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双亚基腈水合酶是催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺的重要工业酶。通过Discovery Studio 2.5软件对C-末端盐桥耦合定点突变改造的耐热型基因重组腈水合酶NHaseM-TH-SBM(S344K-S346K-L347E-N362S-435DT436(+))进行盐桥网络分析,发现其全局盐桥总数有所下降,但双亚基界面间盐桥数量提高到7个。在重组大肠杆菌中表达了原腈水合酶NHaseM-TH(TH)、盐桥突变酶NHaseM-TH-SB(SB)和盐桥耦合定点突变的重组酶NHaseM-TH-SBM(SBM),研究了3种酶的催化反应动力学和失活动力学。结果表明,SBM的腈水合酶活性为543.9 U·mg-1,比TH提高了31.0%;其米氏方程催化速率常数Kcat比TH提高了20%。SBM的表观失活常数KD在25~42℃范围内均明显低于对照TH,在42℃时为TH的68.0%,显示了良好的热稳定性。SBM是活性和稳定性同时提高的重组腈水合酶。 相似文献
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模糊数学在石油工业标准评估中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
一、引言石油行业、企业标准的建立在促进石油工业技术进步、规范工作秩序、促进产品质量提高等方面发挥了重要作用。但是,多年来一直存在着对标准如何进 相似文献
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为满足社会发展的实际需求,民用建筑逐渐从原有形式单一的低层建筑向结构复杂的高层建筑方向发展,在扩大了建筑容量的同时,也加大了消防难度。为使人民群众的生命财产安全得到充分保护,主要围绕民用建筑消防电气设计的重要性展开论述,从民用建筑中引发火灾的主要原因和火灾特点出发,总结民用建筑消防电气设计原则,分析当前民用建筑消防电气设计中存在的问题,最后提出优化消防电气设计的有效对策。 相似文献
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从中职学校服装专业传统教学模式出发,以民族地区文化与民族手工饰品设计与制作技艺的特色课程为例,将传统民族文化与现代信息化科技结合探索.与发展中的信息化教学模式进行对比,以共享资源和技艺模拟为例,探讨信息技术对民族特色课堂教学的辅助作用,解决信息技术在服装设计应用中的关键问题.将有助于深入了解在当前信息技术发展趋势的全过... 相似文献
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目的:设计以PD-1基因为靶点的短发夹状RNA(shRNA),构建重组慢病毒载体,鉴定此RNA干扰系列对PD-1基因表达的影响,从设计序列中筛选高(>90%)干扰效率的靶点序列(PD694/791)。方法:设计合成3种PD-1的shRNA干扰序列,与LV3载体连接,进行阳性鉴定,通过免疫印迹法(western)和阳性细胞数量检测筛选高干扰效率靶序列。结果:基于转染目的细胞的PD-1蛋白western检测结果,计算三种shRNA慢病毒载体的干扰效率分别为:PD791干扰效率为78%、PD 238干扰效率为8%、PD 694干扰效率88%。结论:成功构建靶向PD-1的shRNA慢病毒载体,其中干涉片段PD694和PD791对PD-1的干涉抑制效果显著,可以有效抑制原代T细胞PD-1表达,为研究开发PD-1抑制剂治疗肿瘤奠定基础。 相似文献
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采用传递比较法对二厘米微波衰减标准装置不确定度进行了验证。测量标准装置的重复性以组内实验标准偏差sn(A)定量表征,测量标准装置的稳定性用组间实验标准偏差sm定量表征。 相似文献