丙型肝炎 你问我答

最近，中华医学会肝病学分会．中华医学会传染病和寄生虫病学分会正在联合制定《中国丙型肝炎防治指南》。笔者在准备和起草的过程由发现，我国的病人对丙型肝炎的了解远远不及对乙型肝炎的了解。这里向大家作简单的介绍。     

大鼠骨髓内皮祖细胞的分离、培养和鉴定

目的研究大鼠骨髓内皮祖细胞（EPC）分离、培养并向内皮细胞方向诱导分化的方法和条件。方法从大鼠骨髓中分离单个核细胞．经差速贴壁后取二次贴壁细胞选择性诱导培养2W。以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法以及vWF、Flk-1免疫荧光染色法鉴定EPC；流式细胞术（FACS）检测EPC纯度；细胞培养液一氧化氮（NO）含量测定分析EPC功能。结果二次贴壁细胞经诱导培养后3d开始伸展，5d形成集落，7～10d增殖加速并出现条索状结构，2W大部分细胞呈多角形。Dil—ac—LDL、FITC-UEA-1双染．vWF及Flk-1免疫荧光染色阳性率均〉70％。FACS检测其中vWF阳性细胞占77．93％．Flk-1阳性细胞占81．50％。二次贴壁并经诱导培养的细胞培养液中NO含量明显高于普通培养的细胞．但低于成熟内皮细胞（P〈0．05）。结论大鼠骨髓富含EPC，体外诱导培养后可以表现出内皮细胞的部分特征。     

医药企业管理教学改革与实践

传统的医药企业管理教学不能满足培养创新型、应用型人才的需求,为培养学生的职业素质和创新思维,增强岗位适应能力,对医药企业管理的教学内容、方法和考核手段进行创新与改革。     

肺通气/灌注显像结合D-二聚体在肺栓塞中的诊断价值

目的 探讨核素肺通气/灌注(V/Q)显像结合血浆D-二聚体(D-dimer)测定在肺栓塞(pulmonary embolism,PE)中的诊断价值.方法 对临床疑似肺栓塞患者85例,采用当日或者隔日法进行8个体位的肺V/Q平面显像,有经验的两名核医学医生按PIOPEDⅡ标准分析与评估诊断结果,分为PE、非PE和不确定诊断3种.同时测定血浆D-二聚体浓度.两者相结合诊断和排除PE,并与临床最终诊断结果做对比.结果 依据临床最终诊断,85例患者中确诊PE39例(45.9％),排除PE 46例(54.1％).V/Q显像诊断PE灵敏度89.7％,特异性88.4％,准确性85.9％.血浆D-二聚体诊断PE灵敏度75.7％,特异性62.5％,准确性68.2％.V/Q显像在准确性上高于血浆D-二聚体(x2=7.72,P＜0.01).V/Q显像结合血浆D-二聚体诊断PE的灵敏度82.1％,特异性66.7％,准确性72.9％.结论 肺V/Q显像和血浆D-二聚体测定安全无创、简便,肺V/Q显像较D-二聚体(D-dimer)灵敏度、准确率高,肺V/Q显像对PE诊断有重要的作用,血浆D-二聚体对PE的筛选具有价值,两种方法结合可以提高肺V/Q显像对PE诊断的准确性,降低漏诊率.     

丙型肝炎5''''非编码区末端快速基因扩增方法的建立及应用

目的 建立快速获得丙型肝炎（HCV）基因组5’非编码区（5’uTR）真末端序列的分子生物学方法。方法 逆转录后利用末端聚合酶（TOT）进行加尾反应，再利用套式聚合酶链反应（PCR）扩增出目的末端基因的cDNA片段，A-T克隆，用限制性内切酶片段长度多态性分析（RVLP）与PCR鉴定重组子，全自动序列分析仪测定插入子序列。结果 cDNA末端快速扩增技术（RACE）获得5株HCV5’UTR克隆，包括3株全长克隆和2株缺失克隆。2株缺失克隆，一条在5’末端缺失53个碱基，另一条缺失144个碱基。结论 RACE技术快速、有效、实用，可有效获得丙型肝炎病毒基因组的5’非编码区末端序列。     

