HPV联合MNNG对Het-1A细胞恶性转化的影响

目的：探讨人乳头状瘤病毒（HPV）全长基因转染与N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）染毒联合作用对食管正常上皮Het-1A细胞恶性转化的影响,为食管癌的发病机制提供理论依据。方法：以Het-1A细胞为靶细胞,设4组,包括空载体转染对照组、转染HPV-18组（HPV）、MNNG染毒组（MNNG）、HPV与MNNG联合作用组（HPV+MNNG）,其中MNNG染毒剂量为2 μmol/L,每代染毒1次,每次24 h;选取第10代、20代及35代细胞进行形态学观察和功能学试验。采用CCK-8法检测各代各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各代细胞周期分布,用增殖指数表示细胞的增殖状况。并采用Annexin V-APC/PI双染法检测细胞凋亡,通过侵袭迁移能力以及软琼脂集落形成试验检测细胞恶性转化表型,最后通过裸鼠成瘤试验观察恶性转化细胞在体内的增殖状况。结果：随着染毒代数增加,HPV+MNNG组与MNNG组细胞形态发生了明显的改变,连接松散、细长、伴伪足。CCK-8检测结果与细胞周期检测结果一致,与对照组比较,HPV+MNNG组和MNNG组的细胞增殖活性出现了先升高再下降最后升高的趋势（P均 < 0.05）,且HPV+MNNG组细胞变化更明显。与MNNG单独作用组比较,HPV+MNNG联合作用组细胞的抗凋亡能力增强（P < 0.05）。侵袭和迁移试验结果显示HPV+MNNG组穿膜细胞数均显著高于其他各组（P < 0.05）,MNNG组次之;软琼脂集落形成试验中,HPV+MNNG组细胞集落形成率[（30.8±0.2）%]高于MNNG组[（27.1±0.3）%]（P < 0.05）。HPV+MNNG组与MNNG组裸鼠成瘤率均为100%,瘤体大小无显著性差异。HPV单独作用组与对照组裸鼠未成瘤。结论：HPV与MNNG联合作用可致食管正常上皮细胞Het-1A恶性转化,使细胞增殖能力、抗凋亡能力、侵袭迁移能力及非锚定独立生长能力均显著增强,参与并促进恶性转化进程。     

纳米二氧化钛毒性线虫模式生物评价

目的 利用模式生物—秀丽隐杆线虫探讨二氧化钛(TiO₂)纳米颗粒的毒性作用,为建立线虫作为毒理学评价模型提供试验依据。方法 采用5,35,300 nm等3种粒径的二氧化钛对秀丽隐杆线虫以0.1,1.0,10.0 μg/L等3个浓度染毒24 h,应用世代时间、后代数目、头部摆动频率和身体弯曲频率及体长等生殖、运动和发育的相关指标对纳米二氧化钛毒性作用进行综合评价。结果 与对照组比较,暴露于5 nm TiO₂的线虫在中高浓度暴露组均出现生殖、运动和发育等多系统的异常(P<0.05);而暴露于35 nm TiO₂的线虫仅在高浓度暴露组出现生殖、运动等指标的异常(P<0.05);暴露于300 nmTiO₂时高浓度暴露组的线虫出现身体弯曲频率降低(P<0.05),其他浓度组未出现差异有统计学意义的改变。结论 纳米TiO₂暴露可影响秀丽隐杆线虫运动、生殖和发育等多种系统,并与粒径和暴露浓度有关。     

煤烟颗粒提取物对大鼠肺细胞的氧化 性损伤作用

目的：通过加入抗氧化剂N－乙酰半胱氨酸,作为实验干预手段。方法：观察煤烟对大鼠肺Ⅱ型细胞生长和DNA交联形成作用的影响。结果：与对照组相比,分别加入10、30mmol/L N－N乙酰半胱氨酸后的实验组细胞毒性有所下降, 从而间接地证实了氧化性损伤的存在;同时,N－乙酰半胱氨酸还可以降低煤烟经细胞染毒所致的DNA交联作用 。结论：煤烟可能是经过细胞代谢活化后产生的某些代谢产物而导致细胞的氧化性损伤。     

环境内分泌干扰物检测方法研究进展

环境内分泌干扰物对动物和人类的潜在效应日益受到关注，已成为继煤烟、汽车尾气之后迫切需要治理的第三代环境污染物。当前十分需要快速准确检测环境内分泌干扰物的技术方法。本文对环境内分泌干扰物相关检测技术进行了综述。     

氯氰菊酯对模式动物秀丽隐杆线虫生殖能力的损伤作用

目的：应用模式动物秀丽隐杆线虫研究菊酯类农药氯氰菊酯的生殖毒性,并对秀丽隐杆线虫模型在生殖毒理学中应用的可行性进行初步探讨。方法：将L4期野生型秀丽隐杆线虫分别于0.08、0.8和8.0 mg/L的氯氰菊酯中暴露24、48和72 h,每组10条,以K溶液为阴性对照,分别在体视显微镜和光镜下计数后代数目、子宫内受精卵数目、卵母细胞数目并观察形态,体外排受精卵速率。结果：L4期野生型秀丽隐杆线虫暴露于氯氰菊酯24 h后,各观察终点均无显著性变化;暴露48 h后,8.0 m/L浓度染毒组发生后代数目降低,0.8和8.0 m/L染毒组纳精囊旁侧第2位卵母细胞相对长度减小且子宫内受精卵数目降低,0.08、0.8和8.0mg/L染毒组体外排受精卵速率均下降,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;暴露72 h后,0.8和8.0 m/L染毒组后代数目降低,纳精囊旁侧第2位卵母细胞相对长度减小,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：模式动物秀丽隐杆线虫生殖系统对氯氰菊酯具有一定敏感性,在生殖毒理学研究中具有潜在应用价值。     

