基因重排H1N2亚型猪流感病毒的分离鉴定和生物学特性的研究

本研究对2005年～2006年广西和海南省疑似猪流感(SD)病猪的组织病料进行了病毒分离,并对分离毒株进行了亚型鉴定和生物学特性的研究.结果显示:分离的3株流感病毒均为H1N2亚型猪流感病毒(SIV).能凝集多种动物的红细胞,但凝集谱与以往报道略有不同;为热不稳定型病毒;在电镜下可观察到典型流感病毒粒子.动物试验显示:小白鼠、大白鼠和家兔对分离毒株不敏感,而豚鼠较敏感.能较好地复制出流感症状和病理变化;本体试验动物仅有轻微的临床症状,但能检测到抗体升高的变化,并能从鼻腔和上呼吸道检测和分离到SIV.核苷酸同源性分析显示:分离毒株Sw/GX/17/05、Sw/GX/13/06和Sw/HN/1/05的血凝素(HA)基因分别与基因重排H1N2 亚型SIV A/Swine/lndiana 9K035/99、A/SW/MN/23124-T/01和A/swine/Zhejiang/1/04的核苷酸同源性最高,分别达97.4%、97.0%和95.7%;神经氨酸酶(NA)基因均与基因重排H1N2 亚型流感病毒A/Trurkey/MO/24093/99 的核苷酸同源性最高,达97.2%～98.0%.核苷酸同源性分析进一步证实了分离毒株为基因重排H1N2亚型SIV.     

枯草芽孢杆菌草酸脱羧酶转化拟南芥研究初报

多种真菌在致病过程中会分泌草酸,这些草酸产生菌寄主范围广,可以导致上百种植物病害,造成世界范围农作物的严重减产。草酸可以通过氧化与脱羧两种途径降解。该研究克隆了枯草芽孢杆菌的草酸脱羧酶基因Yvrk,并构建其植物表达载体,通过农杆菌浸花转化拟南芥,收获种子,用除草剂Basta筛选获得15株转基因植株,对其中的11个株系分别离体接种菌核病菌,24h后量病斑,发现有6株转基因植株的病斑显著小于野生型。PCR验证发现大部分转基因植株确有Yvrk的存在,实验结果说明草酸脱羧酶基因确能一定程度上缓解真菌病害。     

恒定链的多功能研究新进展

恒定链(invariant chain, Ii)是重要的免疫分子。研究发现Ii不仅是MHCII类分子的伴侣分子,而且具有多种功能。本文首先概述了Ii的基本结构、主要功能、胞内组装和转运、Ii作为载体的应用。其次,归纳和总结了近几年关于Ii的最新研究进展：Ii与MHC分子互相作用的功能结构域及其在细胞的定位特征、调节T和B等免疫细胞的功能与途径、Ii与巨噬细胞迁移因子相互作用从而启动炎症反应的信号通路和相应结构域;与Ii关联的多种酶类和生物活性因子及其作用特点、与Ii相关的疾病;基于Ii结构的疫苗载体及其增强免疫的机理;以及我国在畜禽、鱼类上的研究成果。最后,展望了Ii在理论研究和畜牧兽医领域实际应用的发展趋势。本文从宏观和微观方面进行阐述,了解、认识Ii在动物免疫中的多功能作用及其机理的科学知识和最新进展,为推动相关研究提供有益借鉴和参考。     

几种药剂封闭紫花苜蓿田杂草药效比较及安全性评定试验

通过几种药剂对紫花苜蓿进行播后芽前土壤封闭,比较封闭效果及其安全性。试验结果表明:在本实验施药后2个月内降雨量达117mm的情况下,氟乐灵100m L/667m~2对紫花苜蓿有很好的封闭效果,防效达98.7%以上,且其安全性好。     

山核桃成花过程基因表达的cDNA-AFLP分析

为缩短山核桃Carya cathayensis童期,促进成花,探讨木本植物成花机制,以山核桃为材料,采取成花决定前、成花决定期和成花决定后共3个时段的雌花芽,利用互补脱氧核酸扩增片段长度多态性（cDNA-AFLP）技术克隆成花相关的特异基因片段（TDFs）。试验共获得278个TDFs,经测序和序列同源性分析,其中65个TDFs为未知基因序列,213个TDFs具有同源序列,其功能涉及激素合成、酶合成、细胞信号转导、叶绿体合成和光诱导等。     

猪源脑心肌炎病毒GXLC株对小鼠的致病性试验

为研究猪源脑心肌炎病毒(EMCV)GXLC株对小鼠的致病性,将其接种4周龄健康BALB/c小鼠,观察临床症状,检查病理变化,测定心重/体重比值,检测心脏、脑、脾脏组织及血清中病毒含量,检测心脏、脑、脾脏组织中细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平及血清中IL-1β、TNF-α蛋白含量。结果显示,感染小鼠出现明显的临床症状,感染后第4天开始死亡,第5~7天死亡达到高峰;心脏、脑出现典型的大体病理变化和组织病理学变化,心重/体重比值显著升高、组织病理学炎症分值显著增加;感染后第1天即可在心脏、脑、脾脏及血清中检测到大量病毒,直至第14天仍能检测到病毒;血清中IL-1β、TNF-α蛋白含量显著升高,心脏、脑、脾脏组织中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著上调,而且细胞因子表达的高峰期与出现明显临床症状、严重病理损害及死亡高峰期密切相关。结果表明,猪源EMCV GXLC株对小鼠具有高度致病性,IL-1β、TNF-α、IL-6等促炎细胞因子在EMCV对小鼠的致病机制中发挥重要作用。     

淮豆4号密度肥料试验

淮豆4号是一个早熟、优质、高产的夏大豆品种,其全生育期103～106d,有限结荚习性,紫花,灰毛,分枝2～4个,株高55～75cm,主茎15节左右,株型直立,抗病抗倒。卵圆叶,淡褐色荚,单株结荚平均在35.6个,每荚实际粒数在2.01左右,子粒椭圆,淡褐色脐,     

淮豆4号密度肥料试验

淮豆4号是一个早熟、优质、高产的夏大豆品种,其全生育期103～106d,有限结荚习性,紫花,灰毛,分枝2～4个,株高55～75cm,主茎15节左右,株型直立,抗病抗倒.卵圆叶,淡褐色荚,单株结荚平均在35.6个,每荚实际粒数在2.01左右,子粒椭圆,淡褐色脐,种皮黄色,百粒重21～24g,是目前江苏省累计种植面积最大、覆盖面积最广的淮北夏大豆品种.为了充分发挥其生产上应用潜力,特进行本试验,以为农场种植该品种探索合理的高产栽培措施提供依据.     

江苏沿海地区直播稻田杂草综合防除技术

通过2011-2012年的试验研究,明确了水直播稻田杂草发生特点,制定了“二封一杀”的直播稻田除草配套技术,并进行了大面推广应用,除草增产效果显著.     

鸡Ii结合Rab5a和Rab7b分子的分析

本研究旨在探明鸡恒定链（invariant chain,Ii）与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii_{（Cyt-Tra）}]、Ii CLIP （class Ⅱ-associated invariant chain peptide）-三聚体区[Ii_{（CLIP-TRIM）}]和Ii突变体[Ii_{（M81-87aa）}、Ii_{（M91-99aa）}和Ii_{（M81-99aa）}]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii_{（Cyt-Tra）}及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii_{（CLIP-TRIM）}与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。