谷物粉尘致豚鼠哮喘模型支气管肺泡灌洗液细胞学和肺组织病理学观察

本文对比观察了用谷尘、青霉菌提取液和卵蛋白致敏并激发后阳性反应豚鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）内细胞学和肺组织病理学变化。结果发现激发试验阳性的谷尘组、青霉菌组和卵蛋白组哮喘模型ＢＡＬＦ内嗜酸细胞数分别为３６．０４±１１．２２％，３２．２１±８．２４％和３０．５０±１０．２０％，均非常显著地高于反应阴性组（１２．５０±７．２９％）和对照组（９．７５±４．０３％），Ｐ＜０．０１。光镜下见反应阳性动物支气管、细支气管痉挛以及壁内和腔内大量炎细胞浸润和粘液栓塞等。电镜下可见以嗜酸细胞为主的炎性细胞及其胞浆内大量特异性颗粒及脱颗粒后形成的空泡等，提示嗜酸细胞在谷物粉尘所致豚鼠哮喘的发病过程中起着重要的作用。     

特发性肺纤维化患者辅助性T细胞1/辅助性T细胞2的研究

目的 对特发性肺纤维化(IPF)患者辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)进行研究,探讨Th1/Th2能否反映疾病的严重性,能否预测疾病的进展.方法 入选83例IPF患者,应用酶联免疫吸附测定法检测所有受试者血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ干扰素(IFNγ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,并进行相关性分析.结果 (1)基线资料:IPF患者血清、BALF中IFNγ/IL-4比值(0.8±0.3;0.8±0.3)较对照组(1.4±0.2;1.4±0.2)显著降低;血清、BALF中IFNγ/IL-4比值与病程、呼吸困难评分、第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比、用力肺活量(FVC)占预计值百分比、肺总量(TLC)占预计值百分比、最大去氧饱和度、6分钟步行距离(6MWD)、CT间质纤维化评分显著相关(血清:r值分别为-0.426、-0.623、0.487、0.455、0.517、-0.491、0.263、-0.569,P值均＜0.05;BALF:r值分别为-0.434、-0.637、0.480、0.456、0.501、-0.507、0.253、-0.605,P值均＜0.05);血清中IFNγ/IL-4比值与CT磨玻璃影评分呈正相关(r=0.340,P＜0.01).(2)随访:IPF患者血清中IFNγ、IL-4、IFNγ/IL-4在糖皮质激素治疗者与非糖皮质激素治疗者间差异无统计学意义.随访6个月后的呼吸困难评分、FEV1占预计值百分比、TLC占预计值百分比、CT磨玻璃影评分、CT间质纤维化评分、IFNγ和IL-4较基线值显著恶化.血清中IFNγ/IL-4比值变化与呼吸困难评分、FVC占预计值百分比、TLC占预计值百分比、肺一氧化碳弥散量占预计值百分比、6MWD、CT间质纤维化评分的变化显著相关(r值分别为-0.297、0.462、0.315、0.353、0.420、-0.307,P值均＜0.05).结论 IPF患者血清和BALF中Th1/Th2存在失衡,Th1/Th2可能反映IPF的严重性,随访时血清中Th1/Th2的变化可能会预测IPF的疾病进展.     

呼吸生理学参数对于呼吸机撤离预测的研究新进展

目前，机械通气已成为危重病治疗的必要手段，而及时撤机可以避免因机械通气过久所造成的并发症和对呼吸机的依赖。长期以来延迟撤机和过早撤机现象均相当普遍。单点、瞬时呼吸生理学的相关参数层出不穷，但是准确性均较差，不能准确的指导撤机。复合参数研究，提供了相对准确的预计能力，但是特异性相对不足；而且测量复杂，不值得进一步推广。自动管道补偿是新近发展的预测撤机技术，初步研究表明：在ATC辅助下的自主呼吸试验具有较准确的撤机预测和拔管预测率，受试者工作特征（ROC）曲线下面积显著升高。但是研究例数较少，ATC下的变量数量研究较少，无相关趋势研究。呼吸生理学参数的趋势研究显示趋势研究对撤机、拔管预测的成功率较以前研究显著增加，ROC曲线下面积可达0．94。因此，较大规模的、相对无创的呼吸生理学参数的趋势研究势在必行。     

干扰盐皮质激素受体基因对RAW 264.7细胞增殖和凋亡的影响

 目的：应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法：针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。细胞分为3组：野生型(WT)组、阴性对照（NC）组和干扰（shMR）组。荧光显微镜下观察确定细胞的转染效率;实时定量PCR法检测细胞中MR mRNA的表达;CCK-8方法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况。结果：(1) MR shRNA能明显抑制RAW 264.7细胞的MR基因表达,抑制率70%以上。(2) 从第3 d开始,shMR组细胞的生长速度明显低于NC和WT组（P<0.05）,说明MR shRNA能明显抑制细胞增殖。(3) WT、NC和shMR组的增殖指数分别为(37.2±0.5)%、(37.5±1.6)%和(31.0±1.3)%,shMR组的细胞周期出现改变,S期和G₂/M期比例明显下降,增殖指数下降（P<0.05）。(4) WT、NC和shMR组的细胞凋亡率分别为(2.18±0.36)%、(6.65±0.81)%和(7.70±1.34)%,shMR组略高于NC组,但二者的差异无统计学意义（P>0.05）。结论：本研究成功构建了稳定干扰MR基因表达的RAW 264.7细胞株,MR shRNA能够明显抑制RAW 264.7细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。     

建立HPLC法测定螺内酯脂质体包封率

【目的】建立测定螺内酯脂质体含量及包封率的高效液相色谱方法。【方法】分别采用透析法和超速离心法分离螺内酯脂质体和游离药物,以HPLC法测定药物含量,计算包封率。【结果】在选定色谱条件下,辅料不干扰测定,螺内酯在0.5～8.0μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9999,n=6）,日内日间精密度（RSD）均〈2%,平均加样回收率为99.85%。透析法可使螺内酯脂质体和游离药物得到良好的分离。【结论】透析法测定螺内酯脂质体的含量及包封率准确可靠、操作简便。 更多还原     

肺纤维化发病机制新进展

人们对特发性肺纤维化发病机制的认识在不断深入,早期理论认为慢性炎症是肺纤维化的基本病因,而随后的一系列理论则认为上皮细胞的损伤及其异常修复才是肺纤维化的病因,且与炎症无关。近年来,肺纤维化发病机制可以概括为以下几方面：（1）肺泡毛细血管屏障基底膜完整性的破坏作为肺纤维化形成的＂不可逆点＂,导致肺组织的纤维化。（2）在基底膜完整性遭到破坏的情况下,上皮细胞和内皮细胞的再生失败会导致肺组织结构的破坏和病理性纤维化。（3）转化生长因子-β是纤维化的必要因素,但不足以导致永久性的纤维化。（4）持续的损伤/抗原/刺激是纤维化发展的必要条件。（5）上皮细胞向间充质细胞转化和骨髓干细胞是纤维化调节中重要的细胞机制。     

特发性肺纤维化患者支气管肺泡灌洗液中特异性蛋白标记物研究

目的 分析特发性肺纤维化(IPF)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白质谱变化,寻找特异性蛋白标记物,评价这些标记物对IPF的诊断价值及临床应用前景.方法 收集IPF患者及对照组BALF标本,应用表面增强激光解析/电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选差异蛋白.通过非线性支持向量机方法建立诊断模型,并留一交叉验证法评估各模型的预测效果.结果 IPF患者BALF中筛选出8个表达有显著差异的蛋白质峰,其中检测效率最高的4个低表达蛋白质峰质荷比(m/z)分别为1947.634、1975.519、2488.535及4950.230.以这4个蛋白质峰组合建立诊断模型,其特异性和敏感性均为100%.结论 应用SELDI-TOF-MS技术分析获得的低分子量蛋白质峰在诊断中具有较高的灵敏度和特异性,这些小分子可能在IPF发病中起重要作用.     

姜黄素衍生物对脂多糖诱导急性肺损伤的防护作用研究

对姜黄素衍生物是否可治疗脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）进行研究,为研究姜黄素衍生物的作用机制及临床应用提供参考。方法小鼠腹腔注射LPS复制ALI模型,昆明小鼠90只,随机分为6组,分别为正常组、模型组、姜黄素组,以及姜黄素衍生物低、中、高剂量组（50、100 和200 mg/kg）。预先7 d 给予小鼠灌胃治疗,第7 天小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS。分别于6 h、1 d和3 d 取材,检测血中中性粒细胞和单核细胞的比例变化。酶联免疫吸附试验检测小鼠肺组织中炎症因子白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量;丙二醛、髓过氧化物酶及谷胱甘肽试剂盒检测小鼠肺组织中氧化物质的含量。肺组织苏木精- 伊红染色法（HE）染色观察肺组织病理改变。结果姜黄素衍生物可减少小鼠血中炎症细胞数,降低小鼠肺组织中炎症因子。肺组织HE染色结果显示,模型组肺组织切片炎症细胞增多,肺泡壁增厚,肺泡结构破坏,而姜黄素衍生物各剂量组与模型组比较,差异有统计学意义（p <0.05）。结论姜黄素衍生物对内毒素诱导的ALI有一定的保护作用。     

间质性肺疾病胸部影像与肺功能、肺泡灌洗液检查对比观察

间质性肺疾病 (ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｌｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ,ＩＬＤ)是引人注目的呼吸系统疾病 ,作者对ＩＬＤ患者进行了胸部影像、肺功能及肺泡灌洗液的对比观察 ,综合评价其临床意义。1　资料及方法　　本组 2 4例 ,男 13例、女 11例 ,年龄 2 2 70岁 ,平均43 9岁 ,按照 1993年中华医学会呼吸学会制订的特发性肺纤维化 (ＩＰＦ)及结节病诊断标准[1] 诊断ＩＰＦ 10例 ,结节病 9例 ,依据临床综合分析及纤支镜肺活检病理结果诊断外源性过敏性肺泡炎 (ＥＡＡ) 3例 ,胶原病性肺间质纤维化 2例。　　本组病人全部行普通Ｘ线胸片及普通胸部Ｃ…