12细胞向成骨细胞的分化

目的成骨细胞特异性转录因子a1(core binding factor a1,Cbfa1)通过调节生长因子和骨特异性细胞外基质蛋白的基因表达而参与成骨细胞的分化和骨发育过程。文中构建成Cbfa1,以腺病毒载体转染成肌细胞C2C12,为种子细胞构建组织工程化骨。方法体外培养小鼠成肌细胞C2C12,用重组腺病毒质粒pAd-IL-31介导Cbfa1/Osf2基因瞬时转染小鼠成肌C2C12细胞,Western blot检测Cbfa1蛋白表达。结果 Cbfa1蛋白表达、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定、骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量以及茜素红染色感染组明显高于对照组。结论成肌细胞C2C12可以作为种子细胞构建组织工程化骨。     

碱性成纤维生长因子和人重组骨形态发生蛋白2诱导分化兔骨髓间充质干细胞

背景：骨髓间充质干细胞依赖特定的生长和分化因子能分化为骨、软骨、脂肪等不同组织。人重组骨形态发生蛋白2有明显的骨诱导作用，能诱导未分化的骨髓间充质干细胞不可逆地形成骨与软骨，并最终导致新骨生成；碱性成纤维生长因子亦参与调控骨髓间充质于细胞的软骨与骨的分化。目的：观察碱性成纤维生长因子和人重组骨形态发生蛋白2对兔骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响，以便寻求合适的骨形成诱导方法以代替常规的成骨培养体系。设计：随机对照实验。单位：解放军第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所。材料：培养的兔骨髓间充质干细胞。方法：实验于2004-06／12在第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所暨全军骨科中心完成。①体外培养的兔骨髓间充质干细胞分别经3种不同的生长因子（100μg／L人重组骨形态发生蛋白2，100μg／L碱性成纤维生长因子，100μg/L人重组骨形态发生蛋白2加100μg/L碱性成纤维生长因子）和成骨培养体系处理。②其增殖和分化通过四甲基偶氮唑盐比色法，碱性磷酸酶、骨钙素检测和钙结节Von Kossa染色观察。主要观察指标：通过检测增殖率和碱性磷酸酶活性比较不同生长因子对兔骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响。结果：①人重组骨形态发生蛋白2能促进兔骨髓间充质干细胞的增殖和分化，特别是其分化。②碱性成纤维生长因子能刺激兔骨髓间充质干细胞的增殖，与对照组相比，细胞增值率提高近100％；虽然对兔骨髓间充质干细胞分化无明显影响，但其能促进人重组骨形态发生蛋白2对兔骨髓间充质干细胞分化。结论：碱性成纤维生长因子和人重组骨形态发生蛋白2是兔骨髓间充质干细胞有效的分化因子，两者在体外都能促进兔骨髓间充质干细胞的增殖和分化。碱性成纤维生长因子和人重组骨形态发生蛋白2能协同作用加速骨诱导及骨形成，可以用作分化骨组织工程中的种子细胞。     

浅谈临床路径对骨科临床教学的影响

为了进一步加强临床教学的规范化管理,培养出骨科创新型后备人才,通过引入临床路径的理念和方法开展临床教学工作。2年来的实践显示:临床路径在临床教学工作中合理应用,不仅为骨科临床教学提供了新的教学模式和理念,而且提高了学员全面分析、解决临床问题的能力。     

BMP-9成骨活性的实验研究

目的:评估BMP-9体外诱导成骨活性.方法:构建成功的人BMP-9的腺病毒表达载体、感染小鼠前成骨细胞C2C1 2细胞.通过测量碱性磷酸酶、骨钙素和钙结节来判定成骨活性的大小.结果:BMP-9在前成骨细胞C2C1 2细胞明显地诱导碱性磷酸酶活性.碱性磷酸酶组织化学染色分析和碱性磷酸酶化学分析结果相一致,能明显诱导骨钙素的表达及矿物质结节形成.结论:小鼠前成骨细胞C2C12细胞向成骨细胞分化中BMP-9起了重要作用.     

绿色荧光蛋白标记基因体内示踪骨髓间充质干细胞的分化

目的利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记技术,观察组织工程骨在体内形成过程中种子细胞的变化与转归。方法Adeno-X^TM-GFP扩增和纯化后,测定病毒滴度,感染新西兰大白兔骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,并在荧光显微镜下观察GFP表达情况。确认标记成功后,将其与未标记的兔MSCs共同成骨诱导培养3周后,接种于磷酸钙骨水泥（calcium phosphate cement,CPC）-纤维蛋白胶（fibrin glue,FG）复合支架材料,构建组织工程骨作为实验组,回植于供体兔皮下。单纯CPC-FG复合支架材料植入对称部位作为对照。术后1、2、3周行碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性测定;4周,激光共聚焦显微镜下对GFP进行示踪观察和型胶原、骨钙素（osteocalcin,OC）免疫组织化学检测成骨细胞功能蛋白,Masson染色观察新骨形成。结果Adeno-X^TM-GFP经扩增和纯化后,病毒噬菌斑形成,测得病毒滴度为3×108pfu/ml。Adeno-X^TM-GFP感染MSCs后96h,可见GFP表达,感染率达50%～70%,细胞分裂增殖基本正常。术后1、2、3周,实验组ALP活性分别为12.546±1.091、16.567±0.659和20.443±0.706,对照组分别为0.453±0.113、0.243±0.018和0.308±0.056,差异有统计学意义（P〈0.05）。4周,实验组大体可见组织工程新骨形成,对照组未见新骨形成;组织学显示实验组新生骨小梁围绕材料孔隙形成,CPC-FG复合支架材料部分降解;实验组型胶原、OC免疫组织化学结果阳性,对照组未见阳性染色;实验组可见新生组织内有GFP标记的细胞。结论组织工程骨组织结构与松质骨小梁类似,新生组织表达GFP,提示组织工程骨组织的形成来源于接种的细胞。