中耳胆脂瘤中XIAP与Caspase-3的相关性研究

目的研究凋亡抑制蛋白XIAP、Caspase-3在胆脂瘤中的表达及胆脂瘤中的凋亡情况,探讨三者之间的关系,揭示XIAP、Caspase-3、凋亡在胆脂瘤发生发展中的作用,深入认识胆脂瘤发病机制,并为胆脂瘤的临床治疗方法提供新的思路。方法①运用免疫组织化学两步法检测25例胆脂瘤标本及10例外耳道正常皮肤组织中XIAP及Caspase-3的表达。②采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记染色(TUNEL)技术进行检测两者组织的凋亡状态。结果①与正常上皮比较,胆脂瘤上皮中的XIAP蛋白表达明显下调(Z=2.411,P<0.05)。②胆脂瘤上皮中,Caspase-3的表达及细胞凋亡状况显著高于正常上皮(Zc=-2.877,Zt=-2.712,P<0.01)。③在胆脂瘤上皮中,XIAP表达与Caspase-3及凋亡均呈负相关(P<0.01),Caspase-3与凋亡呈正相关(P<0.01)。结论XIAP、Caspase-3的表达可能在胆脂瘤的发生、发展过程中起重要作用,它们参与胆脂瘤上皮的凋亡调控过程,可能是胆脂瘤的发病机制中一个重要因素。     

窄谱中波紫外线联合中药药浴治疗寻常型银屑病疗效观察及对血管内皮细胞生长因子影响

目的:观察中药药浴联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常型银屑病的疗效及治疗前后血清细胞因子浓度改变,探讨治疗机制。方法:32例寻常型银屑病患者中药药浴后,给予NB-UVB照射,每周3次,共40次。用酶联免疫吸附试验检测32例患者治疗前后血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平。结果:32例患者治疗后痊愈11例,临床有效率为90.6%。32例患者治疗前VEGF血清水平较健康对照者水平高,照射后显著下降。结论:中药药浴联合NB-UVB照射治疗银屑病疗效好,不良反应少,VEGF在寻常型银屑病中发挥重要作用。     

宫颈癌组织中MHC-Ⅰ类抗原呈递相关蛋白CNX HSP90 GRP94的表达及意义

目的：探讨宫颈炎和宫颈癌组织中CNX、HSP90、GRP94蛋白和HPV16感染在维吾尔族和汉族妇女中的表达及相关关系。方法：采用免疫组化SP法和PCR技术检测宫颈炎组织66例（汉族39例，维吾尔族27例）以及宫颈癌组织92例（汉族30例，维吾尔族62例）中CNX、HSP90、GRP94蛋白的表达和HPV16的感染情况。结果：CNX蛋白在维、汉宫颈癌组织中的阳性率低于维、汉宫颈炎组织中阳性率表达（67．39％，86．36％）（P〈0．05）。并且，CNX蛋白的阳性率在宫颈炎组织中维吾尔族高于汉族（100％，76．92％）（P〈0．05）。HSP90和CRP94蛋白在维、汉宫颈癌组织中的阳性率表达高于维、汉宫颈炎组织（77．17％，56．06％；77．17％，60．60％）（P〈0．05）。宫颈癌组织中HSP90蛋白阳性率表达维吾尔族低于汉族（74．19％，83．33％）（P〈0．05）。HPV16感染在宫颈炎及宫颈癌中的阳性率均为维吾尔族高于汉族（P〈0．05）。通过相关性研究发现，在维吾尔族妇女宫颈癌组织中HSP90与GRP94呈正相关性（r=0．249．P〈0．05）。HSP90蛋白的阳性表达率与HPV16型感染在宫颈癌组织中呈显著正相关（r=0．361，P〈0．05）。结论：通过对CNX、HSP90、GRP94蛋白和HPV16联合检测能提高宫颈癌的检出率。     

吉西他滨联合卡培他滨二线治疗晚期乳腺癌

背景与目的：含蒽环类或紫杉类药物的化疗方案是治疗晚期乳腺癌较佳的方案,但临床有20%～30%的患者疗效不佳,对这部分患者二线化疗目前无统一标准方案.本研究探讨既往接受过蒽环类和紫杉类药物治疗失败的晚期乳腺癌患者,使用吉西他滨联合卡培他滨方案治疗的疗效和毒性.方法：吉西他滨1 000 mg/m2,静脉滴注,第1、8天;卡培他滨950 mg/m2口服,每日2次,第1～14天;每3周为一周期,至少应用2疗程,评价临床疗效和毒性,并进行随访.结果：30例女性患者入本研究,疗效均可评价,CR 2例（6.7%）,PR 12例（40.0%）,SD 13例（43.3%）,PD 3例（10.0%）,总有效率（CR﹢PR）46.7%, 中位无进展生存期9个月,中位生存期12.5个月.主要毒性是骨髓抑制和手足综合征.结论：吉西他滨联合卡培他滨化疗方案二线治疗晚期乳腺癌有较好疗效,毒性可耐受.     

