对居家临终患者及其家属临终关怀体验的质性研究

目的了解居家临终患者及其家属对社区居家临终关怀的感受。方法采用访谈法,收集15组居家临终患者及家属在接受居家临终关怀护理干预后的心理体验,运用现象学分析法进行分析形成质性描述。结果老年临终患者与家属对临终关怀的感受主要有以下几个方面：接受临终关怀护理干预后患者与家属对死亡的态度是积极正性的;居家临终关怀可以满足患者身心灵需求;居家临终关怀提高了家属的照护技能,缓解了心理压力。结论居家临终关怀帮助患者及其家属以积极的心态面对死亡。社区卫生服务提供的临终照护知识和技能,帮助家属提高照护能力,满足患者身心的需求,提高临终患者及其整个家庭的生活质量。     

低氧环境对小鼠未成熟关节透明软骨细胞培养的影响

目的研究低氧和低氧模拟化合物氯化钴对小鼠未成熟关节透明软骨细胞氧感应基因和细胞表型的影响。方法经酶消化分离出小鼠未成熟关节透明软骨细胞，分别在21％氧、2％氧和150μmol/L氯化钴条件下培养一定时间。通过倒置显微镜、透射电镜和扫描电镜观察细胞形态学变化。应用定量PCR和Western Blot检测葡萄糖转运体-1（GLUT-1）、葡萄糖转运体-3（GLUT-3）、磷酸果糖激酶-1（PGK-1）和低氧诱导因子-1α（HIF—1α）的表达。应用定量PCR观察软骨细胞表型改变。应用四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测低氧及氯化钴对软骨细胞活性的影响。用葡萄糖检测试剂盒测葡萄糖摄取量。结果不同培养条件下软骨细胞形态无明显差异。2％氧和氯化钴可增加GLUT-1、GLUT-3及PGK-1mRNA表达。2％氧和氯化钴可促进GLUT-1、GLUT-3和HIF—1α蛋白表达。低氧和氯化钴促进细胞活性，增加葡萄糖摄取并促进细胞外基质合成。结论软骨细胞能通过调节氧感应基因适应低氧环境，HIF—1α可能起关键作用。低氧能在一定程度上增加软骨细胞活性和细胞外基质合成。模拟体内氧环境培养细胞能更好地了解软骨细胞特性。     

低氧对小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1表达的影响

目的 探讨低氧环境对小鼠成骨细胞富含半胱氨酸61（Cyr61/CCN1）表达的影响。 方法 分别在氧浓度和去铁敏诱导的低氧环境下培养小鼠成骨细胞,Real-time PCR和Western blotting于不同时间点检测成骨细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Cyr61/CCN1和血管内皮生长因子的表达。分别敲除小鼠成骨细胞中HIF-1α和VHL基因,检测细胞Cyr61/CCN1的表达。 结果 两种低氧环境下,小鼠成骨细胞HIF-1α通路被激活,Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。HIF-1α基因敲除小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著减少,VHL基因敲除成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。 结论 低氧环境通过激活HIF-1α通路来上调小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1的表达。     

氧环境影响关节软骨细胞表型的相关研究

[目的]观察检测低氧和常氧条件下原代和传代后软骨细胞各特异性基因及蛋白表达的改变.[方法]采用3～5日龄C57BL/6小鼠,取四肢关节软骨,经机械分离和酶消化法获得关节软骨细胞,将原代细胞P0和传代后细胞P_1、P_2分别在普通和低氧培养箱中培养2 d,用RT-PCR检测II型胶原、可聚蛋白聚糖和sox9特异性基因及Ihh、PTHrP、bmp4、wnt5a分化相关基因的表达差异,原代软骨细胞用免疫组化和阿利新蓝染色检测II型胶原、可聚蛋白聚糖的蛋白表达.[结果]低氧条件下,免疫组化显示II型胶原和可聚蛋白聚糖的表达较普通培养增强,II型胶原、wnt5a的基因表达增强,Ihh的表达降低;传代后软骨细胞的蛋白、特异性基因和分化相关基因表达未见明显差异.[结论]低氧条件下,原代软骨细胞的II型胶原表达增强,且可能主要是受Ihh、wnt5a等分化相关基因的调控.短期单层培养方式不能明显改善、恢复特异性基因表达降低的传代后软骨细胞表型.     

