不同连作年限番茄根系淀积物的变化及其与根结线虫的关系

了解蔬菜连作与土传病虫害的关系有助于发展绿色农业。基于根系淀积物在植物-土壤之间功能反馈中的重要地位,选择野外定位试验中番茄第2、第6和第8茬的不同连作年限处理,研究根结线虫的变化及其与土壤性质特别是根系淀积物组成的关系。结果显示:与第2茬相比,连作茬数增加导致土壤pH显著降低(P<0.05),而土壤有机碳和硝态氮含量显著升高;同时,根系淀积物的组分类别及其相对含量也有显著变化,其主要组分中有机酸类物质的数量和相对含量随连作茬数的增加而增加。土壤化学性质、根系淀积物和根结指数三者的网络结构分析表明,根结指数与网络中其他节点之间的联系伴随连作年限而增强。在第8茬中,根结指数与月桂酸含量呈负相关,与土壤NO₃^--N含量以及颠茄碱、麦角甾醇的含量呈正相关,说明连作番茄根结线虫病害加重与土壤化学性质尤其是根系淀积物的变化有密切联系。     

腐败梭菌α毒素基因的克隆与序列分析

应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从腐败梭菌强毒株C55-1中,扩增出大小为1327bp的腐败梭菌α毒素全基因(csa1327基因),并将其克隆入pMD18-T载体中.转化至受体菌DH5α后,经Amp/IPTG/X-Gal选择培养,提取质粒,PCR和EcoRⅠ/PstⅠ双酶切鉴定,筛选阳性重组克隆.核苷酸序列分析证实,csa1327基因开放阅读框架由1320bp组成,编码440个氨基酸残基.与GenBank中登录的国外Fukushima 5株、Kagoshima 1株、Mie株和44株的α毒素全基因相比,核苷酸同源率分别为100%、99.47%、99.25%和97.67%,推导氨基酸的同源率分别达100%、100%、99.7%和97.06%.表明本实验所克隆的csa1327基因即为腐败梭菌α毒素基因.     

TB水电站截流方案与现场截流分析研究

在初设截流方案基础上,对澜沧江TB水电站进行了截流物理模型试验及数值模拟研究,确定了不同工况截流时所需的抛投料粒径和抛投强度,提出了截流推荐方案。由于实际截流施工时导流洞分流条件较差,采用数值模拟分析后可知,上游电站不同下泄流量下,截流难度都将大大增加。TB水电站与上级电站属于同一流域梯级公司,通过上级电站实施停机控泄,将下泄流量降低,最大程度上降低了截流难度,保证了截流的顺利实施。研究成果表明：模型试验与数值模拟相结合的分析方法可对截流工程的实施提供科学决策依据,配合流域梯级开发中上下游电站的“控泄助截”模式,可为类似工程的设计与实施提供成功实例参考。     

猫传染性腹膜炎继发大肠杆菌感染的诊断

2003年2月，我室接诊一只2岁雌性病死波斯猫。经流行病学调查、临床症状观察、病理剖检和实验室检验，诊断为猫传染性腹膜炎继发大肠杆菌感染，报告如下。1流行病学调查和临床症状 猫的主人半年前引进一只6月龄波斯猫，该猫于2个月前出现食欲差，眼睛流分泌物，角膜溃疡、穿孔，消瘦，黄疸，抽搐等症状，并于一周前死亡，剖检，肝脏萎缩，腹腔中有大量腹水。家中的其余3只猫在引进的猫发病后不久相继出现食欲差和消瘦等症状，     

鸡非典型新城疫的发病特点

１发生范围逐步扩大最初报道主要宿主是鸡和火鸡,但近年来在观赏鸟如鹦鹉、鹌鹑、鸽体内分离到病毒,而后又在鸭、鹅及鸬鹚等水禽体内分离到强毒,可见本病感染的范围有扩大趋势。２多发于有母源抗体的雏鸡群或免疫鸡群非典型新城疫多发生于具有母源抗体的雏鸡群或经鸡新城疫疫苗一次或数次免疫过的鸡群。雏鸡易发,尤以３０～４０日龄间,即Ⅳ系苗一免后,Ⅰ系苗免疫前这一期间最易发生,病死率可达３０%或更高。产蛋鸡感染,不见明显的临床症状,也极少死亡,却表现产蛋量逐日下降（下降幅度达１０%～５０%）,同时软壳蛋和畸形蛋增加。但据报道,也…     