手术切除联合射频消融治疗肝癌的临床研究

目的 研究手术切除联合射频消融(RFA)治疗肝癌的临床效果及对肿瘤侵袭能力的影响.方法 回顾性分析2011年6月至2013年6月该院60例接受了手术治疗的原发性肝癌患者的临床资料.其中对照组(30例)单独使用手术切除;观察组(30例)以手术切除联合RFA.比较两组患者术前1天,以及术后第1、4、7天血液内的检测到的丙氨酸氨基转移酶(ALT);比较两组患者的肝癌完全切除率、术中出血量、术后胆漏发生率、术后住院时间;比较两组患者术后肿瘤边缘组织中血管内皮生长因子(VEGF)的阳性表达率;比较两组患者术后第6、12、24个月的复发率;比较术后第2周、第6、12、24个月血清甲胎蛋白(AFP)及VEGF水平变化.结果 对照组术前1天血液ALT为(72.30±12.40)U/L,观察组为(69.30±13.20)U/L,二者差异无统计学意义(P＞0.05);对照组术后第1、4、7天血液ALT分别为(410.60±56.810)U/L、(230.60±46.82)U/L、(130.60±38.63)U/L,观察组术为(280.80±40.21)U/L、(150.80±35.62)U/L、(64.80±21.33)U/L,二者差异有统计学意义(P＜0.05).对照组肝癌完全切除率为73.3％,观察组为96.7％,二者差异有统计学意义(P＜0.05);对照组术中出血量为(485±210)mL,观察组为(180±65)mL,二者差异有统计学意义(P＜0.05);对照组术后胆漏发生率23.3％,观察组为6.7％,二者差异有统计学意义(P＜0.05);对照组术后住院时间为(13.6±4.5)d,观察组为(8.3±2.3)d,二者差异有统计学意义(P＜0.05).对照组肿瘤边缘组织中VEGF的阳性表达率为(65.80±22.30)％,观察组几乎为0,二者差异有统计学意义(P＜0.01).观察组术后第6、12、24个月的肿瘤复发率分别为16.7％、26.7％、43.3％;对照组分别为6.7％、13.3％、23.3％,二者差异有统计学意义(P＜0.05).观察组术后第2周、6、12、24个月AFP及VEGF的水平均明显低于对照组,二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 手术切除联合RFA治疗肝癌比单独手术切除效果更明显,并且更能有效减少肿瘤的侵袭力.     

丙型肝炎患者的长期生存质量

生存质量源于health-related quality of life，称之为健康相关生存质量，又称为生命质量或生活质量。在医学模式的发展过程中，传统生物医学和社会医学的结合越来越引起人们的重视，使过去对健康的客体评价转变为对客体和主体的双重评价。丙型肝炎病毒感染的慢性化率高，并有可能存长期发展中发生肝硬化、肝癌，不仅影响感染者的生理状态，由于病程长、肝外表现多、晚期并发症多，也影响患者的社会心理健康。甚至在疾病早期，对患者生理影响还不显著时已经出现了生存质量的变化。     

CD4+CD25+调节性T细胞在慢性乙型肝炎患者免疫发病机制中的作用

目的:探探讨CD4~ CD25~ 调节性T细胞(regulatory T Cell,Treg)在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者免疫发病机制中的作用以及其可能在治疗中的应用前景.方法:收集未经抗病毒治疗的CHB患者34例和健康对照18例外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)标本,以三色/四色流式分析法对PBMC中CD4~ CD25~ Treg的频率及表面分子表达进行分析,并同时通过磁珠分选去除CHB患者PBMC中的CD4~ CD25~ Treg,分别以MHC-肽-五聚体法和酶联斑点计数法(enzyme-linked immunospot assay,Elispot)检测HBV core18-27抗原肽刺激的对HBV特异性的CTL(cytotoxic T lymphocyte)频率的升高以及IFN-γ的分泌.结果:CHB患者外周血中CD4~ CD25~ CD45RO~ CTLA4~ T细胞群以及CD4~ CD127~(lo)CD25~(hi-int)T细胞群所占CD4~ T细胞群的比例与健康对照相比均明显上升(3.78%±1.87%.4.40%±2.11%vs 1.58%±0.76%,2.11%±1.26%;t=4.86,t=5.96;P<0.01)去除CHB患者中CD4~ CD25~ Treg后,特异性CTL的频率以及其分泌IFN-γ的频数与未去除组比出现显著上调(0.94%±0.38%,26±13 vs 0.20%±0.18%,119±30;t=5.25,t= 9.886;P<0.01).结论:CHB患者循环中增多的Treg可能参与抑制抗HBV的免疫应答抑制,去除Treg以及联合病毒抗原肽刺激的进一步研究可能为CHB的免疫治疗提供新的思路.