茶树N-甲基转移酶基因启动子克隆及功能分析

咖啡碱是茶叶中重要的功能物质,N-甲基转移酶（NMT）是其生物合成的关键酶。本研究以英红9号茶树新梢为材料,利用hiTAIL-PCR克隆NMT1基因启动子,并采用Plant CARE等在线软件分析其顺式作用元件。根据其元件组成,设计5'递减的启动子与GUS基因一起组建了融合载体转入烟草,利用GUS染色和定量PCR方法,分析了克隆的启动子功能及其对环境因子的响应。结果表明,克隆的NMT1基因启动子长767βbp,含有TATA-box、CAAT-box等真核生物启动子基本元件及多个与植物非生物胁迫相关的响应元件。以5'递减的NMT1启动子替换pBI121中的CaMV35S启动子,构建出与GUS融合的pA、pB、pC、pD载体。在烟草叶片中进行瞬时表达,不同长度的NMT1启动子均具驱动GUS表达功能,且长度越长驱动能力越强。以含全长NMT1启动子载体pA对烟草转基因,转基因烟草各组织均检测到GUS基因的表达且表达量叶>茎>根,叶片中的表达量为根部的3倍。对转基因烟草进行不同程度光照、温度、模拟干旱和脱落酸处理后,除40℃温度条件外,其他处理的叶片中GUS基因表达在处理前后均存在显著变化,表明NMT1启动子功能受外界环境因子的胁迫影响。     

农户创业正规金融约束影响因素实证分析

本文基于2011年江西省35个县(区)的1080份创业农民调查数据,从个体特征、家庭特征和社会资本等方面选取15个变量,采用多元logistic回归模型对农户创业正规金融约束的影响因素进行实证分析。结果表明:个体特征中的年龄、文化程度、风险意识对农户创业正规金融约束有显著影响,年龄越大、文化程度越高、风险意识越强的农户更容易获得创业资金;在家庭特征方面,家庭的人口数、人均年纯收入对农户创业正规金融约束有显著的正向影响,但耕地面积与其呈负向影响;在社会资本方面,具有丰富社会资本的农民工相对更容易获取创业资金。     

犬猫咳嗽的诊断

咳嗽非常常见,犬猫的咽、喉、支气管等存在着特殊的咳嗽感受器,很多原因能够刺激咳嗽反射的产生。因此,犬猫咳嗽是临床上较常出现的症状之一,是多种疾病引起一种症状,是一种保护性反射动作,     

不同钾肥品种对马铃薯农艺性状、产量和品质的影响

试验比较了氯化钾、硫酸钾、硝酸钾、六国专用肥和庄稼汉复合肥5种钾肥品种对榆林北部风沙草滩区马铃薯农艺性状、产量和品质的影响,以期为该地区通过合理施用钾肥及钾肥品种达到马铃薯的高产优质目标提供依据。结果表明:不同钾肥品种对马铃薯株高和单株块茎重的影响差异不显著,对单株块茎数和商品薯率达到了差异显著的影响。施钾较不施钾均增加了马铃薯株高、单株块茎重和单株块茎数,但降低了商品薯率。不同钾肥品种对马铃薯产量的影响差异不显著,各处理间产量变幅为54 720～62 595 kg·hm~(-2)。除了庄稼汉复合肥之外,氯化钾、硫酸钾、硝酸钾和六国专用肥较对照分别增产0.34%、5.33%、14.26%和14.39%。不同钾肥品种对马铃薯干物质、蛋白质、VC、淀粉和还原糖含量的影响均差异不显著。除了氯化钾之外,硫酸钾、硝酸钾、六国专用肥和庄稼汉复合肥较对照马铃薯干物质分别增加了6.89%、2.75%、10.61%和16.56%。除硫酸钾外,其他四种钾肥均较对照不能提高马铃薯蛋白质含量。五种钾肥较对照均不能提高马铃薯VC含量。除硝化钾之外,氯酸钾、硫酸钾、六国专用肥和庄稼汉复合肥较对照马铃薯淀粉含量分别增加了0.27%、0.20%、8.41%和17.69%。氯酸钾、硫酸钾、硝酸钾、六国专用肥和庄稼汉复合肥五种钾肥较对照还原糖含量分别降低了9.23%、24.62%、10.55%、5.24%和18.39%。     