居家老年临终患者家属照顾者照顾感受的质性研究

目的 了解我国居家老年临终患者家属照顾者的照顾感受,为提供适合家属照顾者需求的临终关怀和发展社区护理服务奠定基础。方法采用质性研究中的现象学研究方法,对11名居家老年临终患者的家属照顾者进行半结构式深入访谈,并用现象学分析法进行资料分析。结果分析出关于照顾者感受的5个主要主题：承受照顾负荷;心理负担较重;缺乏支持,渴望...     

长期低氧对骨肉瘤细胞增殖与分化的影响

目的 观察长期低氧对骨肉瘤细胞增殖、分化及骨肉瘤干细胞自我更新能力的影响.方法 采用噻吩蓝(MTT)比色法观察低氧对骨肉瘤细胞系MG63增殖的影响.后续试验分为两组:第1组为低氧处理组,将MG63细胞在低氧环境下培养1周后进行实验;第2组为常氧对照组.应用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测两组骨肉瘤细胞的成骨分化基因(Runx2和OC)、胚胎干细胞标志基因Oct3/4、原癌基因c-Myc及低氧诱导因子(HIF)-1a、2a的表达.采用无血清悬浮球培养法观察并比较两组细胞肉瘤球数目和体积的差异.采用免疫组织化学染色法检测两组细胞中HIF-1a和HIF-2a蛋白的表达.结果 培养第6、9天,低氧处理组的光密度(D)值为0.128±0.020、0.700±0.060,分别显著高于常氧对照组的0.073±0.050、0.480±0.120(P值均＜0.05).低氧处理组MG63细胞骨肉瘤球的数目为(24±10.97)个,显著高于常氧对照组的(1 3±3.95)个(P＜0.05);低氧处理组MG63骨肉瘤球的体积显著大于常氧对照组.与常氧对照组比较,低氧处理组细胞的成骨标志基因Runx2和OC均显著下调(P值均＜0.05),胚胎干细胞标志基因Oct3/4和原癌基因c-Myc表达均显著上调(P值均＜0.05),HIF-2α表达显著上调(P＜0.05);免疫组织化学染色检测到MG63细胞中有HIF-1a和HIF-2a蛋白表达.结论 长期低氧可促进骨肉瘤细胞MG63的增殖,抑制其成骨分化,并促进骨肉瘤球的自我更新能力,增强其干细胞特性.HIF-2a蛋白可能在这些过程中发挥关键作用.     

大鼠髁突软骨细胞冻存复苏后的生物学特性观察

目的观察低温冻存1月后,不同年龄大鼠髁突软骨细胞的生物学特性。方法体外培养出生后1天、7天、14天、28天共4组SD大鼠髁突软骨细胞。对冻存复苏后的细胞进行形态学观察;甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色检测其对糖胺聚糖(GAG)、Ⅱ型胶原的合成能力;台盼蓝拒染试验测定细胞成活率;MTT法观察细胞增殖能力;实时定量-聚合酶链式反应(real time-PCR)检测冻存后细胞增殖核抗原(PCNA)基因表达情况。结果低温冻存后,各年龄组大鼠髁突软骨细胞仍能保持软骨细胞特有的形态及特性;细胞成活率均大于90%;生长曲线近似"S"型;冻存后各年龄组细胞pcna基因表达较冻存前无显著统计学差异(P>0.05)。结论低温冻存1月后的大鼠髁突软骨细胞成活率高,并保持了其生物学特性及增殖活性。     

