猪链球菌脉冲场凝胶电泳分析方法的建立

目的 建立一种可共享的猪链球菌脉冲场凝胶电泳分析(PFGE)方法.方法 利用PulseNet技术优化猪链球菌PFGE分子分型方法,提出新的分析方案,包括胶块的制备、内切酶的选择、电泳条件等.利用DNAStar的Mapdraw软件对猪链球菌基因组序列进行分析,发现在242种内切酶中,Swa Ⅰ、Sma Ⅰ、Apa Ⅰ种酶比较适合.结果 通过对34个血清型共100株菌的分析,发现使用Swa Ⅰ可获得59种带型,使用Sma Ⅰ可获得53种带型,使用Apa Ⅰ可获得43种带型.其中以Swa Ⅰ的分辨率最好.结论 提出猪链球菌的Swa Ⅰ PFGE分析方法,并对条件进行优化,较原方法所需时间短、图像清晰,更具有可重复性,基本具备推广的条件.     

对流行地区的E.coli O157：H7病原学分析及研究

目的：对流行地区O157：H7进行病原学分析。方法：PCR方法对O157：H7菌株毒力基因谱检测比较，同时用PFGE和RAPD方法对O157：H7菌株的同源性分析比较。结果：流行地区分离的O157：H7菌株，100％携带Hly,eaeA基因，95．35％携带SLT2基因，11．63％携带SLT1基因，PFGE图谱表明流行地区分离的O157：H7菌株与日本分离的O157：H7菌株有明显差异，为不相关菌株；与国内标准菌株882364为近似型（相似，但不相同），流行地区病人分离菌株与外环境家畜家禽类便与昆虫肠道分离菌的PFGE图谱完全相同，结论：携带O157：H7菌株的家畜家禽可能是导致疫情发生的传染源。PFGE用于O157：H7病原学分析，对流行病学研究有重要意义，但不适宜基层，RAPD方法用于O157：H7病原学分析，技术简便，省时。     

徐州市2000年肠出血性大肠埃希菌O157：H7感染性腹泻的调查

目的 了解徐州市丰县和铜山县肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7引起的出血性结肠炎（HC）在腹泻病患者中所占的比例，以及临床症状和肾功能变化的情况。方法 使用EHECO157胶体金快速检测试剂筛选粪便标本，阳性者使用免疫磁珠方法分离病原菌。对经过细菌学证实的EHECO157：H7引起的HC患者，进行临床症状的观察和生化检验指标分析。结果 2000年5月份，丰县由EHECO157：H7引起的HC占腹泻病患者0.98%，6月份铜山县的HC患者占腹泻病患者5.89%。在出现腹泻病症状的同时，18.5%患者的肾功能已经出现异常，表现为尿蛋白，血清肌苷或血尿素氮等指标的升高，在27例HC患者中，有14和13例分别分离到不产生志贺毒素和产生志贺毒素的EHECO157：H7菌株，根据分离菌株是否产生志贺毒素将患者分为两组进行比较，尿蛋白阳性患者的比例分别为4/13和1/14，血小板减少患者的比例分别为6/13和3/14，统计学分析有显著意义。提示分离到产生志贺毒素的EHECO157：H7菌株的患者，发生肾功能异常的可能性较大，结论 此次调查证实了EHECO157：H7感染所引起的HC在整个腹泻病患者中所占的比例随季节的变化而不同，感染产生志贺毒素EHECO157：H7菌株的患者，发生肾功能异常的可能性要比不产生志贺毒素的大，还证实了在该菌感染的初期，患者的肾功能就已经出现了异常。     

