改良快蓝焦油固紫染色法

改良快蓝焦油固紫(Luxol Fast Blue—CresylViloet)染色是根据Diamond法改良而建立的联合染色方法.可以同时在一张切片上观察神经细胞、神经胶质细胞和髓等结构.该方法具有两个突出优点:(1)使用冰冻切片法,制作时间周期短.染色方法简便,切片不易破碎.可制直径>2厘米的连续切片,对脑切片尤为适宜,便于科研工作中的连续观察.(2)集神经细胞,神经胶质细胞和髓鞘于一体.结构清晰,容易分辨.可使用于中枢神经系统的研究和教学中.1 方法1.1固定10%福尔马林液灌注或直接固定.10%盐水福尔马林用碳酸镁饱和液再固定14～20天.中间更换新固定液一次.1.2 冲洗 组织流水冲洗1小时,入20%蔗糖内至组织块下沉.1.3 切片 冰冻切片20～40μm.收集切片于20%酒精溶液中,便于展平切片.     

豚鼠脊髓运动神经元分支至股神经和腰背肌的研究——逆行荧光双标记法

应用碘化丙院-双苯甲亚胺配伍逆行荧光双标记技术对豚鼠脊髓运动神经元分支至股神经和腰背肌作了研究.结果发现股神经的运动纤维来源于同侧L1～5脊髓前角内侧核运动神经元和L4～5脊髓前角外侧核运动神经元;腰背肌的运动纤维来源于同侧相应节段脊髓前角内侧核运动神经元.在L3～5脊髓前角内侧核运动神经元中,有碘化丙啶-双苯甲亚胺荧光双标记运动神经元,占内侧核全部标记运动神经元的18.8‰.结果提示脊髓前角运动神经元具有分支分布至腰背肌和股神经的现象.     

颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定

目的:研究颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定,为立体定向自体神经干细胞移植治疗脑出血、脑梗塞及颅脑损伤后遗症提供临床前基础。方法:通过改进原代培养方法,从颅脑手术患者废弃脑组织中培养和鉴定神经干细胞(NSCs)。收集颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织各约500 mg以上,按改良方法进行原代培养并传代,通过免疫荧光检测NSCs标志物巢蛋白(Nestin)的表达,传代培养5代时开始进行诱导分化。结果:培养约3～10 d后,多数患者废弃脑组织中均可见干细胞球生长,经Nestin免疫荧光检测均呈阳性表达。选取第6代诱导分化后的贴壁细胞分别经β-Tubulin(神经元标志物)、Sox10(少突胶质细胞标志物)与GFAP(星形胶质细胞标志物)免疫荧光检测,可见少量神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞阳性表达。取第3代与第6代细胞行免疫印迹鉴定,第3代细胞仅见Nestin与少量β-Tubulin表达,第6代细胞可见不同程度的Nestin、β-Tubulin、Sox10及GFAP等表达。结论:本研究成功从颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织中分离培养获得成人NSCs,并可向神经元及神经胶质细胞分化,使立体定向自体神经干细胞移植促进神经功能修复从实验室到临床应用成为可能。     

β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究

为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在 Golgi复合体参与蛋白质的糖链修饰     

经典名方当归补血汤的古代文献分析与考证

当归补血汤出自金元时期李东垣《内外伤辨惑论卷中·暑伤胃气论》,是一首被历代医家传承发扬的补气生血经典名方,已被收录于2018年国家中医药管理局公布《古代经典名方目录（第一批）》。通过系统梳理古籍文献及现代文献,并结合古代经典名方关键信息考证原则,对经典名方当归补血汤的历史源流、组成、剂量、炮制、制法与煎服法、功效与应用进行考证分析。共收集相关古籍文献信息604条,其中涉及中医古籍186部,其中40部（金元5部,明19部,清16部）中医古籍详细记载了组成、炮制、剂量等内容。有关当归补血汤组成,主要为当归和黄芪;根据古今剂量折算,黄芪37.3~38.1 g,当归7.5~7.6 g;黄芪宜采用蜜炙,当归为酒当归;加入水600 mL,煎至300 mL,饭前温服。该方古籍主要记载功效为血虚发热,证见肌热、燥热,烦渴引饮,目赤面红,昼夜不息,脉洪大而虚,重按无力,是补气生血名方。现代研究表明,当归补血汤常用于治疗各种贫血、糖尿病肾病、肿瘤、心脑血管疾病。上述研究结果为经典名方当归补血汤后期开发研究提供了参考依据。     