MhRAR1和MhSGT1基因转化苹果提高轮纹病菌诱导的抗氧化酶活性

 RAR1和SGT1是植物R基因（抗病基因,resistance genes）介导的抗病防卫途径中的两个重要信号元件,在R蛋白下游和活性氧产生之间发挥作用。为了研究湖北海棠MhRAR1和MhSGT1基因在感病苹果品种植株内的表达特性及其抗病功能,利用农杆菌介导法将两种基因分别转入富士苹果。对Hyg阳性植株进行PCR和RT-PCR检测,6个转MhRAR1株系和3个转MhSGT1株系呈阳性;两种转基因苹果株系被苹果轮纹病病原菌侵染后,与对照相比都表现出抗氧化酶（SOD/POD/CAT）活性迅速升高、MDA含量变化较平缓的趋势,进一步说明RAR1和SGT1基因能够作用于苹果体内的活性氧反应和细胞膜活动进程,对植株受到外部侵害后的抗性反应有促进作用。     

猫传染性腹膜炎病毒N蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达与鉴定

本研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达猫传染性腹膜炎病毒(Feline infectious peritonitis virus,FIPV)N蛋白,并制备抗该蛋白的多克隆抗体,用于FIPV临床抗原/抗体诊断及N蛋白功能研究。参考GenBank中FIPV的N基因序列,选择FIPV毒株N基因(登录号:KC461235.1),并对该N基因进行密码子优化、基因合成,酶切后将N基因连接至pFastBac1载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,经氨苄西林抗性筛选阳性克隆,提取质粒经酶切及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选及PCR鉴定后,最终成功构建重组杆状病毒质粒Bacmid-N,转染Sf9细胞包装杆状病毒,于28℃温箱培养4 d后收集感染Sf9细胞上清,并通过镍离子亲和层析纯化获得重组N蛋白。经SDS-PAGE及Western blotting鉴定结果表明,本研究成功利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达出大小约为51 ku的FIPV重组N蛋白。将该蛋白与弗氏佐剂按一定比例混合后,免疫6周龄BALB/c小鼠。用间接ELISA方法检测小鼠血清抗体效价可达1∶102400;利用Western blotting和间接免疫荧光试验对N蛋白多克隆抗体进行检测分析,结果表明,真核表达的重组蛋白免疫原性良好,多克隆抗体具有良好的反应原性,可特异识别FIPV感染细胞。本研究为FIPV抗原/抗体诊断试剂盒的研发奠定了基础。     

缺失rfaH基因的鸡白痢沙门氏菌株的构建及鉴定

为研制可以鉴别检测基因缺失型鸡白痢疫苗与自然感染菌,本研究通过基因同源重组技术,利用高效自杀性载体系统,敲除鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)CVCC 79201株的rfaH基因,同时未引入任何抗生素抗性基因等外源DNA序列,经筛选获得重组S.pullorum(rSp)株。检测结果显示缺失菌由光滑型转变为粗糙型。rSp在普通琼脂培养基上传15代后,仍然保持粗糙型表型。动物试验结果表明,rSp免疫伊莎褐蛋鸡后,其抗血清可通过平板凝集试验与CVCC 79201免疫的血清相区分。本研究为S.pullorum缺失疫苗的研制提供了技术平台。     

山羊传染性胸膜肺炎研究进展

山羊传染性胸膜肺炎是由山羊支原体山羊肺炎亚种引起的一种山羊常见的高度接触性呼吸道传染病,有传染快速,发病率、死亡率高的特点,给山羊养殖业带来巨大损失。本文从病原学、流行病学、临床症状以及诊断与防控方面对山羊传染性胸膜肺炎进行综述,帮助读者更加全面、深入的了解本病,以期为山羊传染性胸膜肺炎的诊断和防治提供新思路。