黑头软口鲦上皮瘤细胞ifn-1基因的表达及抗病毒活性

为了体外表达黑头软口鲦上皮瘤细胞(EPC)I型干扰素(IFN-1),本实验通过RTPCR从EPC中扩增ifn-1基因,构建重组表达质粒pET-32a-IFN-1,并转化到感受态细胞Transetta(DE3),体外纯化后检测其抗病毒活性。结果显示,ifn-1编码区大小为552 bp,编码184个氨基酸,与草鱼干扰素1(CiIFN1)亲缘关系最近。通过SDS-PAGE分析,重组表达质粒pET-32a-IFN-1在宿主菌中可明显表达约35 ku的融合蛋白条带,且部分呈可溶性表达,进而通过亲和纯化可溶性重组IFN-1(rIFN-1),免疫新西兰大白兔获得效价较高的抗IFN-1多克隆抗体,可用于检测细胞内源性的IFN-1。定量PCR显示rIFN-1与EPC细胞孵育可以诱导抗病毒蛋白Mx1的表达,并抑制鲤春病毒血症病毒(SVCV)引起的细胞病变(CPE)及SVCV的复制,表明rIFN-1具有抗病毒活性。     

肉羊引调适应性饲养中发生魏氏梭菌病防治的研究

肉羊引调、流行病学调查、羊肠毒血症、羊猝疽、羔羊痢疾、羊快疫、病理变化、化验室诊断、"四联苗"紧急预防注射、适应性饲养、魏氏梭菌定型血清A、B、C、D、E型试验(技术难点)、针对性治疗和保护、肉食品安全(创新点)。     

斑点叉尾鮰病毒“自杀性”ＤＮＡ疫苗的构建及其体外表达检测

根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到"自杀性"DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1(+)中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰(Ictalurus punc-tatus)"自杀性"DNA疫苗ps-ORF6与常规DNA疫苗pcd-ORF6,利用转化后的大肠杆菌菌液为模板进行PCR扩增、提取质粒酶切鉴定以及序列测定等方法证实重组质粒构建正确。将重组质粒转染人胚肾细胞(293T),间接免疫荧光试验表明ORF6均获得表达,但"自杀性"DNA疫苗的表达效果不如常规DNA疫苗,该研究为这2种疫苗进一步的鱼体试验奠定了基础。     

宁夏首起非洲猪瘟疫情的紧急流行病学调查

2019年1月19日,宁夏银川市永宁县望远镇板桥村确诊发生非洲猪瘟疫情。为查明疫情发生原因,分析可能的风险因素,及时提出有效防控建议,采用紧急流行病学调查和实验室检测相结合的方式,对该起疫情进行了调查。通过对该起疫情的时间、空间、群间描述,结合病例搜索、现场调查、追踪溯源,建立假设并进行验证,闭合疫情发生发展链条。调查分析认为,此次疫情很可能是2018年12月下旬生猪养殖场户经饲喂餐厨剩余物或车辆人员带毒传入引起,疫情扩散风险较低。调查结果提示,应进一步加大疫情排查监测力度,切实强化、完善对全区生猪及其产品的调运监管以及对餐厨剩余物的使用监管,认真落实生产经营者的防疫主体责任,扎实做好非洲猪瘟防控。本调查确证了禁止饲喂餐厨剩余物和加强车辆人员的流通控制与消毒对于非洲猪瘟防控的意义。     

柴达木盆地枸杞无公害综合配套栽培技术

分析柴达木盆地种植枸杞的气候资源、产地环境优势条件,进行柴达木枸杞与宁夏枸杞品质优势比较,总结柴达木盆地枸杞综合配套栽培技术,包括建园与定植、幼龄期（1～4年）管理、幼龄期培育半圆树形、成龄期（5年以上）枸杞管理技术。     

斑点叉尾(鲴)疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立

针对斑点叉尾鲴疱疹病毒(CAV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5'端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法.对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性.结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍.用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA.该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾(鲴)疱疹病毒的检测、斑点叉尾(鲒)暴发性流行病的诊断.     

一例猪腹腔特大脓肿的报告

阉割生猪时消毒不严或操作不当，使术部受化脓性葡萄球菌感染，致使生猪腹腔内形成巨型脓肿包囊。     

血红素加氧酶-1与病毒感染相互作用的研究进展

血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)是血红素代谢的限速酶,也称为热休克蛋白32 (Heat shock protein 32,HSP32),能被多种刺激因素诱导表达,具有细胞保护作用.研究发现病毒感染可调控HO-1的表达,HO-1的上调表达也可对抗病毒的感染,进而发挥其对细胞的保护作用.尽管HO-1与病毒相互作用的分子机制尚不清楚,但是HO-1与病毒感染的相关性研究已取得了一些成果,可为病毒性疾病的治疗提供新的方法.从病毒感染对HO-1表达的影响和HO-1的表达对病毒感染的影响两方面阐述了HO-1与病毒相互作用的研究进展.     

葡萄VvWRKY70基因生物信息学及表达特性分析

WRKY是植物特有的转录因子,在多种生物和非生物胁迫中发挥作用。基于RNA-seq技术,课题组前期研究发现,SO2熏蒸结合低温保鲜过程中多个功能未知的葡萄WRKY基因差异表达。经氨基酸序列同源性比对,研究选择与AtWRKY70氨基酸序列相似度最高的VvWRKY70进行生物信息学及表达特性分析。生物信息学分析结果表明,VvWRKY70基因启动子区含有W-box元件及茉莉酸甲酯、水杨酸等激素响应元件;编码蛋白由322个氨基酸组成,分子质量约36.57 ku,属亲水性蛋白;该蛋白丝/苏氨酸含量丰富;二级结构主要由无规卷曲和α-螺旋组成,N端含有高度保守的WRKY结构域,C端为C₂HC型锌指结构,属WRKY第Ⅲ亚家族;预测显示,其主要定位于细胞核中,且在进化上较为保守。qRT-PCR分析表明,VvWRKY70在玫瑰香葡萄根、茎、叶、花蕾、果中均有表达;葡萄果实VvWRKY70受SO₂和灰霉菌诱导上调表达,低温处理组下调表达。综上可见,VvWRKY70可能作为转录因子参与调节植株生理和果实发育过程,并在葡萄果实采后SO₂保鲜过程中...     

丽薯6号在生产中的前景

介绍了丽薯6号马铃薯在凤庆的种植状况,对产量、效益、发展环境进行综合分析,推断出凤庆县丽薯6号马铃薯的生产前景,并提出了发展建议：做好马铃薯种植区域规划;建设马铃薯产业体系;依靠科技支撑,推广应用关键技术等.