电视胸腔镜手术和传统开胸手术治疗胸腺瘤患者的临床效果

目的：探究电视胸腔镜手术与传统开胸手术治疗胸腺瘤患者的临床效果。方法：选取河南科技大学第一附属医院2022年1月至2023年1月收治的64例胸腺瘤患者作为研究对象。按照手术方式不同分为对照组和观察组,各32例。对照组患者行传统开胸手术治疗,观察组患者行电视胸腔镜手术治疗。比较两组患者手术及术后相关指标、肺功能指标、应激反应指标、并发症发生情况。结果：（1）术前,两组患者应激反应、肺功能指标比较,差异无统计学意义（P> 0.05）;术后,观察组患者肺功能指标优于对照组,应激反应指标低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。（2）观察组患者并发症发生情况、手术及术后相关指标均低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：电视胸腔镜手术在胸腺瘤治疗中的价值优于传统开胸手术,除减少患者术中出血量外,还可减轻术后应激反应、疼痛感、并发症,利于保护患者的肺功能,进而提高其预后效果。     

慢性病护理质量评价指标体系研究现状及启示

对国内外慢性病护理质量评价指标体系构建的理论框架、方法以及构建范围进行归纳总结,认为我国慢性病护理质量评价指标体系中应加强对患者结局指标的关注,应注意指标体系构建方法的科学性,还应积极探索多病种慢性病护理质量评价指标体系,构建统一的适合我国国情的慢性病护理质量评价指标体系。     

内镜粘膜切除术在结直肠肿瘤诊治中的临床应用价值

目的：探讨内镜粘膜切除术（Endoscopic Mucosal Resection:EMR)在结直肠肿瘤诊治中的临床应用价值。方法：对1996年6月－1998年2月间电子肠镜检出的34例38个病变行EMR,并比较EMR标本与普通活检标本对早期癌的检出率。结果：对34例38个病变施行EMR成功37次,失败1次,成功率97．4％（37／38）。成功的37次中包括分割切除（Endoscopic Picemeal Mucosal Resecton;EPMR)9次。EPMR术中并发少量出血2例（5．4％）。病理检查发现多发息肉癌变率（100％）高于单发息肉（29．41％）,P＝0．001,肿瘤最大径＜1．5cm腺瘤癌变率为36．37％（8／22）、≥1．5cm为73．33％（11／15）,P＝0．045;EMR标本与普通活检标本对早期癌的检出率分别是52％和26％（P＜0．001）,而且普通活检的漏检率达50％（8／16病变）。结论：内镜下大肠粘膜切除术能够对常规圈套法不能摘除的肿瘤样病灶切取活检,以达到病理学诊断定性质、定范围、定深度的理想要求,且对早期大肠癌的检出率优于普通活检。     

我院医院伦理委员会的做法及体会

阐述了新形势下建立医院伦理委员会的重要性和必要性,介绍了上海第二医科大学仁济医院伦理委员会成立以来在新药、新技术应用审议,医疗行为道德责任审议分析、医学伦理学研究及伦理道德科普宣教等方面开展的工作和成效.     

TGF—β1对大鼠系膜细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响

目的：通过对大鼠系膜细胞转染TGF－β1基因和反义TGF－β1基因,观察该细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响。方法：采用MTT、细胞计数和流式细胞仪检测检测细胞增殖;Northernblot和Western blot法检测其纤溶酶原激活性物质抑制－1（PAI－1）的表达,酶谱分析法检测其纤溶酶原激活物（tPA)活性。结果：过表达TGF－β1的系膜细胞生长受抑制,其PAI－1mRNA和蛋白表达增强,而tPA酶活性则降低;而低表达TGF－β1的系膜细胞增殖加速,其PAI－1mRNA和蛋白表达降低,tPA酶活性增强。结论TGF－β1可通过对大鼠系膜细胞增、纤拳激活性及其抑制因子表达的影响,而促进肾小球纤维化的发性。