不同类型静水压对兔软骨细胞表型的影响

目的:传代和压力负荷都是影响软骨细胞表型的因素。单层培养的关节软骨细胞在培养过程中随着传代逐渐失去了典型软骨细胞的形态学特征,变得像成纤维细胞,而且II型胶原的分泌减少,失去了软骨细胞特异性,即出现了反分化[1]。Lee MS等发现,某些机械应力可诱导软骨细胞凋亡,改变软骨细胞的新陈代谢,也会导致关节软骨的退变[2]。在适当的应力刺激下,软骨细胞可以通过调节基质代谢来适应压力,但在过度或持续的应力下软骨细胞就可能产生各种病理改变[3]。本试验将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养,并传代,在生理水平的流体静态压力范围内(0.1-15MPa)[4]施加不同大小的循环静水压,以及不同大小的持续静水压,观察其对兔软骨细胞损伤和表型的影响。方法:试验组循环加压组分为0.15MPa、0.5Mpa、1MPa三个小组,对照组为持续加压组(分为0.15MPa,0.5MPa,1MPa三个小组)和常压持续培养组。用酶消化法获取兔关节软骨细胞,在静水压力负载装置中按照上述分组作普通培养瓶贴壁的单层培养,并传代。检测Ⅰ型胶原和II型胶原免疫组化,苏木素套核染色,倒置显微镜观察摄影。以RT-PCR方法检测软骨细胞中Proteoglycan,Aggrecan,Ⅰ型胶原和II型胶原mRNA的表达。结果:在循环静水压力下培养,软骨细胞有较高的细胞增殖率,II型胶原,Proteoglycan和Aggrecan等表达增加。生理水平的循环静水压越高,软骨细胞表型越稳定。常压持续培养在第6代开始出现表型改变;持续静水压力培养的软骨细胞更早失去软骨细胞的特有表型,并且持续静水压力越大,表型改变越早。结论:在生理水平的静水压范围内一定频率和大小的循环静水压力能维持或促进软骨细胞的合成分泌功能,有助于软骨细胞特有表型的稳定。     

循环静水压力对维持兔软骨细胞表型的影响

目的：本研究将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养，并传代，施加不同频率和大小的静水压，观察其对兔软骨细胞表型的影响。方法：用酶消化法获取兔关节软骨细胞，分别在不同的压力和频率下作普通培养瓶贴壁的单层培养，并传代。40kPa循环静水加压为实验组，40kPa持续静水加压培养和常压培养作为对照。Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原免疫组化，苏木素套核染色，倒置显微镜观察摄像。以RT—PCR方法检测软骨细胞中蛋白聚糖、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原mRNA的表达。结果：在循环静水压力下培养，软骨细胞有较高的细胞增殖率，培养至第7代未见明显表型改变，仍然表达Ⅱ型胶原、蛋白聚糖和聚集蛋白聚糖等。常压培养，软骨细胞传代至第5代以后，逐渐失去软骨细胞的特有表型。而持续静水压力培养的软骨细胞传代至第3代以后就开始逐渐失去软骨细胞的特有表型。结论：一定的循环静水压力能维持软骨细胞的合成分泌功能，有助于软骨细胞特有表型的稳定。     

老年高血压与正常血压人群靶器官损害的特点

目的　通过对老年白大衣高血压患者与持续性高血压、正常血压者的比较 ,探讨三者在靶器官损害方面的差异及特点。　 方法　对 3组人群分别进行 2 4h动态血压、心脏彩超及颈动脉超声检查 ,对其结果进行比较。　 结果 　老年白大衣高血压患者左室舒张功能有所减退 ,表现在E/A比值下降 ,A峰速度时间积分 (AI)升高 ,A峰充盈分数 (AFF)升高 ,E峰充盈分数 (EFF)下降 ,等容舒张时间 (IVRT)延长 ,与正常血压组有显著差异 (P <0 0 5 ) ;白大衣高血压组左室肥厚率 ( 8% )介于正常血压 ( 0 )与持续性高血压 ( 14 2 8% )之间 ;颈动脉粥样斑块形成率( 2 8% )亦介于正常血压 ( 17 78% )与持续性高血压 ( 5 1 0 2 % )之间。　 结论 　老年白大衣高血压已存在一定程度的靶器官损害 ,其程度介于正常血压与持续性高血压之间。