医学微生物学教学中以问题为基础学习与以授课为基础学习教学法的比较研究

目的 探讨以问题为基础学习与以授课为基础学习教学法在医学微生物学教学中的应用效果.方法 选择河南大学医学院2006级和2007级临床医学专业各100名本科学生,分别采用以问题为基础学习和以授课为基础学习教学法进行医学微生物学理论教学.结果 学生的考试成绩表明,以问题为基础学习教学班学生"细菌学"的平均成绩明显高于以授课为基础学习教学班学生,而"病毒学"的平均成绩却明显低于以授课为基础学习教学班学生.结论 两种教学法各有所长,在具体的医学微生物学教学中,只有灵活运用才会获得较好的教学效果.     

支持向量机预测食管鳞癌患者术后生存期

目的 应用支持向量机（support vector machine, SVM）建立食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）术后生存期预测模型并评估该模型判断ESCC生存期的效能。方法 随访168例接受根治性手术治疗的ESCC患者,分析ESCC临床病理特征和14-3-3σ、热休克蛋白gp96、巨噬细胞移动抑制因子（migrationinhibitory factor, MIF）等3个蛋白的表达规律与ESCC生存期的相关性;应用Matlab软件进行SVM运算,对训练组128例ESCC患者建立最优预后分类模型ESCC-SVM,并用测试组40例患者验证分类效率,ROC曲线分析ESCC-SVM及其他预后相关因子对高低死亡风险ESCC的识别能力。结果 ESCC-SVM由性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期、14-3-3σ和gp96等7个最优属性组成,该模型区分训练组和测试组ESCC五年整体生存率的最大AUC分别为0.96、0.86、准确率分别为97.7%、90.0%,明显优于目前临床应用的TNM分期（准确率分别为62.5%、67.5%）及其他各临床病理属性。Cox多因素比例风险回归模型分析发现年龄、T分期、gp96和ESCC-SVM是影响ESCC术后生存期的独立因素。ESCC-SVM与性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期和14-3-3σ均显著相关。结论 本研究建立的ESCC-SVM为预后评估、临床治疗方案选择及个体化治疗提供了理论依据。     

胆固醇与胆结石的关系

目的:探讨胆固醇与胆结石的关系.方法:对某高校3 905名教职员工进行健康检查,采用彩超进行肝胆检查,全自动生化分析仪进行血总胆固醇测定,分析他们二者的关系.结果:3905名教职员工健康检查发现胆结石189例,其中胆固醇增高(>5.17 mmol/L)68例(35.98%),胆固醇正常偏高(4.67-5.16mmol/L)40例(21.16%),胆固醇正常(<5.17mmol/L)81例(42.86%),胆固醇正常偏高和增高与胆固醇正常相比,其胆结石发病率明显增高(均P<0.01).结论:胆结石与高胆固醇增高有一定关系,在胆结石保守治疗时,应注意降低胆固醇.     

自体表皮移植联合中药治疗白癜风的临床研究

白癜风是一种后天性色素脱失的皮肤病 ,我国人群患病率约在 1%～ 2 %。 1990～ 1996年我们采用自制中药白癜丸治疗白癜风 ,有效率达 88 6%。 1996年开始采用自体表皮移植治疗白癜风 ,也取得了一定疗效 ,但移植后的新生色素向周围扩展面积有限 ,患者需多次进行植皮。近期我们采用白癜丸联合自体表皮移植治疗白癜风 ,取得了很好疗效 ,既减少了移植表皮的次数 ,又减轻了患者的痛苦 ,现报告于下。临床资料　 64例白癜风 (根据病史及临床表现确诊 )患者均来自河南大学男科学研究所专家门诊、河南大学淮河医院及开封市第一人民医院皮肤科 ,我们将 …     

新型多胺缀合物NNAMB诱导K562细胞凋亡及其机制

目的 探讨新型多胺缀合物NNAMB诱导K562细胞凋亡及其分子机制.方法 采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法、台盼监拒染法检测细胞活力;Hoechst33258染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化、凋亡率、线粒体膜电位的变化;Western blot检测caspase-3、caspase-8、caspase-9和cytochrome c的表达.结果 NNAMB抑制K562细胞的生长,并呈现剂量及时间依赖性.随着NNAMB浓度的增加和作用时间的延跃,Sub-G1期细胞明显增加,线粒体膜电位下降.经NNAMB处理后的K562细胞中,可见到明显的凋亡细胞.蛋白印迹检测表明,NNAMB可诱导caspase-3、easpase-9的活化及线粒体cytochrome c释放到胞浆中,但caspase-8的表达无明显变化.结论 NNAMB能显著抑制K562细胞增殖,并可通过内源性线粒体途径诱导细胞凋亡.     