miRNA模拟物转染人支气管上皮细胞的影响因素和条件筛选

目的：研究miRNA模拟物浓度、脂质体浓度、转染时间对人支气管上皮细胞转染效果和毒性的影响,筛选miRNA模拟物转染人支气管上皮细胞的最适宜条件。方法：分别应用0、10、30、50nmol/L化学合成的、经Cy3标记的miRNA模拟物,以0、0.1%、0.3%、0.5%浓度的脂质体转染剂转染人支气管上皮细胞,转染6、12、24h后应用荧光显微镜观察细胞转染情况,计算荧光强度,评价转染效果;转染24h后,应用WST_8法检测不同转染条件对细胞活性的影响。结果：随着miRNA模拟物、脂质体浓度增加和转染时间的延长,细胞内荧光信号增强。30和50nmol/LmiRNA模拟物的转染效率明显高于10nmol/L组（P〈0.05）;0.3%和0.5%脂质体组的转染效率明显高于0.1%组（P〈0.05）;转染24h的荧光强度明显高于转染12h和6h组（P〈0.05）。与对照组相比,转染24h后各转染组细胞活性无显著性变化（P〉0.05）。结论：人支气管上皮细胞适合应用脂质体进行化学合成miRNA模拟物的转染研究,miRNA模拟物浓度、脂质体浓度、转染时间均是转染的重要影响因素,30nmol/LmiRNA模拟物、0.3%脂质体、转染24h可获得理想的转染效果,转染后对细胞活性无影响。     

烹调油烟颗粒有机提取物对大鼠肺II型细胞周期的影响

为观察菜油油烟颗粒有机提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞周期影响,从大鼠肺组织中分离得肺Ⅱ型细胞,分别培养和染毒２４ｈ后,应用流式细胞仪进行测定。结果表明,在受试剂量范围内,菜油油烟颗粒提取物对细胞Ｓ期有促进作用,Ｇ２－Ｍ期提前;细胞增殖指数（ＰＩ）增加,二倍体指数（ＤＩ）随染毒剂量而增高。由此提示,菜油油烟颗粒有机提取物可以对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞周期产生影响,加速细胞分裂。     

南京市肺癌环境危险因素的病例对照研究

目的探讨近年来南京市肺癌发生的环境危险因素.方法对南京市63例原发性肺鳞癌和89例原发性肺腺癌进行1:1配对病例-对照研究,并用条件Logistic回归模型分析危险因素.结果慢性支气管炎史、吸烟指数是肺鳞癌发生的环境危险因素,其OR值分别为8.55,2.35;人群归因危险度分别为18.22%,58.80%;综合人群归因危险度为0.6871.慢性支气管炎史、肺结核史、不良烹调习惯、煤炉使用年限、家族肿瘤史是肺腺癌发生的环境危险因素,OR值分别为5.16,4.12,2.91,2.02,2.59;人群归因危险度分别为8.15%,11.91%,27.30%,29.98%,10.35%;综合人群归因危险度为0.630 6.结论肺鳞癌、腺癌的发病分别与多种环境因素有关,应积极控制环境危险因素,以减少肺癌的发生率.     

食管组织中代谢酶相关基因的异常表达与食管癌的发病关系研究

目的研究与环境致癌物活化、解毒有关的相和相代谢酶的mRNA水平与食管癌发病的关系。方法收集93例淮安地区食管癌新发病例的食管癌组织及远端癌旁组织,应用SYBRGreen实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CYP2E1、GSTP1、MTHFR和NQO1等基因的mRNA水平;应用t检验和logistic回归分析评价基因的表达水平与食管癌的关系。结果CYP2E1和MTHFR的mRNA水平在癌组织和配对癌旁组织之间有显著差异;条件logistic逐步回归分析结果显示CYP2E1、MTHFR表达水平异常与食管癌发病风险升高有关联[OR值(95%CI)分别为1.890(1.439~2.481)和1.362(1.107~1.677)]。结论CYP2E1和MTHFR的表达水平改变与食管癌发病风险密切相关,在食管癌的高危人群筛查和早期诊断中具有重要意义。     

遗传和环境危险因素与淮安食管癌发病风险的关系

背景与目的： 评价遗传与环境危险因素在江苏省淮安食管癌发病风险中的意义。 材料与方法: 采用配对病例_对照研究对97例淮安汉族食管癌新发病例及其匹配对照进行了食管癌遗传与环境危险因素的调查,条件Logistic逐步回归分析遗传与环境因素与食管癌发病风险的关系。 结果: 淮安食管癌的主要危险因素中消化道肿瘤家族史与食管癌发病关系最为密切,OR可达4.203 ;其次是住地周围环境污染、三餐不定时和饮水类型,OR分别为2.202、1.988和2.024;经常食用蛋类食品和饮茶习惯与食管癌发病风险降低有关,是食管癌的保护因素,其OR分别为0.633和0.669。各危险因素的调整人群归因危险度分别为：住地周围环境污染12.9％、三餐不定时34.4％、少食蛋类食品25.0％、不饮茶42.7％、饮用河水、沟塘水和井水21.4％、消化道肿瘤家族史30.6％,这6个因素的综合人群归因危险度为86.6％。 结论: 遗传易感特征在淮安地区食管癌的发生中占有重要地位,对当地食管癌的防治措施应充分考虑遗传因素的影响。