TT病毒ORF1基因在大肠杆菌中的表达

目的：表达TTVORF1蛋白,为免疫学检测TTV提供抗原。方法：以pE-30a为载体表达硫氧还蛋白与TTV第一开放读码框（ORF1）497－770aa段的融合蛋白。结果：得到分子量约为44Kda表达产物。以纯化的表达产物为抗原检测TTV DNA阳性和阴性血清表明所表达的融合蛋白具有TTV特异抗原性。结论：该TTVORF1融合蛋白可用做免疫学检测TTV感染的抗原。     

结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6kDa蛋白原核载体的构建及在E．coli中的高效表达

目的获得高效表达的结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6kDa蛋白（ESAT-6）。方法利用PCR方法扩增出ESAT-6基因片段,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-21b（＋）,酶切分析和序列测定鉴定出ESAT-6基因的阳性重组子,将其转化入EcoliBL21（DE3）,阳性菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达;重组蛋白经Ni-NTAHis·Bind Resins纯化。结果成功扩增出ESAT-6基因片段,构建了重组表达质粒pET-ESAT-6,SDS-PAGE显示表达产物分子量约为6kD,经亲和纯化后的ESAT-6重组蛋白纯度高,且能被结核病人血清所识别。结论利用pET原核表达系统成功的对结核分枝杆菌ESAT-6重组蛋白进行高效表达和纯化,重组蛋白具有良好的免疫活性。     

miR-150-5p/362-5p在结核菌潜伏感染者外周血单核细胞中的表达及诊断价值

目的分析miR-150-5p和miR-362-5p在结核菌潜伏感染者(LTBI)外周血单核细胞中的表达水平,并探讨其诊断价值。方法选取LTBI人群和健康对照(HD)各25例,应用Taq Man q PCR测定其外周血单核细胞中miR-150-5p和miR-362-5p表达水平,以U6 snRNA作为内参。应用ROC曲线评价miR-150-5p和miR-362-5p诊断LTBI的效果。结果 miR-150-5p在LTBI人群中的表达水平为(15.95±1.79),显著高于HD(7.09±0.52),差异有统计学意义(P0.01);miR-362-5p在LTBI人群中的表达水平显著低于HD(2.11±0.19 vs 4.94±0.51),差异有统计学意义(P0.01)。诊断LTBI的ROC曲线分析表明,miR-150-5p的敏感性、特异性分别为0.80、0.80;miR-362-5p的敏感性、特异性为0.88、0.76。结论 miR-150-5p、miR-362-5p在LTBI和HD人群外周血单核细胞中表达存在显著差异,对LTBI辅助诊断具有一定参考价值。     

IL-22在抗结核免疫机制中的作用研究进展

<正>人体抗结核免疫机制非常复杂。CD4T细胞在抗结核菌感染免疫、结核病的病理生理过程中起了至关重要的作用。近年来的研究认为,抗结核免疫应答是CD4T细胞各个亚群及其细胞因子形成网络相互调节的结果。其中,白介素-22细胞因子(interleukin-22,IL-22)就是结核病发生发展中的一个重要参与者,它由激活的Th1细胞、Th17细胞、NK细胞、NKT细胞、以及新近发现的Th22细胞产生,并