小肠结肠炎耶尔森菌O∶3血清型特异性单克隆抗体制备

目的　制备出小肠结肠炎耶尔森菌血清O∶3型特异的单克隆抗体。方法　用常规的骨髓杂交瘤融合技术。结果　筛选到了一株针对于小肠结肠炎耶尔森菌O∶3血清型特异性的克隆株 (编号 :Y6H8) ,且证实分泌的抗体属于针对于脂多糖免疫球蛋白IgG ,可用于玻片凝集法鉴定 0∶3血清型小肠结肠炎耶尔森菌。 结论　通过本实验证实小肠结肠炎耶尔森菌血清O∶3型菌株脂多糖存在其特异性成分 ,可用于该菌株的分型鉴定     

福氏痢疾杆菌2b血清型菌株基因组中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式研究

目的 研究福氏痢疾杆菌2b血清型菌株中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式.方法 根据2b血清型菌株基因组中SFII和SfX前噬菌体可能的整合位点及排列方式,设计引物,对50株2b血清型菌株进行PCR扩增,并对扩增产物测序,根据扩增和测序结果判断噬菌体的整合位点和排列方式.结果 在2b血清型菌株中,SfII和SfX前噬菌体前后相连,整合于宿主菌染色体proA和yaiC基因间的thrW tRNA基因上;以SfII在前,SfX在后,或SfX在前,SfII在后两种方式排列;而以后一种方式为主,在共50株检测菌株中,有49株为此方式.结论 福氏痢疾杆菌血清型相关噬菌体的整合位点及排列方式,对研究福氏痢疾杆菌血清型转换及血清型相关噬菌体的整合机制具有重要意义.     

江苏省徐州地区小肠结肠炎耶尔森菌病原学特征分析

小肠结肠炎耶尔森菌(Yersinia enterocolitica,Ye)病是引起国际社会广泛关注的一种新发肠道传染病,近来国际上多次报道"非致病性Ye"引起的人群感染,甚至是暴发,受到相关学者的关注[1].徐州地区先后进行了两次相隔22年的调查和相关研究,现将Ye病原学特征分析如下.     

徐州市2000年肠出血性大肠埃希菌O157∶H7感染性腹泻的调查

目的　了解徐州市丰县和铜山县肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)O15 7∶H7引起的出血性结肠炎 (HC)在腹泻病患者中所占的比例 ,以及临床症状和肾功能变化的情况。方法　使用EHECO15 7胶体金快速检测试剂筛选粪便标本 ,阳性者使用免疫磁珠方法分离病原菌。对经过细菌学证实的EHECO15 7∶H7引起的HC患者 ,进行临床症状的观察和生化检验指标分析。结果　 2 0 0 0年 5月份 ,丰县由EHECO15 7∶H7引起的HC占腹泻病患者 0 .98% ,6月份铜山县的HC患者占腹泻病患者5 .89%。在出现腹泻病症状的同时 ,18.5 %患者的肾功能已经出现异常 ,表现为尿蛋白、血清肌苷或血尿素氮等指标的升高。在 2 7例HC患者中 ,有 14和 13例分别分离到不产生志贺毒素和产生志贺毒素的EHECO15 7∶H7菌株。根据分离菌株是否产生志贺毒素将患者分为两组进行比较 ,尿蛋白阳性患者的比例分别为 4 / 13和 1/ 14 ,血小板减少患者的比例分别为 6 / 13和 3/ 14。统计学分析有显著意义。提示分离到产生志贺毒素的EHECO15 7∶H7菌株的患者 ,发生肾功能异常的可能性较大。结论　此次调查证实了EHECO15 7∶H7感染所引起的HC在整个腹泻病患者中所占的比例随季节的变化而不同 ,感染产生志贺毒素EHECO15 7∶H7菌株的患者 ,发生肾功能异常的可能性要比不产生志贺     

从河川水分离假结核耶尔森菌结果分析

目的：调查河川水假结核耶尔森菌(Y．pseudotuberculosis)分布情况。方法:采集河川水用3种处理方法进行目的菌分离。结果:检出Y．pseudotuderculosis28株。结论:检查河川水进行目的菌分离是一个非常好的指标。