流式细胞术分析舌体鳞癌细胞DNA倍体和细胞周期的意义

目的探讨舌体鳞癌细胞的DNA倍体、细胞周期特征,并分析其临床意义.方法采用流式细胞术测定40例舌体鳞癌标本及10例正常舌体组织中的异倍体、DNA指数、增殖指数和S期细胞比例,并研究这些参数与肿瘤组织分期之间的关系.结果 40例舌体鳞癌中,异倍体检出率为70%(28/40);舌体鳞癌与正常舌组织相比,DI、SPF有显著性差异,相对于低分化组而言,高、中分化组的DI、SPF及PI有显著性差异.结论流式细胞仪可用来分析舌休鳞癌的DNA;DI可以鉴别细胞的良恶性;DI、SPF、PI可以作为恶性程度及预后的指标.     

RhIL-21对NK-92MI细胞生物学活性的影响

目的探讨rhIL-21对NK-92MI细胞免疫功能的影响。方法以不同浓度(25～100ng/ml)的rhIL-21培养NK-92MI细胞24～72h,观察NK-92MI细胞的增殖。以50ng/ml的rhIL-21处理NK-92MI不同时间后,FACS检测NK-92MI细胞的凋亡,NK-92MI细胞表面NKG2D受体及胞内颗粒酶-B蛋白的表达;细胞杀伤试剂盒检测NK-92MI细胞对靶细胞K-562的细胞毒效应;RT-PCR检测NK-92MI受体NKG2D,效应分子颗粒酶-B、穿孔素及细胞因子IFN-γ基因mRNA的表达;ELISA检测其分泌IFN-γ的水平。结果 RhIL-21虽能抑制NK-92 MI细胞的增殖(P<0.05),但不会促进细胞的凋亡(P<0.05)。RhIL-21能促进NK-92MI细胞穿孔素、IFN-γ、颗粒酶-B、NKG2D受体基因及相应蛋白质的表达上调(P<0.05)。rhIL-21预处理组NK-92MI对K-562细胞的细胞毒效应也明显增强(P<0.05)。结论 RhIL-21能增强NK-92 MI细胞的细胞毒效应,IL-21在肿瘤的免疫治疗中有潜在临床应用价值。     

沙立度胺治疗多发性骨髓瘤患者IL-6变化

目的初步探讨沙立度胺治疗多发性骨髓瘤(MM)的可能作用机制。方法采用流式细胞技术检测了20名正常人、20例初治MM患者、36例治疗后的MM患者的血浆白细胞介素-6(IL-6)水平。结果①MM患者血浆IL-6水平[(17.14±5.54) ng·L~(-1)]明显高于正常对照组[(11.24±2.86)ng·L~(-1),P<0.01],特别在初始组血浆IL-6水平最高[(22.26±4.53)ng·L~(-1)];②联合化疗组MM患者血浆IL-6含量[(16.32±3.32)ng·L~(-1)]较初始组明显下降,两者差异具有高度统计学意义(P<0.01);③沙立度胺 联合化疗组MM患者血浆IL-6水平[(12.48±3.13)ng·L~(-1)]最低,较初治组及联合化疗组均有明显降低(P<0.01)。结论沙立度胺可能存在下调IL-6的水平,抑制骨髓瘤细胞增殖,起抗肿瘤作用。     

静脉注射骨髓基质干细胞对放射性脑损伤模型大鼠认知障碍的影响

目的观察静脉注射骨髓基质干细胞(MSCs)对放射性脑损伤模型大鼠认知功能的影响。方法离体分离、培养、增殖成年大鼠MSCs。采用6 MV X线对8～10周龄雌性SD大鼠做全脑照射,照射剂量20 Gy。照后1周采用尾静脉注射Hoechst33342荧光标记的MSCs(4×10~6),注射后4、8周观察大鼠认知功能变化,应用免疫荧光技术检测大鼠脑内Hoechst33342标记细胞及分化的功能细胞。结果与正常对照组相比,模型组大鼠的学习记忆能力明显受损(P<0.01),静脉注射后4、8周,照射组大鼠认知功能明显改善(P<0.05)。结论静脉注射MSCs可显著改善全脑照射大鼠认知功能,MSCs可在放射性脑损伤大鼠脑组织中存活和分化。     

冠心病患者19项生化指标调查分析

目的探讨常规生化项目检测对冠心病患者诊治的意义。方法应用日本OLYMPUS AU-2700全自动生化分析仪检测100例冠心病患者和60例健康对照者肝功能、肾功能、血糖、血脂系列的含量。结果冠心病患者血尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL—C）、载脂蛋白B（ApoB）、脂蛋白a（Lpa）显著高于健康对照组（P〈0．05），总胆红素（TB）、高密度脂蛋白（HDL—C）显著低于健康对照组（P〈0．05）。其他生化项目差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论联合检测血总胆红素、尿酸与血脂对冠心病诊断及病情的监测有一定价值。     

金荞麦Fr4诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的研究金荞麦有效部位Fr4能否诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响。方法用MTT法检测Fr4对细胞增殖的影响;光学显微镜和透射电镜观察细胞形态改变;Annexin-V/PI双染法检测细胞膜介导的凋亡;琼脂糖凝胶电泳观察DNA碎片;TRAP-PCR-ELISA检测端粒酶活性。结果金荞麦Fr4 60~240 mg.L-1能诱导HL-60细胞凋亡,电镜观察到典型的凋亡细胞,电泳呈现出阶梯状条带,流式细胞仪检测到早期凋亡细胞数随剂量的增加而升高。MTT法示金荞麦Fr4抑制HL-60细胞增殖,并且呈剂量依赖性趋势,药物作用24 h的IC50为115 mg.L-1,Fr4诱导HL-60细胞凋亡过程中,端粒酶活性下降。结论金荞麦Fr4可诱导HL-60细胞凋亡,其机制可能与端粒酶活力下降有关。     

急性白血病PTEN mRNA表达和Akt磷酸化水平的相关性研究

目的了解急性白血病（AL）PTENmRNA表达和Akt磷酸化（p-Akt）水平的关系，以期探讨急性白血病发生发展的机制。方法采用逆转录（1it）-PCR法检测白血病细胞系K562、Jurkat、HL-60及21名健康对照者和68例AL患者PTENmRNA表达情况。同时用流式细胞术检测K562、Jurkat、HL-60细胞和AL患者p-Akt水平。结果（1）21名健康对照者PTENmRNA阳性18名，占85．70％。K562细胞PTENmRNA阳性，Jurkat、HL-60细胞阴性。68例AL中PTENmRNA阳性18例，占26．47％，与健康对照者比较差异有统计学意义（Х^2=23．38，P〈0．01）；31例AL缓解患者PTENmRNA阳性21例，与AL初诊组比较差异有统计学意义（Х^2=15．19，P均〈0．01）。AL各亚型PTEN阳性率比较差异无统计学意义。（2）21名健康对照者p-Akt中位数1．57％。K562、Jurkat细胞p-Akt高表达，HL-60细胞低表达。68例AL患者p-Akt中位数25．47％，与健康对照者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）AL患者FYENmRNA表达缺失率与p-Akt阳性率呈显著正相关（Х^2=0．73，P〈0．01）。结论AL患者PTENmRNA表达缺失是导致p-Akt高表达的关键因素之一，可能和急性白血病的发生发展有关。     

原因不明复发性流产患者CD4^＋CD25高表达调节性T细胞表达研究

妊娠是极其复杂的生理过程,正常妊娠的维持有赖于母胎免疫耐受的形成。一旦母胎免疫失衡,可能发生原因不明的复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA）,CD4^＋CD25^＋调节性T（Treg）细胞在母胎耐受的形成中起重要作用。本研究探讨CD4^＋CD25高表达Treg比例变化与URSA发生的关系。     

急性B淋巴细胞白血病抗原异常表达与微小残留病检测（附17例报告）

多参数流式细胞术（FCM）免疫表型分析已成为白血病分型诊断的重要工具。近年来主张用CD45／SSC双参数散点图设门的方法进行多色分析，容易将恶性克隆细胞与正常细胞群相区别，使白血病分型更为准确，并可用于微小残留病的检测。作应用FCM对70例初诊为急性B淋巴细胞性白血病（B—ALL）患进行免疫分型，发现多种抗原异常表达，并试用不同的抗体组合对其中18例缓解后的患进行微小残留病（MRD）的追踪检测。报告如下。     

雷帕霉素诱导骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞凋亡及机制研究

为了观察雷帕霉素(RAPA)对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系MUTZ-1增殖的抑制、凋亡作用并探讨其相关的机制,用MTT法检测RAPA对MUTZ-1细胞增殖的影响;流式细胞术分析MUTZ-1细胞Annexin V/PI、caspase3、细胞周期、PTEN、p-Akt和p-mTOR蛋白的表达。结果表明,RAPA能显著抑制MUTZ-1细胞增殖,呈剂量和时间的量效关系(24、48和72小时的r=0.67,0.61和0.72)。RAPA作用MUTZ-1细胞24-72小时,G0/G1期细胞较对照组明显增高(p0.01),随着药物浓度增加而增多(r=0.94、0.93和0.92),细胞周期阻滞在G0/G1期。Annexin V+PI-细胞较对照组增多(p0.01),且随着浓度的增高而增多(r=0.91、0.94和0.96)。PTEN表达荧光强度与对照组比较显著增高(p0.01),随着药物浓度增高表达增强(r=0.93),p-Akt和p-mTOR表达的荧光强度与对照组比较显著降低(p0.05),随着药物浓度增高而表达减低(r=0.95和0.91)。结论:RAPA与靶分子mTOR作用,抑制PTEN/PI3K-Akt/mTOR信号转导通路,诱导MUTZ-1细胞凋亡。