猪繁殖与呼吸综合征的监测与分析

<正>猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),目前已成为世界性分布的传染病,被认为是20世纪末影响最大的一种新的高度传染性猪病综合征。近几年以来,各地不断发病,特别是2004年底以来,检出率明显增加。母猪主要以发热、厌食和流产、木乃伊胎、死产、弱仔等     

同时检测CSFV、PRRSV的二重RT-PCR方法的建立及其在临床样品检测中的初步应用

建立了1种一步法RT-PCR用于同时检测典型猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖呼吸道综合征病毒(PRRSV)的多重PCR诊断方法(Multiplex PCR,mPCR)。根据Genbank上公布的CSFV、PRRSV基因组全序列及部分序列,借助DNAStar和Oligo6.0基因序列和引物设计软件,设计2对特异性引物分别用于扩增CFSV、PRRSV病毒777bp和434bp的目的片断。该mPCR由RT反应和PCR反应构成。将病毒核酸连接到PMD18-T载体,提取质粒后,以10倍进行倍比稀释,取每个稀释度的病毒核酸进行mPCR反应,对CSFV、PRRSV的最低检测量分别为8.5pg、8.3×10-2pg。以PCV2、PCV1、PPV、PRV、SIV、E.coil和双蒸水为模板进行mPCR反应,扩增结果均为阴性,表明该mPCR具有较好的特异性。对临床样品的检测表明,本研究建立的mPCR诊断方法能够对CSFV和PRRSV进行快速的诊断,同时对CSFV、PRRSV在猪群中的流行病学调查也具有十分重要的意义。     

新疆乌鲁木齐垦区猪瘟免疫程序的确定

多年来,新疆乌鲁木齐垦区猪瘟免疫程序较为混乱,各场免疫效果亦不同。为探讨一种适合本地区的猪瘟免疫程序,有效预防猪瘟,进行本试验。本试验对仔猪猪瘟母源抗体进行跟踪监测,对不同日龄仔猪免疫猪瘟疫苗,然后采集血样,检测猪瘟抗体效价。根据效价不断校正,最终确定为科学合理的猪瘟免疫程序,其免疫程序是:猪瘟的超前免疫,剂量1头份;根据抗体效价下降情况,35日龄进行二免,剂量4头份。仔猪常规免疫:一免30日龄,剂量2头份;二免50日龄,剂量4头份。生产母猪免疫:配种前(后)15d进行免疫,剂量4头份。     

鸡新城疫疫苗点眼诱发鸡绿脓杆菌眼炎的诊治

鸡新城疫疫苗点眼诱发鸡绿脓杆菌眼炎的诊治冉多良，魏新，朱瑞琪（新疆八一农学院动医系，乌鲁木齐，８３００５２）（乌鲁木齐市科技交流中心）１流行情况博尔塔拉蒙古自治州某兽医站鸡场，新购进２０００余只罗曼肉鸡，于１０日龄用鸡新城疫巨系疫苗点眼，２天后有１０...     

赤羽病病毒核衣壳蛋白基因的表达纯化及活性鉴定

为获得赤羽病病毒（Akabane virus, AKAV）核衣壳蛋白重组抗原,经RT-PCR扩增了OBE-1株的S节段,将其插入到pMD 18-T载体,然后用带有酶切位点的引物从该重组载体亚克隆出表达核衣壳蛋白的N基因,用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后与同样处理的表达载体pET-28a（＋）进行连接,转化感受态细胞BL21（DE3）.将筛选出的阳性克隆进行测序、IPTG诱导表达和融合蛋白纯化及活性鉴定.结果表明,N基因含有1个全长702 bp的ORF,编码233个氨基酸,通过SDS-PAGE和Western-blotting分析,证实重组菌株可高效表达有免疫活性的分子质量约27 ku的可溶性融合蛋白,用薄层扫描仪分析,其最高表达量占可溶性菌体蛋白总量的58.5%.工程菌经超声波裂解高速离心后,上清液在ProBondTM Purification System（含Ni2＋）天然状态下纯化,可获得高纯度的融合蛋白.     

禽流感病毒NA基因在巴斯德毕赤酵母系统中的表达

采用PCR扩增禽流感病毒(AIV)NA基因，克隆入pMD18-T载体中，再亚克隆入含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9k中，构建了重组转移载体pPIC9kNA。经电穿孔转化酵母宿主菌GSll5和筛选高拷贝重组转化子及筛选His^ Mut^ 表型转化子后，摇瓶培养，10mL／L甲醇诱导表达后，经SDS-PAGE、Western-blotting、双向琼脂扩散试验、神经氨酸酶试验分析证明，获得了几株高效表达重组表达株，并且该重组NA蛋白具有免疫学活性。     

猪伪狂犬病研究进展

伪狂犬病也称奥叶基氏病、奇痒症,是由甲型疱疹病毒引起的一种传染病。该病毒可感染人类和无尾猿以外的所有哺乳动物。文章主要对该病的病原学、流行病学、临床症状、免疫学特点、诊断、防治作了阐述,为研究该病提供理论参考。     

鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ基因原核表达和单克隆抗体的制备及鉴定

本试验旨在制备针对鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ（RIG-Ⅰ）全长蛋白的单克隆抗体。从鸭脾脏cDNA中扩增鸭RIG-Ⅰ基因N端长度均为900 bp的a（1-900 bp）和b（751-1650 bp）2段基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-30a中;重组质粒转化BL21感受态细胞后,经IPTG诱导表达,将获得的目的蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,并进行间接ELISA检测。结果显示,筛选出17株与分段表达的鸭RIG-Ⅰ蛋白有良好反应性的杂交瘤细胞株,测定单克隆抗体上清效价均为1：512;间接免疫荧光（IFA）与Western blotting分析结果显示,10H7C3和2A10A2 2株单克隆抗体与原核表达的鸭RIG-Ⅰ全长蛋白有良好的反应性。本研究制备了特异性鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体,为进一步研究RIG-Ⅰ基因的功能奠定了基础。     

吡喹酮注射剂早期治疗小鼠血吸虫病效果的初步研究

为探索吡喹酮新制剂早期治疗血吸虫病效果,对人工感染日本血吸虫20d的小鼠皮下给药进行减虫率、肝脏减卵率统计,并在不同时间点对口服组和皮下注射吡喹酮新制剂组的未感染小鼠在给药后采集血浆,高效液相色谱法建立药时曲线。结果显示新制剂600mg/kg剂量治疗的3次试验的减虫率分别为72.88%、82.69%和56.7%,肝脏减卵率分别为81.7%、94.8%和70.7%,对感染20d期别的血吸虫有较好效果。而高效液相色谱法检测血药浓度显示,新制剂经皮下给药方式可使有效杀虫浓度(约0.3μg/mL)持续10d以上,具有缓释作用。吡喹酮新注射制剂能杀灭20d童虫,减少血吸虫病的危害,对血吸虫病的防治有较大的意义。     

猪蓝耳病与猪瘟、O型口蹄疫免疫抗体监测结果分析

通过对不同饲养期、同一份血清中高致病性猪蓝耳病（PRRS）、猪瘟（CSF）、猪O型口蹄疫（FMD）三种疫病的免疫抗体监测分析,仔绪、育肥猪、种猪免疫抗体的保护率及阳性率分别为：PRRS阳性率分别为34．4％、49％、63．6％,CSF保护率分别为73.6％、91．9％、81.8％,FMD保护率分别为29％、51.5％、81．8％。