Multi-parameter prediction of HLA class Ⅰ restricted cytotoxic T lymphocyte epitopes for human proliferating cell nuclear antigen

Objective To predict the HLA class Ⅰ restricted cytotoxic T lymphocyte epitopes for human proliferating cell nuclear antigen (PCNA). Methods By using 3 epitope prediction databases which including MHC binder ( BIMAS and SYFPEITHI databases) and proteasome cutting site ( PAProC databases), the epitopes of PCNA were predicted by analyzing several parameters and methods. Results After comprehensive analysis,we have obtained two possible HLA-A0201 restricted CTL epitopes SMSAD-VPLV (228-236, score 447 633. 595 ) and LINEACWDI ( 22-28, score 127 966.779);two HLA-A24 re-stricted CTL epitopos DYEMKLMDL ( 113-121, score 563 994.9 ) and EFARICRDL ( 143-151, score 40 540.7);two HLA-A1101 restricted CTL epitopes LTSMSKILK (72-80, score 1334. 2680 ) and DVPLV-VEYK (232-240,score 736.9236). Conclusion The multi-parameter epitope prediction method is feasi-ble for cytotoxic T lymphocyte epitope prediction.     

荷载hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒对人肾癌细胞增殖的抑制作用

目的 研究荷载hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒(ZD-hTERT)对肾癌Ketr-3细胞增殖抑制作用.方法 ZD-hTERT、溶瘤腺病毒ZD-EGFP、表达hTERT-siRNA的增殖缺陷腺病毒AdhTERT感染人肾癌Ketr-3细胞.Western blot检测E1A表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测hTERT表达;原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活;结晶紫染色法检测细胞毒作用.结果 感染ZD-hTERT、ZD-EGFP的Ketr-3细胞表达E1A;抑制hTERT表达作用依次为ZD-hTERT＞Ad-hTERT＞ZD-EGFP.感染ZD-hTERT、ZD-EGFP、AdhTERT的Ketr-3细胞凋亡率(%)分别为(65.9±1.4)、(26.5±2.8)、(16.3±3.2).感染ZDhTERT、ZD-EGFP、Ad-hTERT的Ketr-3细胞存活率(%)分别为(30.9±3.6)、(51.6±3.8)、(87.9±3.1),每种病毒之间差异有统计学意义(P＜0.01);对Ketr-3细胞的细胞毒作用ZD-hTERT＞ZD-EGFP＞Ad-hTERT.结论 表达hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒具有显著的抑制肾癌Ketr-3细胞hTERT基因表达、诱导凋亡、杀伤肾癌细胞作用.     

表达端粒酶逆转录酶siRNA的溶瘤腺病毒对裸鼠肾癌移植瘤的治疗作用

Objective To investigate the antitumor effect of oncolytic adenovirus armed with small interference RNA targeting hTERT gene for renal cancer therapy. Methods Nude mice were divid-ed randomly into 4 groups (8 mice/group),and were treated by intratumoral injections of ZD55-hTERT ( an oncolytic adenovirus armed with small interference RNA targeting hTERT gene) ,ZD55-EGFP ( an on-colytic adenovirus) and Ad-hTERT (replication-defective adenovirus armed with small interference RNA targeting hTERT gene) with three consecutive daily at 7 × 108 pfu/day or treated with PBS as a control. The expression of E1A and hTERT, and apoptosis of tumor xenografts were assessed by immunohistochemi-cal technique at the 7th day after injections. The tumor volume was measured at the 50th day after injec-tions. Results The tumor volume in ZD55-hTERT treatment group ( 124.1±27.5) was significantly less than that in ZD-EGFP (499.8±77.1 ) and Ad-hTERT ( 609.0±102.5 ) treatment groups. The E 1A pos-itive expression in ZD55-hTERT treatment group was significantly higher than that in Ad-hTERT treatment group. The hTERT positive expression in ZD55-hTERT treatment group was significantly lower than that in Ad-hTERT treatment group. ZD55-hTERT treatment of tumor xenografts resulted in an increased apoptotie cell death as compared with ZD55-EGFP and Ad-hTERT treatment. Conclusion The antitumor effect of ZD55-hTERT was more potent than oneolytie adenovirus ZD55-EGFP and Ad-hTERT.     

1例初中生网络成瘾的原因及其相应对策

随着互联网的迅速发展,青少年网络成瘾日益受到社会各界的关注,探究青少年网络成瘾的原因,寻求对策并加以防治已成为当务之急。诸多研究表明,网络成瘾形成原因一般涉及到自身、家庭、学校和社会等多方因素,因而在解决方式上需要对症下药。本文用1例初中生网络成瘾个案,探析青少年网络成瘾的主要原因,并尝试提出相应的解决对策。     

RNA干扰对肾癌细胞端粒酶活性及增殖、凋亡的影响

目的 探讨针对人端粒酶RNA（hTR）及其催化亚基（hTERT）的小干扰RNA（siRNA）对肾癌细胞端粒酶活性及其增殖、凋亡的影响。方法 将hTR-siRNA、hTERT-siRNA（100nmol／L）单独或联合转染人肾癌786—0细胞,采用RT-PCR法检测hTR、hTERT mRNA表达,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,MTT法检测细胞增殖,免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡。结果 （1）hTR-siRNA可显著降低786—0细胞hTR mRNA表达（P〈0．01）,hTERT-siRNA可显著降低hTERT mRNA表达（P〈0．01）,但彼此互不影响。（2）二者均能显著抑制端粒酶活性（P〈0．01,P〈0．01）,并增加786—0细胞增殖抑制率及凋亡细胞阳性率（P〈0．01,P〈0．01）。二者联合应用与单独应用差异亦无显著性（P〉0．05）。结论 hTR、hTERT siRNA通过抑制各自基因表达,抑制人肾癌细胞端粒酶活性,进而抑制增殖、促进凋亡。     