特异性抗前列腺癌多肽抑制前列腺癌细胞生长的作用研究

背景与目的：本实验组根据PSA具有的肿瘤定位及丝氨酸蛋白酶活性，设计并已获得了包含促细胞凋亡的BH3结构域、抗肿瘤血管形成的VEGF拮抗肽K237和bFGF拮抗肽DG2结构域以及可被PSA特异性水解短肽的复合型多肽APP216的纯化蛋白，并运用细胞培养初步验证了其在体外对前列腺癌细胞的杀伤作用，本文进一步探讨该多肽对人前列腺癌肿瘤异种移植物的杀伤作用，为抗前列腺癌新药的研究奠定基础。方法：利用检测荷瘤裸鼠血清PSA浓度、各组荷瘤裸鼠肿瘤体积、重量变化、各组荷瘤裸鼠治疗前后体重的变化以及病理组织学观察来评估包含有BH3、K237、DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列的多肽药物APP216对分泌PSA的前列腺癌细胞系22RV，荷瘤裸鼠及不分泌PSA的前列腺癌细胞系PC3荷瘤裸鼠的肿瘤细胞杀伤作用。结果：前列腺癌细胞22RV，的荷瘤裸鼠治疗后比治疗前血清PSA浓度下降了71．1％、肿瘤体积下降51％，治疗组肿瘤重量比对照组低52％，组织病理学观察镜下可见坏死瘤组织。而前列腺癌细胞PC3的荷瘤裸鼠治疗组肿瘤重量与对照组无明显差别；治疗前后肿瘤体积变化无统计学意义，组织病理学观察癌细胞生长活跃。所有裸鼠重要脏器均未见病理损伤。结论：APP216多肽对分泌PSA的前列腺癌细胞荷瘤裸鼠具有良好的抑制瘤细胞增殖的作用。而对于不分泌PSA的前列腺癌细胞荷瘤裸鼠抑瘤效果不佳。并且该蛋白对其他重要脏器无毒性。     

多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的亲和性

目的:研究多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的亲和性。方法:采用免疫组化染色和RT-PCR,检测与K237结合的VEGF受体KDR的表达;用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的结合能力。结果:前列腺癌细胞系LNcap中有KDR的表达;流式结果显示:多肽K237以浓度依赖性与LNcap细胞结合。激光共聚焦显微镜可观察到,多肽K237结合在LNcap细胞的胞浆和胞膜中。结论:多肽K237对前列腺癌细胞系LNcap具有较高的亲和性,为利用多肽K237通过抑制自分泌途径从而抑制前列腺癌细胞的增殖提供了基础,为肿瘤的治疗提供了新的方法。     

吉西他滨联合顺铂一线治疗晚期非小细胞肺癌79例临床报告

背景和目的 化疗是晚期非小细胞肺癌治疗的主要手段,本文拟总结吉西他滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的近期疗效、毒性反应、疾病进展时间和总生存.方法 回顾性分析我院1999年10月～2005年11月接受吉西他滨联合顺铂治疗的初治晚期非小细胞肺癌患者.79例患者中男性51例,女性28例,中位年龄53岁(21～74岁);鳞癌17例(21.5%),腺癌53例(67.1%),大细胞癌3例(3.8%),腺鳞癌1例(1.3%),未分型者5例(6.3%);分期采用AJCC 1997年标准,ⅢB期29例(36.7%),Ⅳ期50例(63.3%);行为状态(ECOG)评分0～2分,ECOG 0分15例(19.0%),ECOG 1分55例(69.6%),ECOG 2分9例(11.4%),中位ECOG评分为1分.吉西他滨800～1250 mg/m2,第1、8天静脉滴注,顺铂75～80 mg/m2,第1天静脉滴注,或30 mg/m2连用3天,静脉滴注,每三周为一周期,每例患者完成2～4周期化疗.结果 79例患者均可评价疗效,近期有效率(完全缓解 部分缓解)为31.6%,总的临床获益率(完全缓解 部分缓解 稳定)为73.4%.中位随访2.33年(0.48～6.08年),中位疾病进展时间为5.06个月,1年生存率为64.9%,2年生存率为32%.主要的毒性反应为恶心呕吐等消化道反应和血液学毒性,Ⅲ～Ⅳ度白细胞减少和血小板减少的发生率分别为25.4%和31.6%,其余的毒性反应较轻,可耐受.结论 吉西他滨联合顺铂一线治疗晚期非小细胞肺癌安全、有效,是标准方案之一.在老年患者中,疗效良好,可以推荐.对中国患者吉西他滨1000 mg/m2是可以较好耐受的剂量.     

人细胞周期蛋白cyclin D1基因RNAi表达载体的构建与鉴定

[目的]构建针对人细胞周期蛋白cyclinD1基因的RNAi真核表达载体,检测其对人卵巢癌HO-8910细胞cyclinD1基因表达的干扰效率。[方法]以cyclinD1为靶向设计,合成的4条互补寡核苷酸链克隆至pSUPER载体中,得到重组质粒pSUPER-C1￣4,行双酶切分析后测序鉴定;运用脂质体介导转染HO-8910细胞,G418筛选;采用RT-PCR检测对cyclinD1基因mRNA表达的干扰,并筛选有效的siRNA干扰序列。[结果]经酶切测序鉴定证实,重组质粒中已插入目的序列;RT-PCR表明有4个重组载体均不同程度抑制目的基因的转录,但以pSUPER-C2的干扰效率最强。[结论]在卵巢癌细胞系筛选出有效干扰cyclinD1基因表达siRNA序列,成功构建针对cyclinD1基因的RNAi真核表达载体有效抑制目的基因的表达。     

TC21/R-Ras 2在肝癌中的表达、亚细胞定位及意义

目的:探讨TC21基因在肝癌细胞、肝癌及癌旁组织中的表达、亚细胞定位及意义。方法:用RT-PCR检测TC 21在肝癌细胞系及人肝癌及癌旁组织中mRNA水平的表达,用免疫组化及Western印迹检测TC21蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,用组织芯片技术结合免疫组化检测TC21蛋白的亚细胞定位。结果:RT-PCR检测结果表明TC21 mRNA在SMMC-7721、BEL-7402、Huh-7、Hep3B、HepG2、MHCC-97L、MHCC-LM3 7个肝癌细胞系及L-02和Chang liver 2株永生化人肝细胞系、7对肝癌及对应癌旁肝组织中均有较高表达;Western印迹结果表明上述细胞系中TC21蛋白表达与mRNA表达一致,TC21在4对肝癌及癌旁组织中均呈较高水平的表达;免疫组化检测结果表明TC21在人原发性肝癌、癌旁组织、硬化肝组织与正常肝组织中的表达阳性率分别为84.2%、77.2%、41.7%、0%,肝癌与肝硬化、正常肝相比显著高表达(P<0.05,P<0.01),与癌旁组织比无统计学意义(P>0.05);统计学分析结果表明TC21蛋白表达与肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与是否肝硬化呈负相关(P<0.05);肝癌组织中TC21主要定位于肝癌细胞核,部分定位于胞质,膜定位不明显,TC21蛋白在肝癌细胞中的核定位显著高于癌旁肝细胞(P<0.001)。结论:本研究首次揭示TC21蛋白在肝癌组织中的高表达及核定位预示其在肝细胞恶性转化及肝癌发生发展中发挥重要作用。     

软组织肉瘤手术加术中放疗的临床研究

目的：探讨软组织肉瘤术中放疗的意义。方法：对39例软组织肉瘤患者行根治或姑息性手术，术中放疗在术中放疗手术室进行，术中根据肿瘤大小，选择不同术中放疗限光筒及6～12MeV电子线1次照射15～25Gy，姑息手术者剂量加大至36Gy。术后辅以外照射治疗，常规设野，5／周，2Gy／次，总量40～50Gy。初发病灶10例，术后复发29例。结果：39例患者随访12～64个月，3、5年局控率分别为71．8％和64．1％。3年生存率为82．0％。结论：术中放疗具有较高的局控率，比之其他治疗具有许多优点，将获得较高的生存率。