卡介苗在关节炎模型小鼠诱导中的作用

目的：探讨在牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型（ Collagen-induced arthritis ,CIA）小鼠的诱导过程中,弗氏完全佐剂（ FCA）中的卡介苗（ BCG）浓度和CIA小鼠关节炎严重程度的关系。方法：将牛Ⅱ型胶原蛋白溶液与含不同BCG的FCA等体积混合乳化,在小鼠尾根部注射进行免疫。免疫后观察小鼠的相关指标包括体重、发病率、血清TNF-α、关节炎指数及小鼠关节和脾脏的病理变化。结果：与1 mg/ml卡介苗组相比,4 mg/ml卡介苗组诱导的CIA小鼠发病早,关节炎指数、关节和脾脏病理评分升高及小鼠体重下降更明显,血清TGF-α明显升高,差异有统计学意义。结论：在进行CIA小鼠诱导时,BCG浓度和CIA小鼠关节炎严重程度呈正相关,实验中可以根据对动物的要求,选择含不同BCG的佐剂来诱导CIA小鼠。     

破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2的真核表达及多克隆抗体制备

目的：为了获得真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和OCILRP2特异性抗体,用于OCILRP2生物学功能的进一步研究。方法：构建了融合人IgG Fc段的小鼠OCILRP2真核表达载体pIg-CD5-OCILRP2,将pIg-CD5-OCILRP2转染CHO细胞,G418筛选稳定表达细胞株;Protein A 亲和层析从 CHO 细胞培养上清中纯化重组蛋白OCILRP2-Fc 并免疫家兔制备OCILRP2多克隆抗体。 ELISA检测抗血清和多克隆抗体的效价,Western blot 验证多克隆抗体的特异性,并应用该抗体检测OCILRP2在树突状细胞（ Dendritic cells ,DC）中的表达。结果：ELISA结果表明OCILRP2-Fc稳定表达细胞株经过多次传代培养后仍然具有较高的蛋白表达水平;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示纯化后的蛋白只有单一条带出现,且该条带可以被抗人IgG检测到;重组蛋白OCILRP2-Fc免疫家兔获得的抗血清和纯化后得到的OCILRP2多克隆抗体效价分别为1∶1280000和1∶320000,Western blot证明该抗体可以和免疫原OCILRP2-Fc及NIH/3T3细胞中表达的OCILRP2特异性结合。应用该抗体检测OCILRP2在 DC 的表达发现 OCILRP2在成熟 DC 的表达明显高于不成熟 DC。结论：获得了真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和高效价的OCILRP2特异性抗体,为进一步研究OCILRP2在免疫应答中的功能奠定了基础。     

死亡受体5在内毒素诱导人肝细胞凋亡中的作用

探讨内毒素(LPS)在体外直接作用于LO2细胞引起凋亡及可能机制。将LO2细胞常规培养7 h贴壁后,分为对照组、内毒素处理组、抗人DR5单抗mDRA-6处理组及联合组(内毒素+mDRA-6)。然后在倒置显微镜下观察LO2细胞形态变化;MTT法检测内毒素对LO2细胞生长的影响;流式细胞术检测LO2细胞表面DR5的表达率;Annexin-V和PI双染法检测细胞凋亡率。结果:经内毒素处理的LO2细胞呈现明显的凋亡形态特征,出现核固缩、染色质边缘化、凋亡小体形成。流式细胞术分析表明:对照组LO2细胞表面DR5的表达率为4.8%,用内毒素(10 mg/L)处理12 h后,DR5表达率上调为37.76%。LO2细胞12 h凋亡率:内毒素处理组、抗人DR5单抗mDRA-6处理组、内毒素联合mDRA-6组细胞凋亡率分别为37.78%(早期凋亡21.65%,晚期凋亡16.13%)、29.58%(早期凋亡18.21%,晚期凋亡11.37%)和65.81%(早期凋亡50.61%,晚期凋亡15.20%)(P<0.05)。细胞凋亡率与内毒素的剂量及细胞表面DR5的表达呈相关性。结论:LPS对LO2细胞的杀伤作用主要通过诱导凋亡,细胞表面DR5受体的表达上调可促进这种凋亡作用。     

斑点金免疫渗滤试验检测不育者血清抗精子抗体

目的研究一种快速鉴定抗精子抗体的新方法的临床意义。方法用化学试剂提纯精子抗原,将其结合于硝酸纤维素膜上;以胶体金颗粒结合的羊抗人lgG作为标记抗体,以斑点金免疫渗滤试验(Dot-immunogoldfiltrationassay,DIGFA)检测人血清抗精子抗体。结果抗原抗体通过渗滤在膜上进行反应,10min内即可用肉眼观察结果,在289例临床血清标本的检测中,阳性率为21%,与酶联免疫吸附试验(ELISA)的结果基本相符。结论斑点金免疫渗滤试验可快速测定抗精子抗体,具有推广使用的价值。     

热疗和人抗DR5单克隆抗体致肿瘤细胞凋亡的协同作用

目的:探讨热疗和人抗DR5单克隆抗体(mAb)致肿瘤细胞凋亡的协同作用.方法:使用MTT法检测抗人DR5mAb单独或联合应用顺铂或热疗对肝癌SMMC-7721细胞体外增殖的抑制作用,以流式细胞术检测不同方案对SMMC-7721细胞凋亡率的影响.结果:未热处理细胞增殖抑制率分别为:顺铂组32%;m-DRA-6组22%;顺铂和m-DRA-6组37%.热处理细胞增殖抑制率分别为:顺铂组58.06%;m-DRA-6组14.52%;顺铂和m-DRA-6组91.13%.细胞凋亡的未热处理组:顺铂组13.53%;m-DRA-6组13.66%;顺铂和,DRA-6组84.24%.热处理组:细胞仅热处理(不加任何药物)对照组9.41%;顺铂组30.27%%;m-DRA-6组57.52%;顺铂和m-DRA-6组91.33%.结论:热疗不仅能明显提高肿瘤细胞凋亡,而且能提高m-DRAfi和化疗药物的致肿瘤细胞凋亡作用.