台风温比亚过程分析及影响

本文以2018年第18号台风"温比亚"为例,在简要概述台风温比亚过程的同时,探讨了台风温比亚出现过程中的大气环流背景,最后分析了台风温比亚对安徽的影响及气象服务,仅供相关部门进行参考借鉴。     

家蚕核型多角体病毒orf61基因缺失对病毒复制和各时期基因转录的影响

orf61是杆状病毒晚期表达的核心基因之一。为了研究家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)orf61基因的功能,利用Red重组技术与Bac-to-Bac系统分别敲除和异位补回orf61基因,构建了orf61缺失型病毒orf61-ko-Bacmid以及补回型病毒orf61-reBacmid,然后分别转染家蚕培养细胞Bm N,调查orf61基因缺失对Bm NPV复制和不同时期基因转录的影响。检测orf61基因缺失型病毒转染Bm N细胞液上清中的病毒滴度为0,说明orf61基因缺失导致病毒不能形成有感染活性的芽生型病毒粒子(BV);荧光定量PCR分析orf61基因缺失会显著地降低病毒基因组的复制水平,进而导致病毒各个时期基因转录水平极显著下降(P0.01)。此外,通过体外EMSA试验和构建双荧光素酶报告基因系统,检测ORF61蛋白对多角体蛋白基因polh启动子的调控作用,结果显示该蛋白质是polh基因转录的负调节因子。研究结果有助于深入阐释Bm NPV orf61基因在病毒基因组复制中的作用以及对极晚期表达的多角体蛋白基因polh的转录调控作用。     

菠萝黑心病发生过程中AcAPXs的表达分析及克隆

菠萝黑心病(internal browning, IB)严重制约菠萝产业发展,该病害的发生主要是过量活性氧(reactive oxygen species, ROS)引起膜损伤,打破质体多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)与液泡内酚类底物原有的区室化划分,使其接触氧化后聚合成醌类物质。抗氧化清除系统能够清除过量ROS,维持机体内ROS的动态平衡。本课题组前期用抗氧化剂抗坏血酸(ascorbic acid, AsA)处理采后‘巴厘’菠萝,能有效延缓黑心病的恶化,然而其作用机理尚不明确。抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase, APX, EC1.1.11.1)是I类血红素过氧化物酶,以抗坏血酸作为特定的电子供体,催化过氧化氢转化为水,参与植物的多种发育生理过程和胁迫反应。本研究筛选出6个AcAPX基因,对其黑心病发生过程以及AsA处理后的转录水平进行分析,发现AcAPX1基因在贮藏后期极显著响应AsA处理,9 d和12 d时显著上调表达;相关性分析发现,AsA处理后的菠萝黑心病指数与AcAPX1基因表达水平呈显著正相关。结果表明：AcAPX1显...     

水稻孕穗期耐冷性QTLs分析

本研究以籼粳交“密阳23/吉冷1号”的F2∶3 代200个家系为作图群体,在韩国春川进行冷水胁迫下水稻耐冷性鉴定,并以利用SSR标记构建的分子连锁图谱为基础,对水稻孕穗期耐冷性及其相对耐冷性进行数量性状位点（QTLs）分析。研究结果,在第1、2、4、11和12染色体上检测到与孕穗期耐冷性相关的QTL各1个,对表型变异的解释率为5     

水稻芽期耐冷性QTL的分子定位

 以籼粳交密阳23号/吉冷1号的F2：3 代200个家系作为作图群体，构建了一张含有97个微卫星 （SSR）标记的分子连锁图谱。在5℃低温条件下，对F3家系进行芽期耐冷性鉴定，并利用SSR标记进行了芽期耐冷性数量性状位点（QTL）分析。研究结果表明，芽期耐冷性在F3家系群中呈单峰连续分布，表现为由多基因控制的数量性状；共检测到与芽期耐冷性有关的QTL 3个，分别位于第2、4 和7染色体上，对表型变异的贡献率范围为11.5%～20.5%。其中，位于第4染色体RM273～RM303的qCTBP4对表型变异的贡献率最大。     

无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞金属蛋白酶及uPA系统表达的影响

为研究无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,S.agalactiae)作用奶牛乳腺成纤维细胞(BMFBs)后对MMPs/TIMPs与uPA系统(uPA/PAI-1)表达的影响,以进一步阐明MMPs/TIMPs与uPA系统在调控细胞外基质(ECM)代谢的作用,将107 cfu/mL热灭活S.aga...