阿曲库铵预注剂量的探讨

研究４组不同预注剂量的阿曲库铵对神经肌肉接头的阻滞效应。结果表明，随着阿曲库铵预注量逐渐增加，对肌颤搐抑制程度也逐渐增加，气管插管所需时间也逐渐缩短；当剂量增至０．０９ｍｇ／ｋｇ以上时，加大剂量并不相应地抑制肌颤搐，也不能缩短插管时间，而且对神经肌肉传导有一定影响，引起不良反应。因此推荐：预注０．０９ｍｇ／ｋｇ阿曲库铵３～５ｍｉｎ后再注入０．５１ｍｇ／ｋｇ的插管剂量为最佳选择。     

头孢曲松对蛛网膜下腔出血大鼠海马神经细胞的保护作用及其机制

目的：探讨头孢曲松对蛛网膜下腔出血（SAH）大鼠的治疗作用,并阐明其作用机制。方法： 48只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAH组、3-甲基腺嘌呤（3-MA）组和头孢曲松（CEF）组,每组12只。血管内穿刺法建立SAH模型,腹腔注射给药,3-MA给药剂量为15 mg·kg^-1,CEF给药剂量为500 mg·kg^-1。造模后24h处死大鼠,HE染色观察大鼠脑组织病理表现,TUNEL染色法检测神经细胞凋亡情况,免疫组织化学Western blotting法检测各组大鼠海马组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ阳性细胞数和蛋白表达水平及凋亡因子Caspase-3蛋白表达水平。结果：与SAH组比较,CEF组大鼠神经功能评分明显升高（P<0.01）;HE染色检测,SAH组大鼠海马区神经细胞肿胀,胞质疏松,核明显固缩、碎裂和溶解;与SAH组比较,CEF组大鼠神经变性有所逆转,出现较多正常神经组织形态;3-MA组神经细胞损伤更为严重,满视野死亡神经细胞,细胞层次紊乱。定量分析显示,与SAH组比较,CEF组坏死神经细胞数明显降低（P<0.05）,3-MA组坏死神经细胞数明显升高（P<0.05）。免疫组织化学法检测,与SAH组比较,CEF组大鼠海马组织中Beclin-1和LC3-Ⅱ阳性细胞数明显升高（P<0.05）,3-MA组大鼠海马组织中Beclin-1和LC3-Ⅱ阳性细胞数明显降低（P<0.05）。TUNEL染色法检测,与SAH组比较,CEF组凋亡细胞数明显减少（P<0.05）,3-MA组凋亡细胞数明显升高（P<0.05）。Western blotting法检测,与SAH组比较,CEF组大鼠海马组织中Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,3-MA组Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：头孢曲松对蛛网膜下腔出血大鼠神经损伤具有保护作用,其作用机制可能与上调神经细胞自噬和减少细胞凋亡有关。     

益气散结方联合常规疗法治疗结直肠腺瘤术后临床研究

目的：观察益气散结方联合常规疗法治疗结直肠腺瘤术后患者的效果。方法：选取109例行结直肠腺瘤内镜下切除术的脾虚湿热兼血瘀证患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组54例和观察组55例,2组均予术后止血、抗感染、营养支持等常规疗法治疗8周,观察组加服益气散结方治疗8周。于术后治疗前、治疗8周后评定临床症状评分,检测细胞因子[白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、C-反应蛋白（CRP）]、肿瘤标记物[癌胚抗原（CEA）、糖链抗原199 (Ca199)、糖链抗原50 (Ca50)];记录2组患者治疗期间的不良反应发生情况;治疗8周后评定临床疗效;于术后3个月、6个月复查、统计腺瘤复发情况,术后6个月检查腺瘤生长情况。结果：治疗8周后,观察组临床疗效优于对照组（P<0.05）。2组TNF-α、IL-6、CRP、CEA、Ca199、Ca50水平均较治疗前下降（P<0.05）,观察组6项指标值均低于对照组（P<0.05）。2组腹痛、大便形状、大便次数、黏液便评分均较治疗前减少（P<0.05）,观察组4项评分值均低于对照组（P<0.05）。...     

miR-150靶向调控IGF2BP2对肝癌恶性表型的影响机制

目的 本研究旨在阐明miR-150在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的作用和靶点。方法 采用热图分析方法,从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas)数据库下载的6组HCC组织与邻近肝组织之间差异表达的miRNA。采用实时定量聚合酶链反应检测miR-150在HCC组织和细胞系中的表达;采用侵袭小室试验评估HCC细胞的增殖、侵袭和迁移潜能。此外,利用TargetScan软件用于预测miR-150的潜在靶标,并通过蛋白印迹(Western blotting)和荧光素酶法测定miR-150与其靶基因的关系。结果 通过热图分析法,发现在HCC组织中有31个miRNA表达异常,其中miR-150表达差异最为显著,且与患者预后密切相关。细胞实验上,高表达miR-150可通过调节胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白2 (recombinant insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)的表达显著降低人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭...