VEGF对血管内皮细胞损伤的拮抗作用及作用机制

冻结性冷损伤是以组织冻结再融化过程的病理改变为基础的损伤。已经证实,血管内皮细胞（VECs）除有屏障和膜转运功能外,还具有内分泌功能,主动参与了多种生命活动,对维持体内环境的平衡与稳定具有重要作用。冻伤过程中VECs的损伤,可促进微循环血栓形成造成微循环障碍;待到复温后,血液恢复流动又可导致不可逆的再灌注损伤。因此,减轻内皮细胞损伤,可以减少微循环血栓形成,从而减轻再灌注对机体造成的损伤。血管内皮细胞生长因子（VEGF）作为重要的血管生长因子,在冻伤时对VECs损伤具有拮抗作用,可通过促进血管再生、抗血栓形成、抑制血管平滑肌过度生长及抗炎的作用等实现的对血管的保护作用,为临床防治冻伤提供了新的思路。     

高功率微波对视网膜神经节细胞脂质过氧化作用的实验研究

目的 观察微波对体外培养的兔视网膜神经节细胞的脂质过氧化损伤作用。 方法 体外培养兔神经节细胞,以平均功率为80　mW/cm²的微波进行辐照,辐照时间分别为15、30、45min。辐照后立即于倒置显微镜和电镜下观察细胞形态变化,羟胺法和改良硫代巴比妥酸荧光法分别测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。 结果 微波辐照后,细胞轴突消失,电镜可见线粒体及内质网肿胀。随辐照时间延长,细胞逐渐趋向于坏死,细胞MDA含量增高,45min辐照组MDA含量为对照组的5.11倍。SOD则逐渐降低。 结论 微波可引起视网膜神经节细胞脂质过氧化损伤,脂质过氧化反应可能是微波视网膜损伤的作用机制之一。 (中华眼底病杂志,2000,16：32-34)     

MPP+对PC12细胞增殖及外信号调节激酶影响

目的研究1-甲基-4苯基-吡啶离子(MPP⁺)对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法PC12细胞体外培养,分别以100,300,500μmol/L MPP⁺进行染毒。四甲基偶氮噻唑蓝法(MTT)观察MPP⁺对细胞的抑制作用;免疫印迹法检测细胞ERK1/2表达及磷酸化水平。结果不同剂量以及不同作用时间的MPP⁺对PC12细胞增殖有明显的抑制作用,抑制率为18.86%~58.06%。MPP⁺可以抑制细胞外调节信号激酶(ERK)的磷酸化水平,其中300μmol/L MPP⁺染毒3 d时,ERK磷酸化水平约为对照组的4.7%。ERK通路阻断剂PD98059与300μmol/L MPP⁺共同作用时,对细胞增殖的抑制率增高至78.9%。结论MPP⁺可以明显抑制PC12细胞的增殖,降低ERK的磷酸化水平可能是其重要分子机制之一。     

MPP+对PC12细胞体外生长增殖的毒性作用

目的: 研究不同剂量1-甲基-4苯基-吡啶离子(MPP )对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞生长增殖的抑制作用,探讨MPP 多巴胺能神经毒性机制. 方法: PC12细胞体外培养,以100～700 μmol/L MPP 进行染毒. MTT法测算MPP 作用1～7 d对PC12细胞的抑制情况并绘制生长曲线;取4 d为作用时间,细胞计数法观察MPP 对细胞的抑制率;透射电镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期改变情况. 结果: 细胞生长曲线的改变证实MPP 对PC12细胞的生长增殖有显著抑制作用,而且呈时间-剂量-效应关系. 细胞生长抑制试验结果显示100～700 μmol/L MPP 对细胞的抑制率为0.22～0.66 (P<0.01);透射电镜观察发现MPP 可诱导PC12细胞发生凋亡的形态学改变,同时伴有线粒体肿胀;流式细胞仪检测显示100, 300 μmol/L MPP 作用后,细胞总凋亡率比对照组分别增加0.51和0.62 (P<0.01). 结论: MPP 对PC12细胞的生长增殖有明显的抑制作用,而诱导细胞凋亡可能是MPP 产生多巴胺能神经毒性的重要机制之一.     

蛋白酶体抑制剂MG132对PC12细胞的增殖抑制作用

目的:了解蛋白酶体抑制剂MG132对多巴胺能细胞PC12增殖和凋亡的影响. 方法:用不同浓度的MG132处理PC12细胞3 d,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)微量比色法检测MG132对PC12细胞增殖的影响,通过姬姆萨染色法和流式细胞术检测MG132对PC12细胞凋亡的影响. 结果:在作用时间相同(3 d)的条件下,随着MG132浓度的增高(0, 1, 2.5, 5, 10, 20 μmol/L),对PC12细胞增殖的抑制作用逐渐增强. 当MG132浓度达到2.5 μmol/L时,对PC12细胞的抑制率超过40%, IC50＝3.78 μmol/L. 同时,MG132能够明显诱导PC12细胞凋亡:姬姆萨染色显示,浓度为2.5 μmol/L的MG132作用3 d,细胞凋亡率为24.7%,而对照为1.3%;流式细胞术分析结果表明,浓度为2.5 μmol/L的MG132作用3 d,细胞凋亡率为25.6%,而对照为0%. 结论:蛋白酶体抑制剂MG132能够抑制多巴胺能细胞PC12的增殖并诱导细胞凋亡,蛋白酶体活性的丧失可能影响到多巴胺能细胞的生存.