禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的一种禽急性、接触性、烈性传染病。病毒广泛存在于野生禽、鸟类和人工饲养的禽类中,国际兽医局(OIE)将其列为动物的A类传染病。1878年,该病首次在意大利暴发流行,当时称之为“鸡瘟”。禽流感引起的损失主要有：高致病力毒株致鸡大量死亡,非高致病力毒株引起产蛋量下降,免疫功能障碍而继发细菌或病毒的感染。1994年,我国广东首次报道了H9N2亚型禽流感的分离,自此之后中国大陆的禽流感日益受到世人的关注。     

晋西黄土区不同土地利用方式对土壤抗冲性及糙率的影响

采用野外实地放水冲刷法,以次生林地、刺槐林地、荒草地、农地为研究对象,研究晋西黄土区蔡家川流域不同土地利用方式对土壤抗冲性及糙率的影响及其与可能的影响因子之间的关系。结果表明:(1)各样地土壤有机质含量大小为次生林地>农地>刺槐林地>荒草地。有机质含量与土壤抗冲性呈极显著负相关(p<0.01)。(2)试验地的糙率系数介于0.005 6～0.251之间,糙率系数n值大小顺序为次生林地>刺槐林地>农地>荒草地;(3)土壤抗冲性受土地利用方式、植物根系以及坡度等因素的影响较大。土壤抗冲性随根系生物量的增加而增强,且与<1mm的根系密度极显著相关(p<0.01);不同土地利用方式下土壤抗冲性大小表现为:次生林地土壤抗冲性能最强,刺槐林地和荒草地次之,农地最差。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒SF弱毒株的鉴定

针对IBV地方分离株SF株弱化毒进行鉴定,经特异性试验证实,SF株致弱毒能完全被本毒制备的血清所中和;血清交叉中和试验证明,SF株毒与Ark99株有高度的交叉保护;采用E1、E5代弱化毒接种SPF10日龄鸡胚,测定毒价EID50分别为10-6.88/0.1ml,10-6.68/0.1ml;同居感染试验未观察到健康鸡组织器官病变;连传SPF易感雏鸡5代无毒力返强;攻毒保护试验证实3000个EID50以上的免疫量使免疫雏鸡能耐受强毒攻击,达到完全保护;理化试验表明,该毒株对热、碱的耐受性较差,对乙醚、氯仿有机溶剂较为敏感,对酸有一定的耐受性;试验数据说明,SF株IBV已被成功弱化,抗原性好,毒力稳定、对雏鸡安全,不会产生毒力返强,并能产生较强的免疫力,是一株理想的弱毒苗株.     

硅钙镁复合肥对烤、晒烟综合效应的研究

氮、磷、钾肥在适量的条件下，烤、晒烟分别施硅钙镁复合肥４００ｋｇ／ｈａ的效果最佳。烤、晒烟产量、产值分别提高１７．５％和１６．９％，净收入分别为９８０元／ｈａ、７１２．５０元／ｈａ。烤晒烟施硅钙镁复合肥能增加叶面积，提高抗病力，协调烟叶化学成分，提高烟叶品质。     

荧光定量RT-PCR检测鸡α干扰素mRNA方法的建立

根据鸡IFN-α基因序列设计引物,建立了定量检测鸡IFN-α基因表达水平的荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并对新城疫病毒(NDV)感染的鸡法氏囊、胸腺中IFN-α mRNA表达水平进行了检测.结果表明,该方法对鸡IFN-α,mRNA的扩增效率为103.99%,线性范围为102～10-9,相关系数为0.996,最低能检出73拷贝/反应;熔解曲线分析RRT-PCR产物在(88.6±0.2)℃出现单特异峰;特异性评价结果显示,本方法只扩增鸡IFN-αmRNA,不与常见禽源病原微生物发生交叉反应.对NDV感染鸡的法氏囊、胸腺中IFN-α mRNA表达水平的定量检测结果表明,IFN-α mRNA在感染后36,48 h显著升高.本研究建立的检测鸡IFN-α mRNA表达水平的RRT-PCR方法具有敏感性高、稳定性好和特异性强的特点,为鸡IFN-α mRNA的精确定量提供了新方法.     

H5N1亚型禽流感病毒和新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞IFN-β基因的动态表达

根据鸡β-干扰素(ChIFN-β)基因保守序列设计引物建立了检测鸡IFN-βmRNA表达水平的荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒强毒株(vNDV)感染后3、6、12、24、30 h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中IFN-βmRNA表达水平进行了检测。结果显示,建立的RRT-PCR特异性好,对鸡IFN-βmRNA的扩增效率为94.18%,线性范围为10-8~10-3,相关系数为0.992,最低能检出48拷贝/反应。AIV在感染CEF后6、12 h显著抑制IFN-βmRNA的表达,24 h开始诱导IFN-βmRNA表达,30 h时IFN-βmRNA水平显著升高;vNDV在感染CEF后的24 h内显著抑制IFN-βmRNA的表达,30 h时则显著诱导IFN-βmRNA表达。本试验结果为进一步研究H5N1和NDV与机体的相互作用提供了有价值的信息。     

枣酒加工制作工艺

枣是一种可作药用和营养价值极高的果品．品种繁多．如果按果形分类，可分为小枣、长枣、圆枣、扁圆枣和葫芦枣五种。其中，量多质优、应用价值较高的有20多个品种．具有独特的营养和药用价值。如沧州金丝小枣．含糖量76％～88％．含酸0．2％～1．6％．每100克含维生素C397毫克，比苹果、梨、葡萄、桃、柑橘、柠檬等水果的维生素C含量都高．     

H9亚型禽流感病毒HA基因的重组禽痘病毒构建

本试验构建了H9亚型禽流感病毒HA基因禽痘病毒转移载体,经转染、蓝斑克隆、筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的HA基因重组禽痘病毒。提取感染重组病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA进行PCR扩增,获得1.7kb的携带有外源目的基因片段。收集纯化的重组病毒CEF细胞,用H9亚型禽流感病毒多克隆血清作一抗,碱性磷酸酶标记的鸡IgG为二抗进行Western blot检测,结果表明重组痘病毒能在体外的CEF细胞表达HA糖蛋白。     

猪链球菌2型MRP与FBPS部分片段串联基因的原核表达

根据猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)的基因序列,选取可能含有抗原决定簇的两片段,各设计合成一对引物,使之含有共同的酶切位点。通过T4DNA连接酶串联两片段,构建原核表达载体pET32a-mrp-fbps,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),经不同时间、不同温度,不同浓度IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳,表达约为80kD的融合蛋白。Westernblot结果表明重组蛋白可被SS2阳性血清所识别。证实串联表达的融合蛋白具有良好的免疫原性,是重要的保护性抗原,本试验为进一步研究猪链球菌亚单位疫苗奠定了基础。     

禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

本品系用A型禽流感病毒A／Ostrich／Denmark／72420／96(LPAI-H5N2)株及A／Chicken／Shanghai／1／98(H9N2)株分别接种易感鸡胚、收获感染胚液、超滤浓缩后经甲醛溶液灭活，加油佐剂混合乳化制成的油乳剂灭活疫苗。疫苗用4周龄SPF鸡作安全试验，每只鸡肌肉注射2ml，结果表明试验鸡均无全身症状和局部病变，证明疫苗安全性良好。取疫苗一羽份免疫4周龄SPF鸡作效力检验，免疫鸡全部获得保护，对照鸡全部感染或死亡。经不同免疫剂量测定，证明一羽份疫苗中至少含有8个免疫剂量。免疫干扰试验证明两种抗原具有免疫协同作用。